高欣
- 作品数：30 被引量：150H指数：8
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- Ⅱ型胶原抗原分子结构的保守性与自身抗体形成关系的研究被引量：4
- 2005年
- 目的:为了解各种属动物Ⅱ型胶原分子结构的保守性和自身抗体形成的关系。方法:(1)从不同种属动物(包括人、猪、牛、鸡)中制备Ⅱ型胶原,用溴化氰把胶原分解成多个片段,以聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法(Westernblot)鉴定和测定抗体的各项特性。(2)用鸡Ⅱ型胶原自皮下多点注射至大鼠尾部,建立了类风湿关节炎(RA)的动物模型,并通过口服Ⅱ型胶原以观察其对疾病的干扰情况。(3)用ELISA法分析RA病人血清中自身抗体。结果:112例RA病人血清对牛Ⅱ型胶原IgG和IgA抗体反应的阳性率分别为19.6%和12.5%,对人Ⅱ型胶原IgG和IgA反应的阳性率则各自为17.5%和13.8%。对不同种属动物Ⅱ型胶原抗体IgG和IgA反应的阳性率无明显差异。IgA型阳性率高于一般正常比率。溴化氰能把各种属Ⅱ型胶原消化成8～12个片段,每个片段有类似的分子量,有类似的位点特异抗体,CB10、CB11、D和C是主要的位点抗体。动物模型结果表明预先口服胶原大鼠组发生RA的阳性率明显低于模型组,二组的发病率分别是44.4%和83.3%,口服胶原组的病情严重程度明显低于模型组,口服胶原组和模型组的肢体累及率分别为13.8%和49.9%。结论:不同种属Ⅱ型胶原分子结构有很高的保守性,自身抗体的产生可能是饮食胶原刺激人体免疫器官或直接刺激肠道黏膜的免疫系统所致,病人的主要位点特异抗体是CB10、CB11。此外该研究还发现D和C也是主要特异位点抗体,特异位点抗体与RA疾病程度有关。
- 陈仁涉鲍利民高芳堃高欣吴伟周惠琼李东民吴东海
- 关键词：免疫印迹
- ELISA法检测尿微量白蛋白的临床应用与评价被引量：25
- 2006年
- 目的:评价ELISA方法检测尿微量白蛋白的准确性、可靠性及其临床意义。方法:使用ELISA一步竞争法测定尿微量白蛋白,与放免法、化学发光法进行比较。结果:ELISA测定尿微量白蛋白与放免法、化学发光法测定的结果十分接近,相关系数r值分别为0.98和0.95。测定400例健康人晨尿尿微量白蛋白正常值为18μg/m l。糖尿病、高血压、冠心病患者尿微量白蛋白的检测,阳性率分别为39.2%、42.0%和36.1%。结论:ELISA法测定尿微量白蛋白具有经济、实用的特点,与化学发光法、放免法比较有良好的相关性。对于糖尿病、高血压、冠心病早期肾脏损伤的诊断以及疾病的预测具有重要意义。
- 鲍利民齐若梅高欣吴伟陈仁涉
- 关键词：尿微量白蛋白ELISA高血压冠心病
- SORL1基因rs2070045单核苷酸多态性与遗忘型轻度认知功能障碍的关联分析被引量：4
- 2013年
- 目的分析北京地区汉族人群分拣蛋白相关受体1(sortilin-related receptor1,SORL1,又称Sorl1或LR11)rs2070045单核苷酸多态性与遗忘型轻度认知功能障碍(amnestic mild cognitive impairment,aMCI)是否存在关联。方法采用病例对照的关联分析方法,提取139例aMCI(病例组)和213例非认知障碍健康人(对照组)外周血中基因组DNA,应用聚合酶链反应-高分辨溶解曲线(PCR-HRM)技术结合测序验证法检测SORL1基因rs2070045位点单核苷酸多态性的分布情况,分析SORL1基因多态性与aMCI的相关性。结果 aMCI组中GG,GT,TT基因型分别为54例(38.8),65例(46.8),20例(14.4);对照组中GG,GT,TT基因型分别为59例(27.7),103例(48.4),51例(23.9)。aMCI组与对照组SORL1基因rs2070045单核苷酸多态性的基因型及等位基因频率分布差异明显(χ2=7.109,P=0.029;χ2=7.315,P=0.007),男性aMCI组与对照组基因型及等位基因频率分布差异不明显(χ2=3.068,P=0.216;χ2=2.357,P=0.125),女性aMCI组与对照组基因型频率分布差异也不明显(χ2=4.229,P=0.121),等位基因频率分布差异明显(χ2=4.438,P=0.035)。结论 SORL1基因rs2070045位点单核苷酸多态性与北京地区汉族人群aMCI的发生明显相关,G等位基因为危险等位基因。
