姚新月
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 高致病性2型猪链球菌plcR基因敲除株的构建及其相关生物学特性的研究被引量：2
- 2014年
- 【目的】构建高致病性2型猪链球菌05ZYH33菌株plcR基因敲除株,通过比较突变株与野生株生物学特性的差异,研究plcR基因在2型猪链球菌致病过程中的作用。【方法】利用同源重组技术敲除plcR基因,多重交叉PCR及RT-PCR鉴定并测序验证。比较野生株与突变株基本生物学特性的差异,小鼠攻毒实验分析plcR基因缺失对细菌毒力的影响。【结果】经RT-PCR证实05SSU0241与05SSU0242共转录,通过多重交叉PCR及RT-PCR证实成功构建plcR基因缺失突变株,基本生物学特性显示突变株的生长速率、菌落形态、溶血活性均无显著改变,小鼠致病性试验结果显示,野生株攻毒的小鼠死亡率为70%,突变株攻毒的小鼠死亡率为40%,毒力较野生株显著降低。【结论】plcR基因作为2型猪链球菌有毒株基因组中特有的外源基因,在细菌致病过程中具有重要作用。
- 陈恬李明赵岩殷素鹏姚新月钟秋谭银玲胡福泉
- 关键词：2型猪链球菌转录调控因子
- 细菌耐受噬菌体的高超技巧:断臂求生
- 本研究对野生菌株PAls和耐受菌株PAlr进行了全基因组测序和比较基因组学分析。结果发现耐受菌株PAlr较其敏感菌株PAls丢失了一个大约219.6Kb的大片段，其中编码了192个基因。深入研究发现，192个基因中，导致...
- 乐率姚新月卢曙光谭银玲饶贤才李明金晓琳王竞赵岩胡力文胡福泉
- 关键词：细菌生理机能基因缺失
- 文献传递
- 2型猪链球菌无毒株的分离鉴定与比较基因组学研究
- 2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype2，SS2)不仅可以感染仔猪，也可以感染人类，是危害养猪业及其从业相关人员的重要的人畜共患病病原体。猪链球菌病已经出现40多年了，但是到目前为止仍不断有...
- 姚新月
- 关键词：2型猪链球菌生物学特性全基因组测序
- 文献传递
- 高致病性2型猪链球菌截短型类枯草杆菌丝氨酸蛋白酶基因的鉴定和功能研究
- 2014年
- 【目的】克隆表达高致病性2型猪链球菌05ZYH33株的SspA截短型基因,验证其是否具有酶学活性,并构建该基因的缺失突变株细菌,探讨其在2型猪链球菌致病过程中所起的作用【。方法】构建SS2的SspA截短型基因05SSU0811原核表达质粒,表达并纯化05SSU0811蛋白,运用丝氨酸蛋白酶底物Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide(pNa),通过显色反应检测表达产物的酶学活性;运用同源重组技术敲除05SSU0811基因,多重交叉PCR筛选敲除株并测序鉴定,动物试验分析05SSU0811基因缺失对细菌毒力的影响。【结果】成功表达并纯化05SSU0811蛋白,浓度约为3.5 g/L。丝氨酸蛋白酶活性测定试验证实其具有酶学活性;获得05SSU0811基因缺失突变株,小鼠攻毒试验表明,野生株攻毒的20只小鼠全部死亡,基因缺失突变株攻毒组死亡9只,死亡率45%,两组间死亡率有显著性差异。表明05SSU0811基因缺失的菌株毒力较野生株明显下降。【结论】05SSU0811基因编码的截短型丝氨酸蛋白酶仍然具有酶学活性,SS2的截短型基因SspA在高致病性2型猪链球菌的致病性方面具有一定作用。
- 殷素鹏赵岩李明陈恬姚新月钟秋谭银玲胡福泉
- 关键词：2型猪链球菌
- 细菌基因组岛转移机制、进化历程及功能特点被引量：2
- 2013年
- 基因组岛(genomic island)是一类具有特定结构和功能的大片段DNA的总称,常可发生水平转移,细菌可经过接合、转导、转化等方式获得基因组岛。基因组岛往往具有比较独特的碱基组成特征及功能特点,根据基因组岛对宿主菌生物活性所造成的影响,可将基因组岛分为致病岛、耐药岛、代谢岛和共生岛(symbiosis island)等。随着微生物基因组测序工作不断进展,越来越多的基因组岛正为人们所认识。因此,就基因组岛的基本特征、转移机制、进化途径以及功能特点进行综述,将为我们研究微生物进化提供一个新视角。
- 胡力文姚新月胡福泉
- 2型猪链球菌89K致病岛进化途径分析被引量：2
- 2012年
- 目的分析2型猪链球菌89K致病岛的结构特征,探索其进化历程。方法通过BLAST比对,获取89K致病岛的同源序列,构建其同源序列数据库;分析89K致病岛的碱基组成特征,寻找重组热点区域,并对89K进行分区;对各ORF进行功能预测,划分功能模块;对89K致病岛与其同源序列进行系统发育分析及共线性分析,推测其可能的进化历程。结果 89K致病岛可分为4个保守区,4个主要的非保守区及一段Tn916转座子,呈现多个异源序列相嵌合的结构特征。功能分析发现保守区基因主要参与致病岛的横向转移及其在宿主菌基因组中的稳定,保守区的基因呈现出进化上的一致性,且在某些菌株中保守区以连续状态存在。结论保守区在祖先状态时是一个连续整体,不同来源的非保守区经过多次水平转移和重组事件插入到保守区之间,形成了89K致病岛的嵌合结构。
- 胡力文邹凌云倪青山姚新月朱军民李明胡福泉
- 关键词：生物信息学系统发育分析进化途径
- 铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的分离与鉴定被引量：8
- 2013年
- 【目的】鉴定一株新分离的铜绿假单胞菌噬菌体PaP4的生物学特性。【方法】双层琼脂培养法制备PaP4的单个噬斑,观察噬斑特点;用聚乙二醇8000浓缩PaP4颗粒后,再用氯化铯密度梯度离心纯化;用透射电子显微镜观察磷钨酸负染色的PaP4颗粒;提取PaP4基因组核酸,通过限制性内切酶图谱分析其核酸类型;按照感染复数(MOI)分别为0.000 1、0.001、0.01、0.1、1和10加入噬菌体纯培养液和宿主菌,充分裂解细菌后,测定噬菌体滴度;以MOI=10的比例加入噬菌体及宿主菌,进行一步生长实验,绘制一步生长曲线。【结果】PaP4的噬斑直径约3 mm 5 mm,圆形透明边缘清晰;PaP4噬菌体呈多面体立体对称的头部,直径约50 nm,有一个约30 nm的短尾;限制性酶切实验表明PaP4基因组为双链DNA;当MOI为0.001时PaP4感染其宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高;用一步生长曲线描绘了其生长特性。【结论】PaP4属dsDNA短尾科裂解性噬菌体;最佳感染复数是0.001;由一步生长曲线得出感染宿主菌的潜伏期是25 min,裂解期是20 min,平均裂解量是150。
- 张琳乐率卢曙光姚新月赵岩王竞谭银玲胡福泉李明
