冯杉
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：清华大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 定量蛋白质组学分析ClpS在分枝杆菌耐药中的功能
- 2014年
- ClpS是原核生物蛋白质降解复合物ClpAPS的重要组成成分,它可以识别某些特定的氨基酸序列并将其呈递给ClpAP以促进其降解。同时,ClpS也抑制了其他蛋白质底物的降解。本研究通过在耻垢分枝杆菌中过度表达ClpS,发现所构建的重组菌株提高了利福平的抗药性。应用定量蛋白质组学技术,我们系统地分析了过度表达ClpS对于细菌蛋白质组的影响,并推测出细菌抗利福平的分子机制:ClpS促进稳态的调整、促进药物沉降以及加速药物代谢。本研究首次通过改变细菌降解复合物的相关蛋白的表达增加细菌的抗药性,并证明蛋白质组学技术是细菌的抗药性研究以及耐药株筛选的重要工具。
- 古丽莎娜.阿地里江冯杉米凯霞邓海腾
- 关键词：利福平定量蛋白质组学
- ISG15过表达抑制THP-1细胞的增殖与吞噬
- 2019年
- 目的:干扰素刺激基因15蛋白(Interferon-stimulated Gene 15,ISG15)是由I型干扰素诱导产生的类泛素蛋白,在先天免疫中起重要作用,本文旨在阐明ISG15的表达水平对巨噬细胞功能的影响并进一步探究其作用机制。方法:构建ISG15过表达质粒并通过慢病毒感染的方法整合进入THP-1细胞中,通过流式细胞仪分选出单克隆ISG15过表达细胞系,利用Western Blotting的方法验证ISG15在细胞内的过表达效果。在构建成功的细胞系中进行CCK8细胞增殖实验和Latex Beads细胞吞噬实验,最后通过定量蛋白质组学的方法观察细胞内蛋白质水平上变化。结果:Western Blotting的结果验证了ISG15在THP-1巨噬细胞系中的过表达效果,证明了ISG15过表达巨噬细胞系的成功构建。CCK8细胞增殖实验的结果表明,ISG15过表达的细胞系与对照组细胞系相比其增殖能力减弱;Latex beads细胞吞噬实验显示ISG15过表达细胞系的吞噬能力发生下降,并在蛋白质组学数据中找到糖酵解相关酶和膜转运蛋白下调的证据。结论:ISG15过表达能够降低与糖酵解相关的蛋白从而导致增殖能力的下降;同时也引起膜转运相关蛋白下调造成吞噬能力降低。
- 郭琳宗兆运冯杉张麟邓海腾
- 关键词：巨噬细胞定量蛋白质组学
- 发展双环肽Fc-4C用于抗体纯化和重组蛋白表达
- Fc-Ⅲ是一段由13个氨基酸残基组成的多肽,其构象为环状发卡结构,并且含有两个半胱氨酸残基形成的链内二硫键。已有报道证明Fc-Ⅲ能与IgG的Fc的铰链区有较强的亲和结合,并据此将其发展为抗体纯化的工具以及融合蛋白表达标签...
- 冯杉龚依伊邓海腾
- 乙酰半胱氨酸介导的果蝇蛋白质表达谱的变化被引量：2
- 2016年
- N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)是常用的抗氧化剂,并被用于慢性阻塞性肺疾病的治疗。本研究通过用富含NAC和不含NAC的营养物培养果蝇,发现NAC可以有效提高果蝇体内谷胱甘肽的(glutathione,GSH)含量,并且提高NADH和NAD+的比例。应用定量蛋白质组学,我们鉴定到了239种蛋白在NAC处理过的果蝇和对照组果蝇中有差异表达;其中227种蛋白的表达上调,12种蛋白的表达下调。上调蛋白主要包括抗氧化酶体系以及GSH合成和利用相关的蛋白。本研究还应用代谢组学方法分析了糖酵解及三羧酸循环通路上的代谢分子,发现NAC可以降低生物体的基础代谢水平。本项研究系统分析了NAC对果蝇的代谢水平、氧化还原稳态以及抗氧化酶体系的影响,阐明NAC在生物体抵抗氧化压力和抗衰老方面的作用。
- 杨帆江晓勇冯运冯杉邓海腾
- 关键词：N-乙酰半胱氨酸黑腹果蝇定量蛋白质组学
