魏华
- 作品数：10 被引量：28H指数：3
- 供职机构：东南大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目江苏省科委自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学哲学宗教更多>>
- 噬菌体表面呈现技术在肿瘤中的应用
- 2002年
- 噬菌体表面呈现技术 (Phagedisplaytechnology)是近年来发展起来的新兴技术。目前将噬菌体表面呈现技术用于肿瘤 ,在肿瘤治疗方面取得了很大的进展 。
- 魏华
- 关键词：TAA肿瘤
- 考试焦虑个体的抑制控制缺陷及干预
- 考试焦虑是一种情境特定型的人格特质,表现为由考试相关刺激诱发的焦虑相关的认知、情绪和行为特征。注意控制理论认为考试焦虑个体容易被内在和外界的考试相关刺激干扰,可用的注意控制资源不足,抑制控制功能受损。然而目前直接针对考试...
- 魏华
- 关键词：考试焦虑事件相关电位
- 文献传递
- 猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达被引量：6
- 2005年
- 本研究扩增猪轮状病毒中国分离株 JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1 756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得 vp4 基因的表达,对表达的 VP4 蛋白进行 Western blot分析和血清中和抗体试验。结果表明:JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株 CRW 8 株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明 JL94株与 CRW 8 株属同一 VP4 血清型,而与 Gottfried株属不同血清型。JL94 株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于 aa81 aa207。vp4 基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的 20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性。所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断 JL94 在 MA104 细胞上引起的细胞病变。
- 宋岩师东方樊琛刘胜旺魏华李一经
- 关键词：猪轮状病毒VP4基因克隆真核表达
- 抗戊型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建与筛选被引量：5
- 2003年
- 目的 :构建人抗戊型肝炎病毒 (HEV)噬菌体抗体库 ,筛选人源中和性抗HEV的单克隆抗体 (mAb)。方法 :取抗HEV抗体阳性的 6例HE患者静脉血 ,分离淋巴细胞 ,提取细胞总RNA后逆转录。用一组人IgGFab基因特异性引物 ,分别扩增IgGκ0轻链与重链Fd段基因。将κ轻链与Fd段基因先后克隆入噬菌体载体pComb3的相应位点 ,经电穿孔法转化大肠杆菌XL1 Blue ,再以辅助噬菌体VCSM13超感染 ,构建人抗HEV噬菌体抗体库。采用独特的 5轮筛选法 (逐渐降低抗原包被量 ,严格洗脱条件 ) ,以固相化的 4种含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原 ,筛选人噬菌体抗体库 ,并以ELISA鉴定噬菌体抗体。结果 :经数次电转化构建了容量为1.9× 10 7重组率为 80 %的κ轻链基因库 ;容量为 1.8× 10 7重组率为 2 0 %的Fab基因库。以含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原特异淘筛 5次 ,出现特异富集。ELISA鉴定第 5轮筛选产物 ,得到 4株与HEVORF2重组混合抗原具有较高亲和力的Fab噬菌体抗体 ,可能为中和抗体。结论 :成功地构建了人抗HEV噬菌体抗体库 ,并获得人源抗HEV特异性噬菌体抗体。
- 魏华张建琼吕海芹孟继鸿鲁晓瑄谢维
- 关键词：噬菌体展示抗体库戊型肝炎病毒
- 噬菌体表面呈现技术在肿瘤研究中的应用
- 2002年
- 噬菌体表面呈现技术 (phagedisplaytechnology )是近年来发展起来的新兴技术。目前将噬菌体表面呈现技术用于肿瘤研究与治疗 ,取得很大进展。现综述噬菌体表面呈现技术在肿瘤研究中的应用前景。
- 魏华张建琼
- 关键词：肿瘤TAAMMP热休克蛋白金属蛋白酶
- HLA分型进展被引量：12
- 2003年
- HLA在免疫应答中占有重要地位 ,其在器官移植中的作用 ,与疾病相关性的意义 ,以及在亲子鉴定 ,人类学研究等方面的应用一直为临床所关注 ,建立快速而准确的HLA分型技术具有重要的临床与社会价值。现就HLA分型的各种方法及每种方法的长处与不足加以比较 ,综述如下。
- 魏华
- 关键词：HLAPCR-SSOPCR-SSCPPCR-RFLPPCR-SSP
- 脑脊液培养中分离出假白喉棒状杆菌被引量：2
- 2002年
- 王红姚玉虹高瑞王宝玲王晓燕赵彩风魏华
- 关键词：蛛网膜下腔出血细菌学鉴定脑脊液培养假白喉棒状杆菌
- 人源抗戊型肝炎病毒单克隆抗体的获得、鉴定与表达
- 戊型肝炎(HE)是戊型肝炎病毒(HEV)引起的一种急性病毒性肝炎.1955-1956年在印度新德里首次暴发,随后一些发展中国家相继有暴发流行的报道.戊型肝炎主要在发展中国家呈地区性或散发性传播,青壮年易感,病死率较高,中...
