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龚斐然: 作品数：28 被引量：47H指数：4; 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金苏州市“科教兴卫工程”青年科技项目苏州市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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含有ATG7 siRNA的外泌体及其应用: 本发明属于医学领域，具体涉及一种ATG7 siRNA的外泌体在制备治疗胆道癌药物中的应用。该方法包括：S1：提取表达重组蛋白CD63‑APO‑A1的靶向性外泌体；S2：将ATG7 siRNA装载入S1中的靶向性外泌体得到...; 李伟梁展文陈凯龚斐然何康徐梦丹吴梦瑶徐彩华

血清免疫固定电泳和游离轻链检测在多发性骨髓瘤的诊断价值被引量：9: 2016年; 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者血清免疫固定电泳(IFE)和游离轻链(sFLC)检测的临床价值。方法对60例临床确诊MM患者进行IFE分析和sFLC水平检测,并对结果进行分析。结果血清IFE分析结果:IgG型占55.00%(33/60),IgA型占18.33%(11/60),IgM型占8.33%(5/60),单纯轻链型占18.33%(11/60)。sFLC检测结果:35例κ型MM患者的sFLC-κ水平和25例λ型MM患者的sFLC-λ水平均高于正常参考范围(P<0.01);其sFLC-κ/λ比值分别>1.65和<0.26。血清IFE分析与sFLC检测结果完全符合。结论血清IFE分析和sFLC检测在MM的诊断与分型、病情监测、疗效评估和指导治疗等方面具有重要的临床价值。; 杨天杰龚斐然周佳子常伟荣张洪涛; 关键词：多发性骨髓瘤免疫固定电泳游离轻链

一种具有炎症基础的胰腺癌动物模型的建立方法: 本发明提供一种具有炎症基础的胰腺癌动物模型的建立方法，步骤如下：第一步，pLVX‑luciferase‑IRES‑ZsGreen1质粒的构建；第二步，慢病毒介导的luciferase过表达系统的建立；第三步，稳定表达lu...; 李伟吴梦瑶陶敏龚斐然; 文献传递

蛋白磷酸酶2A催化亚基α显性负性突变体表达载体对肝癌细胞生长的影响被引量：3: 2013年; 目的构建肝癌组织特异性启动子驱动的蛋白磷酸酶2A催化亚基Ⅸ显性负性突变体（DN—PP2Acca表达载体，研究其对肝癌细胞生长的影响。方法将甲胎蛋白（AFP）基因的增强子和磷酸甘油酸激酶（pgk）基因的启动子组合形成的肝癌组织特异性AFpg启动子。采用定点突变将野生型蛋白磷酸酶2A催化亚基仅（PP2AcⅨ）突变为DN—PP2Aca将AFpg启动子和DN—PP2Ac。编码序列构建成AFpg启动子调控的DN—PP2Aca 表达载体pGL3-Basic—AFpg—PP2Acc。荧光素酶报告基因实验检测AFpg启动子的转录活性。质粒pcDNA3．1（＋）、pGL3-BaSic、pcDNA3．1（＋）-DN—PP2Ac0a、pGL3-Basic-AFpg、pGL3-Basic-AFpg-PP2AcGa分别转染L02、SK—Hep-1、HepG2和Hep3B细胞，Westernblot检测PP2Ac蛋白表达水平，四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞生长情况。成组t检验分析不同处理组间的细胞活力差异。结果L02、SK-Hep-1、HepG2和Hep3B细胞中，AFpg启动子相对荧光素酶活性分别为3．61±1．07、3．46±0．66、98．70±18．60、88．70±19．53，AFpg启动子在表达AFP的细胞中具有高转录活性。pGL3-Basic—AFpg—PP2AcⅨ可特异性地使DN—PP2AcⅨ表达于AFP阳性肝癌细胞HepG2和Hep3B，并抑制其生长，转染72h后，HepG2细胞活力下降42．65％±3．99％，Hep3B细胞活力下降39．87％±3．91％，与0h时比较，差异均有统计学意义（t值分别为13．0563和12．9920，P值均〈0．01）。pGL3-Basic-AFpg—PP2Ac0a对AFP阴性细胞的生长无明显影响。结论AFpg启动子调控的DN—PP2Aca表达载体特异性地抑制AFP阳性肝癌细胞的生长，可用于肝癌组织特异性基因治疗。; 李道明李伟陶敏陈凯龚斐然徐泽宽陈政; 关键词：肝细胞甲胎蛋白类

