吴春婷
- 作品数：34 被引量：102H指数：7
- 供职机构：首都医科大学附属北京安贞医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生政治法律生物学更多>>
- 靶向小鼠NF-kB P65进行RNA干扰对减轻哮喘时炎症因子作用的研究
- 靳丽妍朱光发吴春婷闫树凤
- 云南汉族人群VKORC1 1173C/T基因多态性与华法林抗凝治疗维持剂量的相关性研究
- 2012年
- 目的研究云南汉族人群维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因VKORC1 1173C/T多态性分布及与其他群体间的差异,并探讨其与华法林抗凝维持剂量的分子遗传关系.方法采集300名心脏机械瓣膜置换术后服用华法林抗凝已达稳定剂量、凝血酶原时间国际标准化比值在目的范围(1.5～3.0)病人的外周血,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术,检测VKORC1 1173C/T基因位点的基因型和等位基因频率,探讨华法林抗凝维持剂量与该基因多态性的关系.结果在所有的样本中,VKORC1 1173C/T基因共检出C(10%)和T(90%)2种等位基因,纯合子TT(80%)和杂合子CT(20%)两种基因型,云南汉族人群中VKORC1 1173C/T基因多态性分布在性别和年龄上无差异;CT基因型病人所需华法林维持剂量最高(3.62±1.35)mg/d,其次是TT基因型病人(3.12±1.17)mg/d.结论与其他群体相比,云南汉族人群VKORC11173C/T基因位点具有自己的遗传多态性,其基因型在华法林抗凝治疗中具有非常重要的意义.
- 刘建兴陈智豫李云萍王通吴春婷李贺许冰莹
- 关键词：汉族华法林VKORC1基因多态性
- 针对核因子-κBP65基因的短发夹干扰RNA逆转录病毒载体构建与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的:构建针对人核因子κB亚基P65基因mRNA的短发夹干扰RNA(shRNA)逆转录病毒表达载体,并探讨小干扰RNA(siRNA)靶向抑制NF-κBP65基因表达的作用。方法:根据shRNA设计原则,在人NF-κBP65全长序列中选取含19个核苷酸靶序列,设计形成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pSUPER.retro.neo中,构建针对NF-κBP65基因的shRNA表达载体。经293A细胞包装,并感染NIH3T3细胞进行病毒滴度测定后,感染THP-1细胞。分别采用RT-PCR和Westernblot从mRNA和蛋白水平检测干扰效果。结果:限制性酶切和基因测序证实针对人NF-κBP65亚基的shRNA表达逆转录病毒载体成功构建;其感染THP-1细胞后,NF-κBP65的mRNA和蛋白表达明显抑制。结论:成功构建了NF-κBP65shRNA逆转录病毒表达载体,该载体能高效感染THP-1并明显抑制NF-κBP65的表达。
- 吴春婷赵佳晖闫树凤靳丽妍朱光发
- 关键词：短发夹RNA逆转录病毒核因子-ΚB
- 己酮可可碱对脓毒症致鼠急性肺损伤核因子-κB、明胶酶及抑制因子的干预
- 目的研究己酮可可碱对急性肺损伤核因子-κB、明胶酶(MMP-2、9)及其抑制因子的干预作用。方法112只小鼠分为盐水对照组(NS组)、己酮可可碱对照组(PTX组)、手术组(CLP组)和己酮可可碱干预组(C+P组)。盲肠结...
