冯捷
- 作品数:164 被引量:450H指数:10
- 供职机构:北京大学人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学机械工程更多>>
- CK19 RT-PCR方法检测上皮性卵巢癌病人外周血干细胞或外周血中肿瘤细胞
- 1999年
- 赖娟李蔚范钱和年冯捷李海玲
- 关键词:卵巢癌上皮性肿瘤肿瘤细胞
- 卵巢上皮性癌抗独特型抗体6B11T细胞表位的鉴定被引量:1
- 2008年
- 目的鉴定卵巢上皮性癌(卵巢癌)抗独特型抗体681I的T细胞表位,探讨其诱导抗卵巢癌细胞免疫的分子基础。方法利用表位预测和T2结合力分析实验筛选6811的互补决定区(CDR)人白细胞抗原(HIA)A0201结合肽。以负载肽的抗原递呈细胞刺激HLA—A2阳性的自体淋巴细胞,获得特异性细胞毒淋巴细胞(CTL),经^51Cr释放实验确定6811的CTL表位。以6811特异性CTL为反应细胞、负载肽的树突状细胞为刺激细胞,经细胞增殖实验确定681I的辅助性T细胞(Th)表位。经细胞因子含量测定和干扰素(IFN)γ分泌细胞频数分析,进一步验证获得的表位。结果6811轻链可变区CDR3肽(VLCDR3)诱导的CTL能杀伤靶抗原阳性的卵巢癌细胞,该杀伤作用能被抗人主要组织相容性复合物(MHC)Ⅰ类分子抗体阻断,具有MHC—Ⅰ类分子依赖性,为6811的CTL表位。6811重链可变区CDR3肽(VHCDR3)能诱导6811特异性CTL的增殖,该增殖作用大部分能被抗人MHC—Ⅱ类分子抗体阻断,具有MHC-Ⅱ类分子依赖性,为6811 Th表位。6811及其表位联合诱导的CTL与卵巢癌细胞共育后均分泌高水平白细胞介素(IL)2(分别为1630、1503ng/L)、IFN-γ(分别为5620、5421ng/L)和低水平IL-4(分别为253、274ng/L),且存在特异性IFN-1分泌细胞,细胞频数分别为196个/1×10。个T细胞和184个/1×10^6个T细胞。结论6811具有模拟卵巢癌抗原的CTL和Th表位,对于抗独特型抗体作为抗肿瘤疫苗应用具有重要的理论和实践价值。
- 李巍崔恒昌晓红程洪艳成夜霞冯捷付天云
- 关键词:卵巢肿瘤抗体抗独特型表位T淋巴细胞
- 人卵巢癌永生化细胞系BUPH:OVSC-2的建立及其生物学特性研究被引量:6
- 2002年
- 背景与目的:利用永生化技术建立预期表型的细胞系,已成为建系的重要手段之一,而人卵巢癌永生化细胞系的建立国内外少有报道。本文介绍人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系的建立,以及对其生物学特性的研究。方法:以手术切除的卵巢肉瘤样癌腹壁转移组织为材料,进行体外培养。将永生化基因SV40T抗原基因转染第10代细胞,经筛选,抗性克隆扩大培养,得到永生化细胞系。通过光学显微镜、电子显微镜、生长曲线测定、染色体分析、双层软琼脂培养、裸鼠接种、免疫组化等,研究其生物学特性,并与其来源细胞的生物学特性进行比较。结果:建立一株人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系,命名为BUPH:OVSC-2,现已传至90余代。其生物学特性为:形态学观察细胞呈肉瘤样细胞形态,超微结构证实为上皮起源;细胞生长旺盛;具有恶性细胞的特征,恶性度高。通过比较,与其来源细胞的生物学特性无明显差别。结论:BUPH:OVSC-2为一株恶性度高的人卵巢肉瘤样癌永生化细胞系,保留了其来源细胞的生物学特性,可作为卵巢肉瘤样癌研究的实验模型。
- 冯捷刘广芝付天云叶雪姚煜
- 关键词:肉瘤样癌细胞系永生化生物学特征