斑蝥素对胰腺癌细胞系PANC1、CFPAC-1的凋亡诱导作用及机制研究被引量：1: 2011年; 目的研究斑蝥素对胰腺癌细胞系PANCl、CFPAC-1的凋亡诱导作用及机制。方法用斑蝥素处理PANCl、CFPAC-1细胞。四甲基偶氮唑蓝（MTF）法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；酶化学法检测caspase活性；RT—PCR及蛋白质印迹法检测凋亡相关基因的表达。结果斑蝥素呈剂量依赖性明显抑制胰腺癌细胞系PANCl、CFPAC-1增殖及诱导细胞凋亡。10μmol／L斑蝥素处理细胞72h，PANCl、CFPAC-1细胞的增殖抑制率最高，分别达（52．95±6．34）％和（71．21±6．30）％。处理24h，PANCI细胞的早期和晚期凋亡细胞分别从7．35％增加到24．89％、6．36％增加到17．73％；CFPAC-1细胞从6．39％增加到24．70％、9．21％增加到12．58％（P值均〈0．01）。PANCl细胞的caspase8和caspase9活性分别为对照组的（155．84-11．5）％和（194．64-14．7）％；CFPAC-1细胞分别为对照组的（182．54±24．3）％和（215．84±12．2）％（P值均〈0．01）。促凋亡基因TNF-α、TRAILRI、TRAILR2、Bad、Bak和Bid表达增加，抗凋亡基因Bcl-2表达减少。结论斑蝥素通过激活Caspase、上调促凋亡基因及下调抗凋亡基因的表达从而诱导胰腺癌细胞凋亡。; 李伟陈政宗洋龚斐然朱毅殷红徐泽宽陶敏苗毅; 关键词：胰腺肿瘤斑蝥素

蛋白磷酸酶2A抑制剂对胰腺癌细胞株CFPAC-1c—Jun氨基末端激酶／蛋白激酶B／叉头转录因子信号通路的调控作用: 2013年; 斑蝥素可抑制蛋白磷酸酶2A（PP2A），并抑制胰腺癌细胞生长。我们发现，斑蝥素可激活c—Jun氨基末端激酶（JNK）。本研究旨在检测斑蝥素和经典PP2A抑制剂冈田酸对JNK／Akt／FKHR通路的影响。; 李伟陈凯李道明陶敏龚斐然徐泽宽; 关键词：蛋白磷酸酶2A 信号通路胰腺癌细胞株抑制剂蛋白激酶B

组织特异性的重组质粒、病毒及其应用: 本发明涉及生物技术领域，公开了针对AFP阳性肝癌细胞的组织特异性重组质粒、重组病毒质粒、重组病毒及其在制备治疗AFP阳性肝癌药物中的应用。本发明使用具有肝癌组织特异性的AFpg启动子调控DN-PP2Ac表达，使DN-PP...; 李伟龚斐然陶敏

用于胰腺癌治疗的工程化外泌体: 本发明属于医学领域，具体涉及一种用于胰腺癌治疗的工程化外泌体。所述工程化外泌体含有BRCA1/2 siRNA。本发明通过BRCA1/2 siRNA实现针对BRCA1、BRCA2靶向干预，从而将非同源重组修复缺陷的胰腺癌转...; 李伟梁展文金彩徐清莹许振龚斐然吴梦瑶徐彩华徐梦丹何康

一种具有炎症基础的肺癌动物模型的建立方法: 本发明提供一种具有炎症基础的肺癌动物模型的建立方法，步骤如下：第一步，pBabe‑CMV‑EGFP‑puro质粒的构建；第二步，逆转录病毒介导的EGFP过表达系统的建立；第三步，稳定表达EGFP的肺癌细胞系的建立；第四步...; 李伟段卫明吴梦瑶龚斐然; 文献传递

蛋白磷酸酶2A抑制剂通过c—Jun氨基末端激酶／蛋白激酶B通路抑制胰腺癌细胞生长的机制: 2012年; 斑蝥素是蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase 2A，PP2A）的抑制剂。PP2A可使c—Jun氨基末端激酶（c-Jun N—terminal kinase，JNK）等参与细胞生长的多种激酶去磷酸化而失活。本研究拟检测斑蝥素和经典的PP2A抑制剂冈田酸对胰腺癌细胞JNK／Akt信号通路的活性及细胞生长的影响。; 李伟袁苏徐段卫明龚斐然陈政苗毅徐泽宽陶敏; 关键词：胰腺癌细胞生长蛋白磷酸酶2A AKT信号通路氨基末端激酶抑制剂 PP2A

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