任珍珍
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
- 供职机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 重叠延伸PCR法构建小菜蛾化学感受蛋白1基因突变体研究被引量：3
- 2011年
- 【目的】探索重叠延伸PCR法在昆虫化学感受蛋白基因点突变上的应用,研究半胱氨酸(Cys32)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)结合特性的影响。【方法】用计算机软件模拟PlxyCSP1上Cys32突变前后的蛋白三级结构以及与配体化合物的结合情况,确定点突变位点。根据扩增得到的PlxyCSP1序列设计并合成重叠引物,利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1上的Cys32突变成色氨酸(Trp32),获得突变体PlxyCSP1-M。将突变后的基因与载体pET-32a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)。【结果】分子对接图显示,配体可以顺利进入PlxyCSP1的结合口袋,而无法进入PlxyCSP1-M的结合口袋。结合能预测显示,配体化合物与PlxyCSP1的结合能均为正值,与PlxyCSP1-M的结合能均为0。突变后的重组质粒测序结果表明,Cys32(TGC)已突变为Trp32(TGG),经IPTG诱导,该菌表达了分子质量约为36 ku的融合蛋白。【结论】Cys32是影响PlxyCSP1结构和功能的重要氨基酸残基。Cys32突变为Trp32后,PlxyCSP1-M结合特性发生了变化,不能与配体化合物正常结合。
- 任珍珍刘晶晶柳晓磊陈永李珣胡美英
- 关键词：小菜蛾重叠延伸PCR
- 小菜蛾化学感受蛋白突变体的构建(英文)
- 2012年
- [目的]研究半胱氨酸(Cys58)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)与农药化合物结合特性的影响。[方法]利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1中Cys58突变成色氨酸(Trp58),获得突变体PlxyCSP1-M2。构建表达载体表达突变蛋白,并进行Western Blot检测。[结果]构建了突变基因的原核蛋白表达载体pET32a-PlxyCSP1-M2,并表达35kDa融合蛋白[结论]利用重叠延伸PCR法成功在原核系统中表达了PlxyC-SP1突变蛋白。
- 刘晶晶胡美英任珍珍李亚楠
- 关键词：小菜蛾原核表达
- 小菜蛾化学感受蛋白突变体的构建
- 2012年
- [目的]研究半胱氨酸(Cys58)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(PlxyCSP1)与农药化合物结合特性的影响。[方法]利用重叠延伸PCR法,将PlxyCSP1中Cys58突变成色氨酸(Trp58),获得突变体PlxyCSP1-M2。构建表达载体,表达突变蛋白,并进行Western Blot检测。[结果]构建了突变基因的原核蛋白表达载体pET32a-PlxyCSP1-M2,并表达了大小为35 kDa的融合蛋白。[结论]利用重叠延伸PCR法成功在原核系统中表达了PlxyCSP1突变蛋白。
- 刘晶晶胡美英任珍珍李亚楠
- 关键词：小菜蛾原核表达
- 小菜蛾化学感受蛋白突变体的构建与结合特性
- 化学感受蛋白（chemosensory proteins，CSPs）是昆虫感受系统中的重要蛋白，是昆虫适应环境并与寄主植物协同进化的结果。对CSPs结合特性的研究有助于阐明昆虫的化学感受机理，加深对昆虫化学感受机理的认识...
- 任珍珍
- 关键词：小菜蛾化学感受蛋白重叠延伸PCR同源建模荧光猝灭
- 昆虫嗅觉相关蛋白的结构和功能被引量：9
- 2010年
- 昆虫在长期进化的过程中形成了复杂的嗅觉系统,气味剂结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)、嗅觉受体(olfactory receptors,ORs)是其最主要的组分.其主要作用是结合外围挥发性的气味分子并将信号传递给细胞内的第二信使.OBPs和ORs的结构、功能、表达、进化是昆虫行为与进化关系的重要研究领域和研究热点.本文主要总结了近年来昆虫OBPs和ORs的结构特点、生理功能、表达特点、遗传进化等方面研究的最新进展,对OBPs和ORs的研究趋势进行了展望,为昆虫嗅觉系统进化研究及寻找害虫防治新途径提供参考信息.
- 任珍珍柳晓磊胡美英
- 关键词：嗅觉受体进化
- 昆虫泛素基因和功能研究进展被引量：8
- 2009年
- 泛素(Ubiquitin)是一种广泛存在于真核细胞中的小分子量蛋白质,其基本功能是通过泛素-蛋白水解酶复合体通路(Ubiquitin proteasome pathway UPP)高效并高度选择性降解蛋白质。本文综述了昆虫泛素基因的克隆鉴定、表达特点、作用途径,重点介绍了昆虫泛素在调控转录因子、调节细胞周期和细胞凋亡、细胞生长以及信号转导中的作用。泛素调控机制、信号转导、生理功能及其影响因素,以及针对泛素设计特异性昆虫生长发育调节剂可能是今后昆虫泛素研究的重点。
- 李晓梅任珍珍陈永钟国华
- 关键词：泛素昆虫基因
- 昆虫化学感受基因家族研究新进展被引量：2
- 2010年
- 主要介绍了化学感受基因家族的功能,进化模式及环境适应性等方面的最新进展,并对该基因家族今后的研究进行了展望。
- 柳晓磊翁群芳任珍珍胡美英
- 关键词：气味结合蛋白化学感受蛋白受体进化
- 小菜蛾肌球蛋白重链部分cDNA序列克隆、表达概况及分析被引量：1
- 2010年
- 肌肉肌球蛋白重链在生物运动过程中具有至关重要的作用,但在昆虫中此类基因极少被报道。首次克隆和分析小菜蛾肌球蛋白重链部分cDNA序列,GenBank登录号为FJ462712,其长408个碱基,推测编码135个氨基酸。同源分析表明:此多肽序列与凤蝶、家蚕、果蝇的同源性分别为95%,93%,82%。半定量RT-PCR研究表明:小菜蛾MHC基因在不同的生长发育阶段的表达皆不相同,在老熟幼虫和成虫中的表达量显著高于低龄幼虫和蛹。为进一步鉴定小菜蛾肌球蛋白重链的生理特征提供基因序列信息。
- 龚亮钟国华任珍珍胡美英
- 关键词：小菜蛾肌球蛋白重链CDNA克隆
- 噬菌体展示技术在蛋白质研究中的应用被引量：7
- 2009年
- 噬菌体展示技术所展示的外源蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性,并实现基因和表达蛋白质的体外转换,是蛋白质研究的重要工具。目前用于构建展示文库的噬菌体主要有丝状噬菌体、λ噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体,且在展示功能蛋白结构域、确定核酸结合蛋白质及其相互作用、蛋白质相互作用、蛋白质定向设计和空间结构改造、新受体和配体的发现、筛选酶抑制剂、细胞信号转导、抗原表位分析等方面应用广泛,应用前景良好。
- 李珣任珍珍钟国华
- 关键词：噬菌体展示技术蛋白质