- 卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和腹水瘤模型导向治疗的研究被引量:6
- 1994年
- 采用抗卵巢癌单克隆抗体(单抗)-脂质体-阿霉素交联物(MLA)、阿霉素、COC166-9单抗、正常鼠IgG脂质体阿霉素交联物(NMLA)及生理盐水,对卵巢癌细胞系SKOV_3接种的24只裸鼠皮下移植瘤模型及16只腹水瘤模型分别进行导向及非导向治疗,观察对比疗效。皮下移植瘤模型以肿瘤生长大小、腹水瘤模型以裸鼠死亡时间为观察指标,判断治疗效果。结果:各治疗药物对肿瘤生长均有抑制作用,以MLA导向治疗的效果最好。说明导向治疗是有价值和发展前景的疗法。
- 李文锦钱和年吕文英刘燕妮贾鉴慧崔恒冯捷颜士杰王建六
- 关键词:卵巢肿瘤单克隆抗体导向疗法
- 卵巢癌抗独特型单链抗体诱导特异性体液免疫应答的动物实验研究被引量:2
- 1998年
- 目的:用卵巢癌抗独特型单链抗体6B11scFv代替肿瘤抗原免疫动物,观察是否诱导动物产生特异性体液免疫反应。方法:将6B11scFv交联钥孔虫戚虫血蓝素,辅以弗氏佐剂反复免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。采用间接法ELISA,竞争抑制ELISA及免疫流式细胞法分析抗血清特性。结果:经ELISA检测显示,由6B11scFv刺激产生的抗抗独特型单链抗体(Ab3)能与6B11scFv和卵巢癌组织抗原OC1669特异性结合。竞争抑制ELISA表明,Ab3能有效抑制卵巢癌单抗COC1669(Ab1)与OC1669的特异性结合。免疫流式分析结果可见,Ab3能与表达卵巢癌抗原的人卵巢癌细胞系OV1细胞表面结合而不能与无卵巢癌抗原表达的人宫颈癌细胞系HeLa细胞表面结合。从以上结果可以证明Ab3与Ab1的抗原结合特性相同。结论:6B11scFv能代替卵巢癌抗原诱导动物产生特异性体液免疫反应,具有模拟抗原的作用。
- 刘玉英钱和年冯捷付天云叶雪姚煜
- 关键词:卵巢肿瘤抗独特型抗体抗体体液免疫应答
- 抗独特型微抗体疫苗免疫方案的动物实验
- 卵巢癌在妇科恶性肿瘤中发病率居第二位,但死亡率居首位,严重威胁着妇女的健康。目前,仍无法早期诊断卵巢癌,80%患者确认时已属晚期,传统的手术、化疗和放疗常常难以治愈,五年生存率仅为28%。
- 祝洪澜崔恒冯捷魏丽惠
- 文献传递
- SV40 T基因诱导的人卵巢癌细胞永生化被引量:1
- 2002年
- 目的 建立人卵巢癌永生化细胞系 ,为卵巢癌体外研究提供实验模型。方法 利用基因重组技术构建猴肾病毒 4 0 (SV4 0 )T抗原基因的高效真核表达载体 pcD2 SV4 0。将其转染 10例原代培养的早期传代细胞 ,经G4 18筛选 ,抗性克隆扩大培养 ,建立永生化细胞系。免疫组化检测细胞的上皮起源 ,用PCR、RT PCR和SouthernBlot方法鉴定SV4 0T基因在转染细胞中的表达。观察所建立的永生化细胞系的染色体核型。结果 10例转染细胞中 ,6例筛选出抗性克隆。角蛋白免疫组化证实 3例为上皮起源。其中 2例上皮起源细胞得以扩大培养成系 ,长期稳定传代 ,分别命名为BUPH :OVSC 2和BUPH :OVCA 3。经鉴定两种细胞系中存在SV4 0T在基因水平及转录水平的表达。其染色体核型均符合人体恶性细胞特征。结论 利用SV4 0T抗原基因进行人卵巢癌原代细胞的永生化是一种可行的、可重复的建系方法 ,可提高卵巢癌细胞成系机率。
- 刘广芝冯捷叶雪张辛燕钱和年
- 关键词:卵巢癌细胞永生化
- 43例子宫内膜癌血清SA、CP_2、CA_(125)的研究
- 2000年
