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齐延新: 作品数：15 被引量：12H指数：2; 供职机构：吉林大学更多>>; 发文基金：吉林省重大科技攻关项目转基因生物新品种培育专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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表达Apoptin基因抗肿瘤双特异性重组腺病毒的构建及鉴定: 为了开展靶向性重组腺病毒进行基因治疗的研究,构建了三种穿梭质粒pAd-VP3,pAd–VT和pAd-VP,每种载体均含有Apoptin基因,其中pAd–VT和pAd–VP为双特异性抗肿瘤重组腺病毒,他们分别含有hTERT...; 王卓越李霄阚式绂王宇航齐延新金宁一; 关键词：腺病毒载体 HTERT启动子基因治疗; 文献传递

重组腺病毒纯化、质量控制及安全性评价初步研究: 癌症的传统治疗手段为手术疗法、化学疗法和放射疗法治疗，均具有一定的局限性，基因治疗法为癌症的治疗提供了一个新途径。常用的基因治疗病毒载体为腺病毒,腺病毒(Adenoviruses,Ad)是无囊膜DNA病毒，双链DNA基因...; 齐延新; 关键词：重组腺病毒临床前试验纯化安全性评价; 文献传递

利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体: 目的研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP,构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK,利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP,与TTVV共转(感)染BHK细胞,通过...; 阚式绂金宁一李霄王宇航刘立明王卓越齐延新王金辉刘广臣

E3L缺失型天坛株痘苗病毒减毒载体的构建及筛选: 利用PCR技术、DNA克隆技术构建携带有痘病毒早晚期强力复合启动子(PE/L)、天坛株痘苗病毒E3L基因外两侧同源重组臂、绿色荧光蛋白(EGFP)、loxp序列的穿梭质粒pSK-PTE-EGFP及用于敲除EGFP基因的质...; 王宇航李霄阚式绂王卓越齐延新杜寿文金宁一; 关键词：重组痘苗病毒减毒; 文献传递

重组H8N4亚型禽流感病毒的拯救: 2012年; 将H8N4亚型流感病毒的HA和NA基因插入双向转录/表达载体pHW2000中,并与本实验室保留的适应毒株A/PR/8/34(H1N1)的6个质粒pHW2000-PB2、pHW2000-PB1、pHW2000-PA、pHW2000-NP、pHW2000-M、pHW2000-NS共转染293T和MDCK混养细胞,在细胞内部完成病毒粒子的组装,然后接种SPF鸡胚,经3代扩毒后,成功拯救了H8N4亚型重组流感病毒,并对其进行鉴定及生物学特性分析。本研究结果为该亚型禽流感病毒变异机理研究及疫苗的研制等奠定了基础。; 崔鹤馨李沂田宇飞袁森凡敏靖杰齐延新郭欢欢田明尧金宁一; 关键词：病毒拯救禽流感病毒重组病毒

利用Cre-loxp系统及EGFP/Brdu双筛选标记构建天坛株痘苗病毒TK基因缺失痘苗病毒载体: 研究去除重组痘苗病毒中的筛选基因EGFP，构建一株更加便于筛选的痘苗病毒载体。针对痘苗病毒天坛株复制非必需区TK，利用Cre-loxp系统构建了穿梭载体pSK-PTK-EGFP，与TTVV共转(感)染BHK细胞，通过同源...; 阚式绂金宁一李霄王宇航刘立明王卓越齐延新王金辉刘广臣; 关键词：基因缺失病毒载体