- 高欣于会艳孙亮曾湘豫刘铭杨泽高芳堃秦斌
- 关键词：单核苷酸多态性
- 尿铜蓝蛋白检测临床应用评价被引量：1
- 2004年
- 目的建立铜蓝蛋白酶联免疫吸附方法,开展临床糖尿病、糖尿病肾病尿铜蓝蛋白检测并评价其意义。方法对本院内科诊断的720名患者按所患疾病分组,分别收集尿样,采用酶联免疫吸附测定方法,检测尿中铜蓝蛋白和微量白蛋白分泌率,对结果进行统计分析比较。结果(1)糖尿病病人、糖尿病肾病病人的尿铜蓝蛋白分泌率(cerulopasmin excretion rate CER)和尿微量白蛋白分泌率(al-bumin excretion rate AER)的变化趋势呈一致性,二者正相关,r=0.8;(2)临床应用结果表明,对糖尿病肾病早期诊断的真阳性率为:CER达84％,AER达71％;假阴性率CER I6％,AER 29％。(3)糖尿病组、糖尿病肾病组、高血压组CER均值分别为(262±104)ng/min、(549±149)ng/min、(188±70)ng/min。结论(1)尿铜蓝蛋白检测是糖尿病肾病早期诊断的敏感指标;(2)尿铜蓝蛋白与微量白蛋白呈正相关性;(3)尿铜蓝蛋白检测有助于提高糖尿病肾病早期诊断的真阳性率并降低其早期诊断的假阴性率。
- 高芳堃魏洁鲍利民高欣吴伟齐若梅张楠陈仁社
- 关键词：铜蓝蛋白微量白蛋白糖尿病肾病糖尿病性肾病糖尿病肾病早期
- N-钙黏素融合蛋白对P19细胞神经分化的影响
- 2009年
- 目的探讨细胞间黏附分子对胚胎癌P19细胞体外定向神经细胞分化的作用。方法通过单层培养技术，采用视黄酸为诱导剂诱导P19细胞神经细胞分化，在浓度分别为0．1％明胶、2．5mg／L和10mg／L的N-钙黏素融合蛋白（N-cad-Fc）包被的培养板上进行培养，观察细胞形态的变化情况，用神经细胞特异标志蛋白β-Ⅲ型微管蛋白（Tuj-1）抗体进行免疫荧光染色，反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测干细胞标志蛋白（oct3／4）、神经前体细胞标志蛋白巢蛋白（nestin）、神经元素1（ngn1）、微管相关蛋白（map2）和神经胶质细胞的特异性标志蛋白（gfap）的表达情况。结果使用5×10^-7mol／L的视黄酸成功诱导了P19细胞神经细胞分化，0．1％明胶组、2．5mg／L N—cad—Fc组和10mg／L N-cad-Fc组分化为神经元细胞的百分率分别为7．8％、28．6％和26．8％，在包被有N-cad-Fc的培养板上培养，神经标志性蛋白ngn1和map2的表达明显提前、增强，干细胞标志蛋白oct3／4表达提前减弱，未见神经胶质细胞的特异性标志蛋白gfap表达。结论视黄酸可以诱导P19细胞向神经细胞分化，细胞间黏附分子对分化有促进作用。
- 高欣岳晓珊长冈正人赤池敏宏
- 关键词：细胞黏附分子神经元细胞分化
- 原发性高血压、冠心病患者尿微量白蛋白阳性率及其相关因素被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨微量白蛋白尿与原发性高血压和冠心病的关系。方法:采用酶标记抗原一步竞争法,检测81例原发性高血压患者、66例冠心病患者及108例健康对照的尿微量白蛋白。结果:原发性高血压患者尿微量白蛋白阳性率为54.3%,冠心病患者尿微量白蛋白阳性率为37.9%,高血压患者尿微量白蛋白与收缩压及高密度脂蛋白相关,尿微量白蛋白阳性冠心病患者发生急性心梗和尿微量白蛋白阴性冠心病患者发生急性心梗分别为40%和17.1%(P<0.05)。结论:冠心病尿微量白蛋白阳性患者预后不良,提示尿微量白蛋白测定的重要性。
- 高欣吴伟鲍利民陈仁涉齐若梅高芳堃
- 关键词：微量白蛋白尿高血压冠心病
- 轻度认知障碍的生物学标志被引量：5
- 2009年
- 高欣高芳堃
- 关键词：轻度认知障碍阿尔茨海默病生物学标志
- 口服Ⅱ型胶原对胶原诱发大鼠关节炎的抑制作用及其致病机制初探被引量：1
- 2002年
