唐蕊
- 作品数：6 被引量：20H指数：2
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- 高危型HPV DNA检测在宫颈上皮内瘤变及宫颈早期鳞癌锥切术后随访中的应用及意义被引量：10
- 2012年
- 目的:探讨高危型HPV(HR-HPV)DNA检测在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞癌(ⅠA1期)患者经宫颈冷刀锥切术治疗后随访中的应用及意义。方法:2008年1月至2010年10月我院收治的308例CINⅡ～Ⅲ及宫颈鳞癌(ⅠA1期)患者经宫颈冷刀锥切术治疗后,采用第二代杂交捕获试验(HC2)检测HR-HPV DNA联合液基细胞学随访,观察术后HR-HPV清除及宫颈病变复发情况,并分析术后HR-HPV持续感染及病变持续或复发的相关因素。结果:至随访结束,宫颈锥切术后病变持续或复发者共10例。术后病变持续或复发在HR-HPV持续感染组中明显多于HR-HPV转阴组(P<0.001);术前HR-HPV DNA高负荷、病变累及3～4个象限为术后HR-HPV持续感染的高危因素;术前HR-HPV DNA≥500RIUs/CO是术后病变持续或复发的独立危险因素。结论:HR-HPV持续感染是宫颈锥切术后病变持续或复发的重要因素,术前HR-HPV DNA高负荷是术后HR-HPV持续感染及病变持续或复发的独立危险因素,术后应重点随访。
- 李岩崔竹梅娄艳辉刘丽芝唐蕊韩汶君
- 关键词：宫颈上皮内瘤样病变宫颈锥切术
- 微小RNA-16参与上皮性卵巢癌细胞周期调控的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的:研究微小RNA-16(miR-16)调控靶基因CCND1及其蛋白表达产物-细胞周期相关蛋白D1(cyclinD1)在卵巢肿瘤细胞系SKOV3及其耐药株SKOV3/DDP中的表达,并初步探讨其逆转卵巢癌耐药的可能机制。方法:脂质体Lipofectamine2000介导miR-16成体模拟物(mimics)及其阴性对照片段(NC)成功转染人卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3/DDP;流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化;Western blot法检测转染前后cyclinD1表达的变化。结果:(1)成功转染miR-16后,SKOV3/DDP细胞系G1期细胞所占比例显著升高(P<0.01);(2)SKOV3/DDP细胞的cyclinD1蛋白相对表达量显著高于SKOV3细胞;转染miR-16后,cyclinD1相对表达量显著下降(P<0.01)。结论:miR-16很可能通过下调靶基因CCND1及cyclinD1蛋白的表达,阻止细胞由G1期向S期转换,抑制肿瘤细胞无限增殖与生长。
- 于沙沙崔竹梅娄艳辉唐蕊姚如永
- 关键词：微小RNAS卵巢肿瘤CYCLIND1蛋白细胞周期调控
- 微小RNA-16调控卵巢上皮性癌细胞增殖、侵袭及凋亡的体外研究被引量：2
- 2012年
- 目的 探讨微小RNA-16（miR-16）调控卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖、侵袭及凋亡的作用及机制.方法 脂质体介导miR-16成熟体模拟物及相应的阴性对照片段转染人卵巢癌细胞SKOV-3,分别作为转染组、阴性对照组.实时荧光定量PCR技术检测各组细胞中miR-16的表达,蛋白印迹法检测血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、凋亡抑制蛋白bcl-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝法、5-乙炔基-2’脱氧尿苷（EdU）标记法测定细胞的增殖能力,transwell穿膜小室侵袭实验检测细胞的侵袭能力,流式细胞仪检测血清饥饿及低氧条件下细胞的凋亡情况.结果（1）转染组、阴性对照组SKOV-3细胞中miR-16的表达量分别为125.93±15.30、 0.78±0.16,转染组明显高于阴性对照组,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.（2）转染组、阴性对照组SKOV-3细胞中VEGF蛋白的相对表达量为0.58±0.05、1.22±0.03,MMP-2蛋白的相对表达量为0.63±0.03、1.16±0.03,bcl-2蛋白的相对表达量为0.52±0.03、1.19±0.05,转染组各蛋白的相对表达量均明显低于阴性对照组,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）.（3） 转染后第4天,转染组、阴性对照组细胞的增殖抑制率分别为（37.2±6.2）％、（3.6±3.2）％,两组比较,差异有统计学意义 （P=0.001）.（4）转染组、阴性对照组细胞的增殖率分别为（12.3±0.8）％、（23.4±1.8）％,转染组明显低于阴性对照组,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.（5）转染组穿过聚碳酸酯膜的细胞数为（6±3）个,明显少于阴性对照组的（40±9）个,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）.（6）血清饥饿及低氧条件培养24 h后,转染组细胞的早期凋亡率[（16.9±2.1）％]、晚期凋亡率[（13.4±3.3）％]均明显高于阴性对照组[分别为 （10.3±1.7）％、（3.2±1.8）％],分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）;培
- 唐蕊崔竹梅娄艳辉
- 关键词：细胞增殖肿瘤浸润原癌基因蛋白质体外研究
