吴炜 作品数:70 被引量:233 H指数:9 供职机构: 浙江大学医学院附属第一医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 浙江省卫生厅资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自动化与计算机技术 更多>>
尖锐湿疣患者血清中GM-CSF和HGF水平检测 目的:探讨粒细胞-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)和肝细胞生长因子(HGF)在尖锐湿疣外周血循环中的表达水平及与尖锐湿疣的关系.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测73例尖锐湿疣患者血清中GM-CSF... 许冰 王勇刚 吴炜关键词:尖锐湿疣 肝细胞生长因子 文献传递 皮肤光老化过程中mtDNA突变及氧化应激改变研究 方红 王懿娜 吴炜 彭国平 王小勇 朱伟芳 陈鸿超 蒋筱凌 刘晓艳 丁颖果 该项目研究人皮肤光老化部位线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)突变与皮肤衰老的关系;同时观察UVB照射人皮肤成纤维细胞和HaCaT细胞诱发的线粒体DNA突变及氧化应激状态改变,以及大豆异黄酮的保护...关键词:关键词:皮肤衰老 大豆异黄酮 慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞应答与抗病毒治疗疗效的相关性 目的探讨CHB患者接受替比夫定治疗前后不同时期外周血CD4、CD8T淋巴细胞亚群数量和功能的变化及其与治疗疗效的相关性。方法选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者73例,在治疗前及治疗后12、24、36及48周,分别以荧... 李雪芬 叶波 杨先知 鲁海峰 吴炜 陈瑜文献传递 基因1b型HCV核心蛋白不同功能区域对HepG2细胞生长的影响 被引量:2 2008年 目的研究基因1b型丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株编码的核心蛋白(CORE):癌中心株(T)、癌旁株(NT)、C191(HCV—J6)及同一病毒株(T)编码的不同功能区域(1~172、1~126、1~58、59~126、127—172AA)在HCV致病机制中的作用,为治疗HCV感染提供靶位。方法将含有3个不同病毒株(T、NT及C191)及T不同功能区域的CORE真核表达质粒,转染到HepG2细胞,用流式细胞仪检测Annexin V/PI,并用细胞生长实时观察仪观察细胞生长曲线。结果基因1b型T、NT、C191和T不同功能区域的CORE均能诱导HepG2细胞凋亡和坏死且抑制了细胞的生长,其中,T诱导细胞凋亡和坏死及抑制细胞生长强于NT和C191,T的CORE的N端1~58AA诱导细胞凋亡和坏死及抑制细胞生长均高于其他功能区域。结论HCV基因1b型不同病毒株及同一病毒株编码的CORE不同功能区域的分子致病机制存在一定的差异,N端的1~58AA在CORE的致病机制中起重要作用,可能是基因治疗的重要靶位之一。 颜学兵 梅蕾 陈智 郑敏 周林福 许小燕 吴炜关键词:丙型肝炎病毒 核心蛋白 细胞生长曲线 尖锐湿疣患者循环粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和扩散因子的变化 2004年 王勇刚 许冰 吴炜关键词:尖锐湿疣 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 性疾病 抗鼠CTLA-4单链抗体的构建与表达及其免疫学活性的鉴定 被引量:2 2008年 目的构建具有免疫学活性的抗小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)单链抗体ScFv(single chain fragment of variety region),为进一步将其应用到动物体内奠定基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗小鼠CTLA-4单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中扩增mAb的VH、VL基因,并进一步将其组装成VH-Linker-VL型的ScFv片段。