刘明姬
- 作品数：4 被引量：40H指数：4
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- 单核-巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶增强去氧氟尿苷抗结肠癌细胞活性被引量：21
- 2004年
- 目的 探讨结肠癌组织中胸苷磷酸化酶 (dThdPase)的表达 ,检定单核 巨噬细胞表达的dThdPase对抗癌药物 5′ 脱氧氟尿苷 (5’ DFUR)的转化调控作用。方法 对 4 0例结肠癌标本进行免疫组织化学染色 ,分析其细胞的dThdPas表达 ,并测定癌组织和周围正常组织的dThdPase活性。应用ELISA法分别检测 4株结肠癌细胞LS174T、CloneA、Colo32 0、MIP10 1和 2株类巨噬细胞THP 1、U937的dThdPase蛋白含量。MTT法测定 4株结肠癌细胞对 5 Fu和 5′ DFUR的半数有效浓度 (IC50 )。把定量5′ DFUR加入培养基中同类巨噬细胞或单核细胞一起培养 2 4h后 ,取其上清液二倍稀释加入大肠癌细胞中测定IC50 有无改变。并在加入定量 5′ DFUR的类巨噬细胞培养液中检测 5 Fu的生成。结果 结肠癌组织中dThdPase活性明显高于周围正常肠组织 ,表达dThdPase阳性细胞主要是肿瘤相关巨噬细胞 (TAM)。 4株结肠癌细胞中仅LS174T检出 0 5单位 /mg的dThdPase蛋白 ;而THP 1和U937则分别为 18 2单位 /mg和 19 3单位 /mg。全部大肠癌细胞对 5′ DFUR的IC50 均明显高于 5 Fu(P <0 0 0 0 1)。但同THP 1、U937或单核细胞一起培养 2 4h后 ,其IC50 明显下降 ,仅相当于原来的 5 4 %～4 1 8% (P <0 0 0 1)。从含定量 5′ DFUR的THP 1、U937的培养?
- 张继民刘明姬溝井賢幸椎葉健一佐佐木巌松野正纪
- 关键词：胸苷磷酸化酶去氧氟尿苷结肠癌细胞活性巨噬细胞单核细胞
- 单核细胞增强5′-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性被引量：9
- 2003年
- 目的 探讨巨噬细胞在结直肠癌化疗中的调控作用。方法 应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、Clone A、Colo320、MIP101的胸苷磷酸化酶(dThdPase)蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5’-脱氧氟尿苷(5’-DFUR)对上述4种癌细胞的半数有效浓度(IC50)。然后把5’-DFUR加入培养基中同人血单核细胞一起培养24 h,其培养上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析测定其IC50有无改变。同时测定单核细胞在不同浓度5’-DFUR中的存活率。结果 4种结直肠癌细胞仅LS174T检出0.5 U/mg的dThdPase蛋白,其它3种未检出。4种癌细胞对5-DFUR的IC50均明显高于5-FU(P<0.01)。同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR对4种癌细胞的IC50明显下降,仅相当于处理前的11.6％～34.3％(P<0.05),同时发现5’-DFUR对人血单核细胞无明显生长抑制作用。结论 被检结直肠癌细胞因缺乏dThdPase活性,不能在细胞内转化抗癌药物5’-DFUR为5-FU发挥细胞毒作用;同人血单核细胞一起培养后,5’-DFUR在单核细胞内dThdPase的催化下,可转化成5-FU并释放到培养基中发挥抗癌作用。
- 张继民刘明姬溝井贤幸椎葉健一佐々木嚴松野正纪
- 关键词：单核细胞细胞活性结肠癌直肠癌
- 类巨噬细胞增强5'-脱氧氟尿苷抗结直肠癌细胞活性被引量：10
- 2004年
- 目的探讨类巨噬细胞表达的胸苷磷酸化酶(dThdPase)能否增强细胞内激活抗癌药物5'-脱氧氟尿苷(5'-DFUR)抗结直肠癌细胞作用。方法应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、LOVO、MIP101和类巨噬细胞系THP-1、U937的dThdPase蛋白含量。采用MTT分析,分别测定出氟尿嘧啶(5-FU)和5'-DFUR在6株结直肠癌细胞的半数有效浓度(IC50)。把5-FU或5'-DFUR同THP-1或U937细胞一起培养24h,其上清液2倍稀释后加入结直肠癌细胞中行MTT分析,测定IC50有无改变。并在培养THP-1或U937的培养基中加入定量5'-DFUR后检测5-FU的生成量。结果6株结直肠癌细胞中仅LS174T检出0.5U/mg、LOVO检出8.9U/mg的dThdPase蛋白,其他4株未检出。而THP-1和U937的dThdPase蛋白含量则分别为18.2U/mg和19.3U/mg。5'-DFUR对全部癌细胞的IC50高于5-FU的14.5～94.4倍(P<0.01)。5-FU和5'-DFUR同THP-1(或U937)细胞一起培养24h后,5-FU对6种癌细胞的IC50无明显改变(P>0.05),而5'-DFUR的IC50则分别下降到原来的5.4%～41.8%(P<0.001)。并从加入400μmol5'-DFUR的THP-1和U937的培养液中分别检出40.2μmol和32.9μmol的5-FU。结论6株结直肠癌细胞基本无dThdPase活性,不能在细胞内转化5'-DFUR为5-FU。类巨噬细胞表达的dThdPase可以转化5'
- 张继民刘明姬沟井贤幸椎叶健一佐々木严松野正纪
- 关键词：结直肠癌抗癌药
- 结直肠癌组织中巨噬细胞表达胸苷磷酸化酶并与血管新生相关被引量：23
- 2003年
- 目的探讨结直肠癌组织中胸苷磷酸化酶(dThdPase)表达与血管新生的相互关系。方法采用抗dThdPase、抗巨噬细胞标记物CD68和抗血管内皮细胞标记物CD34的单克隆抗体,对40例结直肠癌手术切除标本进行免疫组织化学染色分析,对其中27例标本同时测定其癌组织和周围正常组织的dThdPase活性(HPLC法)。并应用ELISA法分别检测结直肠癌细胞系LS174T、CloneA、Colo320、CX-1、Lovo、MIP101和类巨噬细胞系THP-1和U937的dThdPase蛋白含量。结果结直肠癌组织中的dThdPase活性明显高于周围正常肠组织(P<0.01)。dThdPase阳性细胞几乎都是癌巢周围的间质细胞,特别是肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。且TAM与dThdPase阳性细胞的分布区域几乎完全一致。癌巢周围新生血管数明显多于正常肠黏膜组织(P<0.01)。TAM计数、dThdPase阳性间质细胞计数和微血管计数3者互成正相关。除LS174T检出微量和Lovo检出少量dThdPase蛋白外,其他4株癌细胞未检出。而THP-1和U937的dThdPase蛋白含量分别为18.2U/mg和19.3U/mg。结论结直肠癌组织中增高的dThdPase活性主要由TAM表达,增多的TAM与结直肠癌的血管新生相关。
- 张继民刘明姬沟井贤幸椎叶健一佐々木严松野正纪
- 关键词：结直肠癌巨噬细胞胸苷磷酸化酶血管新生
