余利红
- 作品数：13 被引量：81H指数：4
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 神经突起导向因子NETRIN-4与NNAT的相互作用及其表达相关性研究
- 神经突起与其靶细胞之间精确联系的建立是由多种导向因子共同作用完成的。Netrin基因家族是此类因子的代表之一。本研究主要围绕该家族成员之一Netrin-4及其相互作用蛋白NNAT(Neuronatin)的结构、功能和表达...
- 余利红
- 关键词：酵母双杂交神经发育神经突起
- 文献传递
- neuronatin shRNA真核表达载体的构建及其生物学功能被引量：1
- 2009年
- 目的:获得能持续干扰neuronatin(nnat)基因表达的细胞,观察nnat基因沉默对神经细胞发育与分化的影响,为研究基因功能奠定基础。方法:构建含nnat基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒,将质粒转染大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12,RT-PCR方法筛选出最有效干扰质粒,稳定转染PC12细胞后观察细胞表型变化,免疫荧光检测nnat蛋白表达,NGF诱导观察nnat表达下调对细胞分化的影响。结果:成功构建并筛选出有效的靶向nnat基因的shRNA真核表达载体;载体稳定转染PC12细胞之后能特异性沉默nnat基因的表达,PC12细胞长出突起,向神经元方向分化,加入诱导因子NGF后能促进突起生长。结论:nnat可能是作为神经分化抑制因子在神经发育与成熟过程中发挥作用。
- 余利红余新炳项鹏
- 关键词：RNA干扰SHRNA
- Nnat基因在大鼠脑发育过程中表达的初步研究
- 2012年
- 目的:观察Nnat基因在大鼠脑发育过程中基因表达的变化规律,藉以探讨Nnat在神经系统发育过程中的作用。方法:采用半定量RT-PCR法分析出生前后大鼠脑内Nnat表达水平的变化,Western blot检测Nnat蛋白的表达。结果:在大鼠胚胎第9 d(E9)脑内Nnat mRNA开始表达,但表达量较低,以后其表达量逐渐升高,出生前有轻微下调。出生后大鼠的不同脑区Nnat mRNA的表达量都呈现下降趋势,60 d时达到较低的水平。Nnat蛋白在不同脑区都具有表达,但不同亚型蛋白量的相对比例不同。结论:Nnat基因在胚胎期及出生后大鼠脑内的表达量与中枢神经系统发育及分化过程的时间上有一定的同步性,提示Nnat的作用可能与神经元分化的调节有关。
- 余利红张成岗
- 关键词：脑发育
- 一个中国Gilbert综合征家系的遗传学分析被引量：18
- 2006年
- 对一个中国汉族G ilbert综合征遗传家系致病基因突变位点进行鉴定,以期了解该病的分子遗传学基础。首先提取先证者基因组DNA,PCR扩增尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶UGT1A1基因的5个外显子,以琼脂糖电泳鉴定PCR产物,纯化后直接测序鉴定。基因扫描显示,与血清胆红素水平密切相关的UGT1A1基因在第1和第5外显子存在纯合突变,而UGT1A1基因启动子区域和内含子/外显子剪接边界位点序列未检测到突变。进一步对其他家系成员该基因的相应位点进行突变检测,结果显示他们在第1和第5外显子也存在杂合突变,其中还有两个成员在启动子区域检测到(TA)插入突变。对家系成员未抗凝新鲜血液进行生化检测证实了基因突变分析的结果。综合以上结果发现该家系3种突变并存,致病因素为第1和/或第5外显子突变,为显性遗传,两种突变位点纯合导致先证者出现严重胆红素代谢功能障碍。该家系因此成为G ilbert综合征突变位点及其致病机理研究的一个典型临床病例。
- 余利红高静王春丽王静高艳袁巧玲孙志贤王航雁张成岗
- 关键词：GILBERT综合征基因突变UGT1A1
- 原发性红斑性肢痛症致病基因研究进展被引量：8
- 2005年
- 原发性红斑性肢痛症是一种罕见的常染色体单基因遗传病,国际范围内仅报道过6个家系及一些散发病例。该病虽无生命危险但严重影响患者生活,以肢端阵发性剧烈灼烧样疼痛以及对温度敏感为主要特征,但其发病机制一直不明。Drenth等通过家系分析于2001年将原发性红斑性的致病基因定位于2q31-q32。在此基础上,我国学者杨勇等进一步研究发现该病的致病基因可能为1个钠离子通道基因scn9a,其他研究组针对该基因进行基因敲除后的结果也提示了该可能性。然而,由于该疾病可能具有遗传异质性,该致病基因尚未在其他家系中得到确证。更深入的分子遗传学研究结果将为原发性红斑性肢痛症的正确诊断和合理治疗提供依据。
- 李谋余利红刘小林孙志贤张成岗
- 关键词：原发性红斑性肢痛症致病基因致病基因定位单基因遗传病家系分析遗传异质性
- Neuronatin基因研究进展被引量：2
- 2003年
- Neuronatin (Nnat)是最近克隆的脑特异表达的新基因 ,在大脑发育过程中被选择性地剪接 .人Nnat基因全长 3 973bp ,含有 3个外显子和 2个内含子 .NnatmRNA有α和β两种剪接形式 ,分别编码 81个和 5 4个氨基酸 ,两者具有同一相位的开放阅读框架 ,差别在于 β形式中间的外显子被剪切掉 .人Nnat是单拷贝基因 ,定位于染色体 2 0q11 2～ 12 .小鼠Nnat基因定位于 2号染色体末端 .该基因是印记基因 (imprintedgene) ,仅在父本来源的等位基因表达 ,而母本来源的等位基因则被甲基化不能表达 .该基因在胚胎期及出生后早期大量表达 ,而在成年和衰老动物大脑中表达明显降低 ,因此推测该基因与大脑的发育和分化密切相关 .成年动物中垂体前叶是NnatmRNA唯一强表达的地方 .推测其蛋白质产物具有疏水N端和亲水C端 ,是跨膜蛋白 ,其确切功能尚属未知 .