- MicroRNA-16抑制人卵巢癌在裸鼠皮下移植瘤生长的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨microRNA-16(miRNA-16)转染对人卵巢癌细胞株SKOV-3在裸鼠皮下移植瘤形成的抑制作用。方法:将成熟miRNA-16双链模拟物及其阴性对照序列转染人卵巢癌SKOV-3细胞株,然后分别接种于裸鼠皮下,观察两组肿瘤出现时间及肿瘤体积变化,接种20d后取出肿瘤组织称重,计算抑瘤率。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中Bcl-2mRNA表达,并进行免疫组化检测两组肿瘤组织中Bcl-2蛋白表达。结果:miRNA-16转染组肿瘤生长相对延缓,种瘤20d后miRNA-16转染组移植瘤重量明显小于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),抑瘤率达38.46%;PCR结果显示miRNA-16转染组Bcl-2 mRNA表达量与阴性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);移植瘤组织免疫组化分析两组Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miRNA-16对人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生长有抑制作用,可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。
- 韩汶君崔竹梅唐蕊于莎莎高慧
- 关键词：微小RNASBCL-2移植瘤基因疗法
- 微小RNA-16逆转上皮性卵巢癌顺铂耐药的研究被引量：4
- 2012年
- 目的:研究微小RNA-16(miR-16)在人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其与顺铂耐药的关系。方法:脂质体lipofectamine2000介导miR-16成熟体模拟物(mimics)及阴性对照片段(NC)分别转染人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP。实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-16的表达;蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白、c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的顺铂半数抑制浓度(IC50);caspase-3活性检测试剂盒检测细胞内caspase-3酶的活性;流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:(1)SKOV3/DDP细胞顺铂耐药指数(RI)为5.33;(2)SKOV3/DDP细胞中miR-16表达水平明显低于SKOV3细胞,约为后者的1/10(P=0.000),转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞中miR-16水平升高约660倍(P=0.001);(3)SKOV3/DDP细胞Bcl-2、c-myc蛋白的相对表达量较SKOV3细胞明显升高,转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞Bcl-2、c-myc蛋白的相对表达量明显降低(P<0.01);(4)SKOV3/DDP细胞转染miR-16 mim-ics后,顺铂IC50(14.19±0.06)较转染NC组(22.52±0.60)明显降低(P=0.002),且顺铂作用后caspase-3的酶活力单位也明显升高(P=0.000);(5)顺铂(20μg/ml)作用24h、48h后,SKOV3组凋亡率明显高于SKOV3/DDP组,转染miR-16 mimics的SKOV3/DDP细胞凋亡率约为转染NC细胞的1.5倍(P<0.01)。结论:miR-16可能通过靶向下调上皮性卵巢癌细胞Bcl-2蛋白,并协同调节c-myc蛋白的表达,增强卵巢癌顺铂耐药细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,发挥逆转耐药的作用。
- 唐蕊崔竹梅娄艳辉李岩姚如永
- 关键词：微RNAS卵巢肿瘤
- MicroRNA-16逆转上皮性卵巢癌耐药的动物实验研究
- 2012年
- 目的:研究微小RNA-16(miR-16)对人上皮性卵巢癌裸鼠皮下移植瘤耐药性的逆转作用,并初步探讨其逆转作用机制。方法:24只BALB/c裸鼠,随机分为四组,每组6只:Ⅰ组给予皮下接种卵巢癌SKOV3细胞株,成瘤后应用顺铂治疗;Ⅱ组皮下接种卵巢癌SKOV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂治疗;Ⅲ组皮下接种卵巢癌SK-OV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂与miR-16阴性对照试剂(miR-16 Negative)协同治疗;Ⅳ组接种卵巢癌SKOV3/DDP顺铂耐药细胞株,成瘤后给予顺铂与miR-16化学修饰模拟物(miR-16 Agomir)协同治疗。观察比较四组皮下肿瘤生长情况,种瘤后第35天处死裸鼠,称取肿瘤组织质量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织中bcl-2 mRNA表达,免疫组化方法检测各组肿瘤组织中bcl-2蛋白表达。结果:顺铂与miR-16 Agomir协同治疗组裸鼠皮下肿瘤生长受到明显抑制,其肿瘤组织中bcl-2 mRNA表达水平较其余各组降低,差异具有显著性(P<0.05),其bcl-2蛋白表达亦明显低于其余各组(P<0.05)。结论:miRNA-16可能通过对其靶基因bcl-2的反向调控作用,逆转裸鼠卵巢癌皮下移植瘤顺铂耐药性。
- 韩汶君崔竹梅唐蕊于沙沙娄艳辉高慧
- 关键词：微小RNAS基因,BCL-2基因疗法