- 目的 评价血清SA、CP_2、CA_(125)在子宫内膜癌诊断及判断预后中的意义。方法 测定43例子宫内膜癌病人和30例对照正常女性静脉血清SA、CP_2、CA_(125)值,并分析其与疾病分期、细胞分化、瘤组织侵肌、腹水癌细胞阳性和淋巴结转移等预后因素之间的关系。结果 在子宫内膜癌病人中,SA灵敏度和特异度分别为24/43(55.81%)、26/30(86.67%);CP_2为22/43(51.16%)、29/30(96.67%);CA_(125)为9/43(20.93%)、30/30(100%)。CP_2升高程度与瘤组织侵肌正相关;CA_(125)升高程度与瘤细胞分化、病人分期正相关。联合3项指标检测,灵敏度和特异度可达81.39%、83.33%。结论 SA、CP_2单项检测子宫内膜癌灵敏度高于CA_(125);并且CP_2与CA_(125)升高程度将影响病人的预后;联合多项指标检测有可能优于单项。
- 赖娟叶雪姚煜冯捷
- 关键词:子宫内膜癌肿瘤标记物
- 卵巢癌抗独特型微抗体刺激树突细胞激活的T细胞对自体卵巢癌细胞杀伤作用的研究被引量:4
- 2004年
- 背景与目的:以抗原肽、蛋白、肿瘤细胞冻融物致敏树突细胞的肿瘤免疫治疗已在多种肿瘤展开。6B11抗独特型微抗体能模拟卵巢癌相关抗原OC166-9,本研究用6B11抗独特型微抗体体外刺激树突细胞,以诱导出对卵巢癌患者自体肿瘤细胞抗原特异性的细胞毒作用。方法:取10例卵巢癌患者的外周血,分离并诱导培养树突细胞,在培养过程中用6B11抗独特型微抗体刺激,促成熟后在体外激活自体T细胞。3H-TdR掺入法测DCs对自体T细胞刺激增殖的作用;51Cr6h释放实验测激活的T细胞对自体肿瘤细胞特异性的杀伤。结果:9例中有4例(#4,#5,#7,#10)6B11微抗体负载组DC刺激自体T细胞增殖3H-TdR掺入的cpm值高于对照组;杀伤实验的10例患者中5例(#1,#2,#4,#7,#9)6B11微抗体负载组DC刺激自体T细胞(简称MINI-DC-T)对自体肿瘤细胞有特异性杀伤。在效靶比为20∶1时,各组不同的效应细胞对自体肿瘤细胞的杀伤率分别为:MINI-DC-T组25%~100%、F(ab)2-DC-T组18%~40%、unpulsed-DC-T组13%~43%、T细胞组9%~58%,MINI-DC-T组高于其它各组。在效靶比为20∶1时,4例(#1,#2,#4,#9)患者MINI-DC-T对自体肿瘤细胞及SKOV3、HLE、K562细胞的杀伤率分别为25%~100%、5%~51%、2%~38%和2%~25%,MINI-DC-T对自体肿瘤细胞的杀伤高于对照组靶细胞。
- 杨文兰崔恒冯捷昌晓红付天云叶雪张虹李小平温宏武冯立民童春容
- 关键词:树突细胞抗独特型抗体
- 独特型瘤苗诱导免疫细胞对卵巢癌作用的体外实验研究
- 1998年
- 目的:研究卵巢癌抗独特型抗体诱导免疫效应细胞对卵巢癌的作用,探讨抗独特型抗体的免疫学特性。方法:用卵巢癌抗独特型抗体6B11免疫杂交一代小鼠BCF1,免疫部位为皮下多点,共免疫3次,间隔3周,对照组用正常鼠IgG进行免疫,方法同上。于末次免疫后7天处死小鼠,取脾脏淋巴细胞作为效应细胞,与靶细胞SKOV3(卵巢浆乳癌细胞系)以不同比例混合,体外培养,观察效靶细胞的相互作用,用单盲法记数靶细胞活死比。结果:(1)培养12小时后,效应细胞向靶细胞移动,24小时后形成以靶细胞为中心的花环,48~72小时后形成以靶细胞为中心的细胞团,靶细胞灰暗,部分细胞内可见颗粒状物质;(2)靶细胞在培养24、48、72小时的活死比明显低于对照组,效靶比为100∶1至25∶1时,靶细胞活死比最低。结论:6B11免疫小鼠的脾淋巴细胞对SKOV3有特异性趋化和杀伤作用,作为免疫原能够诱导抗卵巢癌细胞免疫反应。
- 王建六钱和年冯捷付天云李小平
- 关键词:抗独特型免疫反应体外实验