将ScFv片段亚克隆至pGMET载体,测序正确后将其克隆至真核分泌型表达载体pSect2-GFP,将pSect2-GFP-ScFv纯化质粒转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)并进行表达,同时经Zeocin筛选稳定表达株。用Western blot方法检测ScFv融合蛋白的表达,采用ELISA检测ScFv的亲和活性。结果经Zeocin筛选2周后,CHO细胞株可稳定表达GFP-ScFv蛋白。Western blot法证实GFP-ScFv蛋白在细胞上清和细胞裂解液中均有表达,大小约55kD。ELISA检测表明,CHO培养上清中的GFP-ScFv蛋白经浓缩初纯后能与重组小鼠CTLA-4纯化抗原结合,并具有抑制亲本单抗与其结合的能力。结论成功构建了抗小鼠CTLA-4的ScFv真核表达载体,并能有效表达出具有免疫学活性的ScFv融合蛋白。 彭国平 周承 吴炜 孙雯 田锋 贺纪凯 陈智关键词:细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 单链抗体 真核表达 免疫学活性 慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞PD-L1表达的相关研究 被引量:12 2008年 目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DCs)的PD-L1表达水平,及其对DCs刺激T细胞增殖的影响。方法:采集22例慢性HBeAg阳性CHB患者、8例急性恢复期乙型肝炎(AHB)患者和10例健康人(NC)的外周血,分离单个核细胞(PBMC)并诱导DCs的增殖和活化。相对荧光定量PCR测定DCs的PD-L1、PD-L2分子mRNA水平,流式细胞术测定DCs表面PD-L1和PD-L2的表达率。同时,测定外周血DCs刺激同种异体反应性T细胞增殖的能力,及抗PD-L1单抗对CHB组DCs刺激功能的影响。结果:体外成功诱导了外周血DCs的增殖和成熟。与NC组相比较,CHB组和AHB组患者外周血DCs内PD-L1的mRNA水平均显著增高(P均<0.05),但CHB组和AHB组间差异无统计学意义。CHB组患者外周血DCs表面PD-L1表达率较AHB组、NC组均有明显增高(P均<0.01)。而外周血DCs的PD-L2 mRNA水平及PD-L2在DCs表面的表达率在各实验组之间无明显差异(P均>0.05)。CHB组外周血DCs刺激T细胞增殖的功能较AHB组和NC组明显降低(P均<0.01),抗PD-L1抗体能显著增强CHB患者DCs刺激T细胞反应的能力。CHB患者外周血DCs表面PD-L1表达率与血清HBV病毒载量成正相关(r=0.34,P=0.007)。结论:外周血DCs表面PD-L1表达水平在慢性HBeAg阳性乙肝患者明显升高,抗PD-L1抗体可有效增强CHB患者外周血DCs刺激T细胞增殖反应的能力,表明PD-L1的高表达可能与T细胞免疫反应低下和HBV病毒高复制密切相关。 彭国平 孙雯 吴炜 孙箴 谈旭翡 李淑萍 陈智关键词:肝炎 乙型 树突状细胞 免疫抑制 病毒载量 乙型肝炎活动诱发的慢加急性肝衰竭的全身炎症特征 被引量:2 2018年 【据《Liver Int》2018年2月报道】题:乙型肝炎活动诱发的慢加急性肝衰竭的全身炎症特征(作者Wu W等)慢加急性肝衰竭(ACLF)是重症肝病的主要临床类型之一。根据欧洲肝病学会慢性肝衰竭协作组(EASLCLIF Consortium)及北美终末期肝病协作组(NACSELD)的最新诊断标准,浙江大学医学院附属第一医院的Wu及其同事描述了乙型肝炎活动诱发的慢加急性肝衰竭患者(HBV-ACLF)的临床特征, 吴炜 施毓关键词:HBV 全身炎症 肝衰竭 质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用 近年来,基于质粒载体的RNAi 的方法因DNA 合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi 的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg 基因的sh... 徐宁 陈智 羊正纲 姚航平 侯晓丽 吴炜 蔡为民关键词:共转染 HBCAG 文献传递 重型乙型肝炎病人血清HBV全基因克隆及测序 目的建立重型乙型肝炎病人血清HBV DNA克隆并测序,从全基因水平分析HBV基因变异与重型乙型肝炎发病的关系。方法收集10例重型乙型肝炎病人血清,提取HBV DNA,PCR扩增HBV全基因。PCR产物构建到pUCm-T载... 李兰娟 吴炜 陈瑜关键词:乙型病毒性肝炎 重型肝炎 病毒基因