双特异性抗肿瘤重组腺病毒对前列腺癌细胞的抑制作用: 2012年; 目的探讨结合肿瘤特异性启动子hTERTp和特异性抑癌基因Apoptin的腺病毒Ad—hTERTp—Ela—Apoptin（Ad—VT）对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用。方法于96孔板内制备前列腺癌PC一3单层细胞（5×10^3个／孔），分别用100个感染复数（multiplicityofinfection，MOI）、10MOI和1MOI的重组腺病毒Ad—VT、Ad—CMV—Apoptin（Ad—VP3）、Ad—hTERTp—E1a—EGFP（Ad．GT）和Ad—CMV．EGFP（Ad—EGFP）进行感染，以未感染孔为对照，每个剂量设3个复孔。采用96h噻唑盐（MTT）法，检测重组腺病毒埘PC-3细胞的抑制作用。于6孔板制备PC-3单层细胞（1×10^6个／孔），分别用100MOI的Ad—VT、Ad—VP3、Ad-GT和Ad—EGFP感染PC-3细胞，培养48h后，分别应用AO／EB染色法、DAPI染色法、AnnexinV检测法对PC-3细胞进行染色，在显微镜下观察细胞形态，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式；应用Caspase榆测法对PC-3细胞提取总蛋白，检测Caspase酶活性，分析Ad-VT对PC-3细胞的抑制方式。结果MTT法结果显示除Ad．EGFP外，Ad—VT、Ad—VP3和Ad—GT均不同程度地表现出对PC-3细胞的抑制作用，其中Ad—VT、Ad—GT的抑制作用强于Ad—VP3，差异有统计学意义（P〈0．05）；培养48、72、96h，随着MOI的增高，Ad—VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定剂量效应关系趋势，感染剂量为100MOI时，Ad．VT对PC-3细胞的抑制作用具有一定时间效应关系趋势。通过AO／EB、DAPI、AnnexinV检测法和Caspase酶活性检测结果显示，Ad—VT可通过诱导PC-3细胞的捌亡抑制PC-3细胞的增殖。其中AO／EB染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞呈现橘红色；DAPI染色可观测到经Ad—VT感染的PC-3细胞细胞核呈现亮蓝色，且存在核内物质碎裂；AnnexinV检测法可观测到经Ad—VT感染的PC．3细胞出现磷脂膜外翻、细胞核皱缩、细胞膜通透性增加等凋亡特征；Caspase检测结果显示Ad—VT可明显上调Caspase2、3、6、8�; 王金辉张慕淳李霄齐延新刘广臣孙丹丹金宁一; 关键词：前列腺癌凋亡素重组腺病毒凋亡

缺失E3L基因减毒天坛株痘苗病毒的构建及筛选被引量：4: 2011年; 通过在E3L同源重组臂中插入含有增强型痘苗病毒早晚期启动子(pE/L)、增强型绿色荧光蛋白基因和同向Loxp(Locus of X-over P1)序列的表达盒构建穿梭质粒pTE-EGFP。利用pTE-EGFP和野生型天坛株痘苗病毒共转染仓鼠肾细胞(BHK-21),通过对绿色荧光蚀斑的10次筛选,构建缺失E3L基因并含有EGFP基因的重组痘苗病毒rTTVV-TE--EGFP+。利用rTTVV-TE--EGFP+和含有Cre(Cyclization recombination)重组酶基因的重组质粒pVAX1-Cre共转染BHK-21细胞,通过对无荧光蚀斑的10次筛选,构建无筛选标记的天坛株痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--,并利用聚合酶链式反应(PCR)对其进行鉴定。鉴定结果显示,rTTVV-TE--中无E3L基因转录和EGFP基因表达。以上结果说明,所构建的痘苗病毒减毒株rTTVV-TE--完全缺失了E3L基因和外源筛选标记EGFP基因,且具有良好的遗传稳定性。; 王宇航李霄王浩然阚式绂王卓越齐延新吴娜杜寿文金宁一; 关键词：病毒载体

重组腺病毒Ad-GP的纯化: 含有肿瘤特异性启动子PEG-3p和人5型腺病毒复制必需基因E1A和绿色荧光蛋白基因EGFP的重组腺病毒Ad-GP,采用阴离子交换色谱法制备纯化重组腺病毒AdGP,取代传统的氯化铯密度梯度离心方法纯化,获得稳定的、可扩大的...; 齐延新李霄金宁一; 文献传递

E3L缺失型天坛株痘苗病毒减毒载体的构建及筛选: 利用PCR技术、DNA克隆技术构建携带有痘病毒早晚期强力复合启动子(PE/L)、天坛株痘苗病毒E3L基因外两侧同源重组臂、绿色荧光蛋白(EGFP)、loxp序列的穿梭质粒pSK-PTE-EGFP及用于敲除EGFP基因的质...; 王宇航李霄阚式绂王卓越齐延新杜寿文金宁一; 关键词：重组痘苗病毒减毒; 文献传递

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