- 目的：观察口服Ⅱ型胶原蛋白（CⅡ）对大鼠胶原性关节炎（CIA）的疗效。方法：用鸡CⅡ致SD大鼠类风湿性关节炎模型，于致关节炎前一周口服CⅡ，持续4周，观察大鼠CIA的发生率及Ⅱ型胶原抗体产生情况。结果：与实验组比较，给予CⅡ灌胃的SD大鼠，其CIA发病率明显降低（44.4%:83.3%)，关节炎指数及肢体累及率降低（0.88:5.33;13.88%:47.91%)，两组Ⅱ型胶原抗体均为阳性。结论：CⅡ灌胃可以明显抑制CⅡ引起的关节炎的发病率，并能减轻关节炎的严重程度。
- 高欣陈仁涉等
- 关键词：致病机制胶原诱导性关节炎
- 硫氧还蛋白通过下调Nox4活性抑制血管内皮细胞黏附蛋白的表达被引量：1
- 2016年
- 目的探讨动脉粥样硬化始动环节中硫氧还蛋白（thioredoxin，Trx）对还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶Nox4亚型的作用，及其参与内皮细胞黏附蛋白表达的分子机制研究。方法应用腺病毒感染的方法在原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中建立高表达硫氧还蛋白（Ad—Trx）及其对照（Ad—GFP）的细胞模型。以致动脉粥样硬化重要危险因子氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）为刺激剂。用免疫印迹法检测细胞间黏附蛋白-1（ICAM-1）、Nox4及P22phox的表达；用间接免疫荧光的方法检验Trx在细胞内的表达；提取细胞膜组织，用酶学方法测定内皮细胞NADPH氧化酶的活性；应用荧光探针DCFH—DA进行细胞内活性氧检测。结果Trx过表达及NADPH氧化酶特异性的抑制剂Apocynin可以显著下调ox-LDL刺激下内皮细胞ICAM-1的表达和活性氧产生。与对照组相比过表达Trx抑制了内皮细胞膜组分中ox-LDL刺激下Nox4的表达、NADPH氧化酶活性增加以及P22phox的表达增加。结论Trx通过下调内皮细胞Nox4的活性，抑制内皮细胞ICAM-1的表达，减轻炎性损伤，保护内皮细胞功能。
- 陈北冬赵革新宫环孙杰高欣齐若梅
- 关键词：NADPH氧化酶内皮细胞
- P19胚胎癌细胞体外定向心肌细胞分化模型的构建被引量：2
- 2008年
- 目的：如何在体外将胚胎干细胞培育转化为大量的心肌细胞并进行移植,使之成为具有成熟心肌细胞功能？实验采用不同诱导剂对P19胚胎干细胞进行诱导,拟构建体外定向心肌细胞分化模型。方法：实验于2006-09/2007-03在日本东京工业大学生体分子机能工学研究室完成。①材料：P19细胞由日本东北大学加龄医学研究所提供。钙粘素融合蛋白N-cad-Fc由本研究室合成。②实验方法：P19细胞按1×10^7L^-1密度接种进行悬浮培养,分别以终浓度1,5,10,50,100nmol/L视黄酸及0.5%、0.75%、1%、1.25%、1.5%二甲基亚砜各自诱导4d,将形成的细胞聚集体分别接种于预铺有0.1%明胶、2.5mg/LN-cad-Fc、10mg/LN-cad-Fc基质的24孔板中培养10d。③实验评估：观察不同诱导条件及不同基质上的细胞跳动情况,免疫荧光染色检测心肌特异性蛋白TroponinT的表达,RT-PCR法检测心肌细胞标志性基因cardiacactin、gata-4的表达。结果：①P19细胞经1,5,10nmol/L视黄酸或0.5%、0.75%、1%二甲基亚砜诱导后,均出现可自主节律跳动的细胞。P19细胞聚集体悬浮培养至20d,预铺有0.1%明胶、2.5mg/LN-cad-Fc及10mg/LN-cad-Fc基质的培养板上节律跳动细胞团的出现率分别为44.6%、71.3%和70.1%。②药物诱导后,P19细胞心肌特异性蛋白TroponinT呈阳性表达。③与传统预铺有明胶的培养板比较,在预铺有N-cad-Fc的培养板上心肌标志性基因cardiacactin、gata-4的表达均明显升高,但10mg/LN-cad-Fc的表达量略低于2.5mg/LN-cad-Fc。④分别在上述不同基质上单层培养的P19细胞,二甲基亚砜诱导14d后均仍呈上皮样细胞形态,未见跳动细胞出现,RT-PCR检测无心肌标志性基因表达。结论：①使用0.5%～1%二甲基亚砜或1～10nmol/L视黄酸可成功诱导P19细胞心肌分化,心肌特异性蛋白TroponinT的表达早于心肌跳动的出现。②作为一种基质模型来模拟细胞间黏附,2.5mg/LN-cad-Fc是较适宜P19细胞心�
- 高欣岳晓珊长岡正人赤池敏宏
- 关键词：P19细胞心肌细胞心肌分化