- 闫树凤张向峰朱光发吴春婷靳丽妍
- 小干扰RNA干扰核因子κB信号通路对内毒素刺激巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨小于扰RNA（siRNA）抑制核因子κB（NF-κB）信号通路对细菌脂多糖（LPS）刺激的巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响.方法 人单核细胞白血病THP-1细胞经氟波酯诱导为巨噬细胞后分2组,分别感染应用分子克隆技术构建的针对NF-κB P65的siRNA逆转录病毒质粒（siRNA病毒组）及乱序（Scramble）对照序列逆转录病毒质粒（Scramble病毒组）.用终浓度50μg/ml的LPS持续刺激2组巨噬细胞,分别应用RT-PCR技术检测LPS刺激不同时间巨噬细胞NF-κB P65 mRNA和TNF-α mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测NF-κB P65蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验检测巨噬细胞培养上清液TNF-α含量.结果 LPS刺激12和24 h,siRNA病毒组巨噬细胞NF-κB P65 mRNA表达水平（0.97±0.02,0.89±0.01）明显低于Scramble病毒组（1.01±0.03,0.97±0.01,均P＜0.05）;LPS刺激24和72 h,siRNA病毒组NF-κB P65蛋白表达水平（0.95±0.04,0.94±0.01）明显低于Scramble病毒组（1.07±0.06,1.03±0.05,均P＜0.05）.LPS刺激4、8、12和24 h的各时点,siRNA病毒组TNF-α mRNA表达水平均明显低于Scramble病毒组（0.92±0.02比0.98 ±-0.01,0.86±0.02比1.00±0.01,0.79±0.03比1.01±0.01,0.78±0.03比1.02±0.01,均P＜0.05）.LPS刺激2、4、8、24、36、48、54和72 h的各时点,siRNA病毒组巨噬细胞培养上清液TNF-α含量均明显低于Sramble病毒组（均P＜0.01）.结论 针对NF-κB P65的siRNA可抑制NF-κB信号通路的功能活性,进而抑制内毒素刺激引起的巨噬细胞活化和TNF-α释放,提示RNA干扰技术在急性肺损伤早期过度炎症反应的防治中具有潜在应用价值.
- 吴春婷朱光发赵佳晖张向峰靳丽妍闫树凤
- 关键词：肿瘤坏死因子Α巨噬细胞脂多糖类
- 针对人β-catenin基因shRNA真核表达载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建针对人β-catenin基因mRNA的shRNA真核表达载体,并转染HEK-293细胞,观察其对β-catenin的抑制效应。方法:化学合成用于产生针对β-catenin shRNA的对应DNA片段,将合成的寡核苷酸链退火形成双链,克隆入pSU-PER真核表达载体,对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定,筛选阳性克隆。通过脂质体介导,把重组质粒转染HEK-293细胞,RT-PCR、蛋白质印迹法检测其对β-catenin mRNA和蛋白的干涉效果,MTT比色法检测β-catenin基因表达抑制的细胞和对照组细胞的增殖。结果:RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示转染组β-catenin基因的表达水平下调,MTT检测显示β-catenin表达抑制的细胞光密度值下降,细胞增殖受到了抑制(P<0.01)。结论:成功构建了针对人β-catenin基因的shRNA载体,转染HEK-293细胞后可抑制β-catenin基因的表达。
- 姜永光赵佳晖吴春婷罗勇贺大林
- 关键词：Β-连环素RNA干扰SHRNA293细胞
- 外周血活性循环肿瘤细胞与非小细胞肺癌患者临床特征的相关性及其临床意义被引量：8
- 2019年
- 目的初步探讨外周血活性循环肿瘤细胞(CTC)与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床特征的相关性及其临床意义。方法选取2017年6月至2018年8月于首都医科大学附属北京安贞医院呼吸与危重症医学科住院且经影像及病理学检查确诊的NSCLC患者51例(观察组),其中腺癌38例,鳞癌13例;并收集同期该科室住院的21例良性肺疾病患者(良性肺疾病组)及该院健康体检者18名(健康对照组)。应用含重组病毒的CTC体外检测试剂盒检测各组外周血中活性CTC数量,并分析比较活性CTC表达情况与NSCLC患者临床、病理学特征的关系。结果观察组44例CTC阳性,良性肺疾病组4例CTC阳性,健康组未检出;该检测方法的敏感度为86. 3%(44/51),特异度为89. 7%(35/39)。