- 魏华
- 关键词：戊型肝炎病毒噬菌体抗体库单克隆抗体
- 文献传递
- 猪轮状病毒JL94中国分离株衣壳蛋白基因的分析被引量：2
- 2005年
- 根据GenBank发表的猪轮状病毒衣壳蛋白vp4基因、vp6基因和vp7基因保守序列,设计合成3对引物,分别扩增猪轮状病毒中国分离株JL94株的此3段基因并进行序列分析。结果表明,JL94株vp4基因与国外分离株CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP4氨基酸同源性分别为97.16％、95％、71.88％、73.45％和70.88％;JL94株vp6与CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP6氨基酸同源性分别为96.98％、97.48％、93.20％、97.48％和93％;JL94株vp7基因与CRW-8株、OSU株、Gottfried株、4F株和4S株的VP7氨基酸同源性分别为98％、99.90％、75.40％、84.66％和80％。可见JL94株同CRW-8株、OSU株同源性更高些;vp4和vp7基因在同型间高度保守而不同型间差距较大,vp6基因在同群和非同群间差别不是很明显。同时可以判定JL94属于A群Ⅰ亚群G5P7血清型PRV。研究猪轮状病毒中国分离株JL94株衣壳蛋白基因的特征,为研制高效抗病毒疫苗奠定基础。
- 宋岩李丹丹师东方魏华陈淑红李一经
- 关键词：猪轮状病毒中国分离株VP7基因氨基酸同源性VP6基因VP4基因
- 人源抗戊型肝炎病毒单克隆抗体的获得与鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的 获得人源中和性抗戊型肝炎病毒 (HEV)单克隆基因工程抗体。方法 采用五轮筛选法 (逐轮降低抗原包被量 ,严格洗脱条件 ) ,以固相化的 4种含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原淘筛本室构建的HEV患者外周血源的噬菌体抗体库。获得有特异结合活性的噬菌体抗体 ,酶切鉴定抗体基因插入。切去噬菌粒上衣壳蛋白gⅢ基因构建表达载体 ,在大肠杆菌中可溶性表达抗HEV抗体Fab段 ,ELISA、Westernblot检测抗体免疫学活性 ;测序分析抗体基因。结果 筛选出 4株与含中和抗原表位的HEV代表株ORF2重组混合抗原特异结合而与BSA、HBsAg无交叉结合反应的噬菌体抗体 ,可能为中和抗体。切去gⅢ基因 ,在大肠杆菌中表达可溶性抗体Fab段 ,表达量在细菌培养液上清和细菌裂解液中差异无显著性。可溶性抗体与含中和抗原表位的HEVORF2重组混合抗原有特异结合活性 ,与BSA、HBsAg无交叉结合反应。Westernblot显示在相对分子质量 (Mr)略大于 4 5× 10 3 处有一明显条带 ,与Mr4 8× 10 3 的Fab大小一致。DNA测序分析表明 ,Fab段VH 属于IgGVH3基因家族 ,VL 属于Vκ1基因家族。结论 利用噬菌体抗体库技术成功获得抗HEV的人源单克隆抗体。
- 张建琼魏华鲁晓萱鲍海逊孟继鸿谢维
- 关键词：戊型肝炎病毒单克隆抗体免疫学活性外周血