- 余利红周仁平张成岗
- 关键词：脑发育印记基因
- β-Netrin抗原表位的分析及其抗体的制备与鉴定被引量：7
- 2005年
- 目的:制备抗神经细胞突起生长诱向因子(β-Netrin)的多克隆抗体(pAb)和单克隆抗体(mAb),并对其特异性进行鉴定。方法:应用GoldKey软件分析人βNetrinC末端结构域氨基酸的序列(共114个氨基酸),确定抗原表位并人工合成多肽。然后采用碳化二亚胺法,将合成肽与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联作为抗原,免疫BALB/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次进行HAT选择培养,间接ELISA法筛选阳性的杂交瘤细胞并克隆化。对分泌的mAb的效价、Ig亚类(型)及特异性,分别用间接ELISA和Westernblot进行鉴定。同时,通过免疫细胞化学染色鉴定抗体的特异性。另外,以偶联的分子免疫新西兰白兔,制备抗β-Netrin的pAb,用Westernblot鉴定其特异性。结果:以确定的此16个氨基酸的序列NH2-FRGKRT-LYPESWTDRG-COOH作为抗原表位,以人工合成多肽与BSA偶联作为免疫原,获得3株可稳定分泌特异性抗β-Netrin mAb的杂交瘤细胞。免疫细胞化学染色结果表明,这3株抗体均能特异性地识别细胞中的抗原。另外,制备了高效价的抗β-Netrin的pAb,并能特异性地识别原核表达的β-Netrin蛋白。结论:采用人工合成多肽作为半抗原成功地制备出抗β-Netrin的pAb和mAb。
- 余利红高艳王利红韩洪彦孙志贤张成岗
- 关键词：合成肽抗原表位抗体制备抗体鉴定
- 小鼠Neuronatin基因真核表达载体构建及其蛋白产物的检测被引量：2
- 2008年
- 【目的】构建基因Nnat的真核表达载体pEGFP-N1/Nnat并在真核细胞中表达目的蛋白。【方法】RT-PCR法扩增Nnat基因编码区(ORF),利用基因克隆技术构建真核表达载体,酶切及测序进行鉴定;载体构建成功后转染HepG2细胞,观察融合蛋白在细胞中的定位,Western blot检测其在真核细胞中的表达。【结果】RT-PCR法扩增出Nnat基因的两种亚型,相应的双酶切能够获得插入的目的基因片断,测序分析未发现突变;荧光显微镜观察到两种融合蛋白在细胞中分布与EGFP明显不同,融合蛋白主要分布在细胞质中,细胞核中没有表达;Western blot结果可见两条明显的特异条带。【结论】小鼠Nnat基因真核表达载体构建成功,并能在真核细胞中表达出目的蛋白。
- 余利红余新炳张秀明项鹏
- 关键词：重组质粒真核表达蛋白定位
- 一种新型促细胞凋亡素（APO）及其抗体，制备及用途
- 本发明提供了一种新型促细胞凋亡素(APO)的cDNA序列、其所编码的氨基酸序列及其促进细胞凋亡的功能及用途，并提供了其抗体的制备方法及用途。其cDNA序列为381个碱基。其氨基酸序列长度为126个氨基酸。此cDNA序列在...
- 张成岗余利红王利红高艳孙志贤
- 文献传递
- 神经突起导向因子Netrin-4受体的研究
- ＜正＞Netrin-4是神经导向因子netrin家族在脊椎动物中的第四个成员。研究发现netrin家族成员可通过其受体DCC、UNC5H等发挥神经诱向与斥向的功能。目前功能研究表明netrin-4能促进神经轴突的生长,并...
- 秦树桐余利红周仁平张成岗
- 关键词：轴突导向受体DCC
- 文献传递