每6 ml外周血中检测出活性CTC的数量在不同的临床分期(Ⅰ～Ⅱ期比Ⅲ～Ⅳ期)及有无远处转移(M_0比M_1)组间比较差异有统计学意义[1(0,6)个比3(0,54)个、1(0,2)个比3(1,8)个](Z=-2. 041、-2. 623,P=0. 041、0. 009)。使用Logistic回归模型分析得出,外周血活性CTC数量的增加与NSCLC患者发生远处转移的风险独立相关(比值比=1. 356,95%置信区间1. 015～1. 811,P=0. 040);当外周血CTC数量大于3个/6 ml时,NSCLC患者发生远处转移的风险增加了近5倍(比值比=5. 356,95%置信区间1. 341～21. 400,P=0. 018)。结论外周血活性CTC检测作为一种简便、无创的检测手段,特异度和敏感度均较高,可能提早预测NSCLC患者的远处转移。
- 肖瑶朱光发张颖吴春婷房芳刘双
- 关键词：非小细胞肺癌循环肿瘤细胞
- 己酮可可碱对脓毒症致急性肺损伤核因子-κB和明胶酶的干预作用
- 2012年
- 目的研究己酮可可碱（pentoxifylline，PTX）对急性肺损伤（acutelunginjury，Au）核因子-κB（nuclearfactor-κB，NF-κB）、明胶酶（gelatinase，MMP-2，MMP-9）的干预作用。方法将112只小鼠随机分为盐水对照组（NS组）、己酮可可碱对照组（PTX组）、手术组（CLP组）和己酮可可碱干预组（C＋P组）。采用盲肠结扎穿孔（cecalligationandpuncture，CLP）法复制脓毒症ALI模型，C＋P组在手术基础上尾静脉注射己酮可可碱40mg／kg干预。各组小鼠在对应时间段处死，观察肺病理改变；免疫组化染色检测肺NF-κB染色强度；逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺NF-κB、MMP-2、MMP-9的mRNA表达；酶联免疫吸附法（ELISA）测定支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF）中MMP-2、MMP-9的蛋白含量。结果盲肠结扎穿孑L能够引起Au。CLP组ALI病理表现明显，C＋P组较CLP组明显减轻。C＋P组肺组织NF-κB的染色强度、面积低于CLP组（P〈0．05或P〈0．01）。CLP组肺组织NF-κB、MMP-2、MMP-9的mRNA表达以及BALF中的MMP-2、MMP-9蛋白含量均高于C＋P组（P〈0．05）。结论急性肺损伤时，PTX能够抑制NF-κB活化及MMP-2、MMP-9蛋白的过量表达。抑制炎症反应，减轻肺损伤。
- 闫树凤朱光发张向峰靳丽妍吴春婷
- 关键词：己酮可可碱明胶酶
- 贝伐单抗治疗遗传性出血性毛细血管扩张症合并肺动脉高压1例
- 2022年
- 遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)是一种常染色体异常引起的血管发育障碍性疾病, 容易误诊和漏诊。本文报道1例合并高心排血量所致单纯性毛细血管后肺动脉高压(pulmonary hypertension, PH)的HHT, 应用贝伐单抗治疗有较好疗效和安全性。
- 吴春婷肖瑶郭伟王艳张萌万钧
- 关键词：遗传性出血性毛细血管扩张症贝伐单抗常染色体异常心排血量发育障碍性疾病肺动脉高压
- 针对核因子-κB小干扰RNA防治脓毒症急性肺损伤的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨针对核因子-κB(NF-κB)P65的小干扰RNA(siRNA)在脓毒症急性肺损伤防治中的保护作用。方法:将体质量18 g～20 g,雄性,昆明小鼠70只,随机分为健康组、脓毒症组、特异干扰组及乱序对照组,后3组均设置术后6 h、12 h 2个亚组(每组10只)。术前1 h特异干扰组尾静脉注射NF-κB P65 siRNA反转录病毒,乱序对照组注射scrambled siRNA反转录病毒,健康组及脓毒症组注射等量0.9%氯化钠液;分别对脓毒症组、特异干扰组及乱序对照组小鼠行盲肠结扎穿孔(CLP)手术构建急性肺损伤模型;术后6 h、12 h留取肺组织标本,观察肺病理改变;湿干质量比值(W/D);肺NF-κB染色强度;NF-κB mRNA、基质金属蛋白酶-9 mRNA(MMP-9 mRNA)及蛋白的活性水平。结果:采用CLP法成功构建小鼠急性肺损伤模型。与脓毒症组和乱序对照组比较,特异干扰组术后6 h、12 h肺组织较同时段脓毒症及乱序对照组肺组织病理损害及W/D值,NF-κB P65 mRNA,MMP-9 mRNA及蛋白活性减低,其中在6 h差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对NF-κB P65的siRNA抑制NF-κB的表达后,能够抑制脓毒症所致的早期的过度炎症反应,减轻急性肺损伤。
- 李丛锋朱光发王君靳丽妍闫树凤吴春婷
- 关键词：小干扰RNA核因子-ΚB基质金属蛋白酶-9急性肺损伤
