姜婧怡
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 供职机构:遵义医学院更多>>
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- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 遵义小钝吻鮠体表黏液抗菌肽的分离纯化被引量:1
- 2015年
- 【目的】从遵义小钝吻鮠(Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.)体表黏液中获取高质量的抗菌肽,为提高其先天免疫能力及病害防治效果奠定基础。【方法】采用物理方法收集遵义小钝吻鮠的体表黏液,以5%乙酸进行浸提,采用Sephadex G-50和Sephadex G-25两步凝胶层析技术对抗菌粗提物进行分离纯化,结合Tricine-SDS-PAGE电泳法进行分离鉴定,并运用牛津杯法和挖孔法进行抑菌试验。【结果】遵义小钝吻鮠体表黏液经乙酸法浸提处理并冷冻干燥,其粗提物呈白色粉末,稀释液蛋白质含量为1755μg/m L;经Sephadex G-50凝胶层析分离,其纯化产物抑菌活性峰主要在峰Ⅱ和峰Ⅲ,抑菌圈直径11.66 mm;再经Sephadex G-25凝胶层析分离纯化后出现单一活性峰,其产物为分子量小于4.1 k D的抗菌肽,抑菌圈直径12.85 mm。【结论】遵义小钝吻鮠无需诱导刺激,可直接采用物理方法收集其体表黏液,以5%乙酸浸提后经Sephadex G-50和Sephadex G-25两步凝胶层析便可分离出纯度较高的抗菌肽。
- 肖贵榜葛正龙姜婧怡张子萍曾晓英
- 关键词:抗菌肽分离纯化
- αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体的构建及鉴定被引量:4
- 2013年
- 目的构建αA晶体蛋白基因启动子与HSP70融合基因表达载体pαACP-HSP70。方法应用聚合酶链反应(PCR)技术,从质粒pIRES2-EGFP-HSP70中扩增HSP70基因,将已构建的含αA晶状体蛋白基因特异性启动子活性片段(αACP)的质粒pαACP-IRES2-EGFP双酶切,回收载体片段,利用基因重组技术,将HSP70基因片段定向插入载体启动子αACP之后,构建特异性表达载体,命名为pαACP-HSP70,并通过PCR、酶切和DNA测序进行鉴定。结果构建的pαACP-HSP70质粒通过酶切图谱鉴定、PCR检测有1924 bp条带出现,通过测序显示所克隆的HSP70基因与基因库中的同种序列比较,核苷酸序列有100%的同源性。结论成功构建了晶状体上皮细胞特异性表达载体pαACP-HSP70。
- 姜婧怡葛正龙
- 关键词:基因表达HSP70基因治疗
- αA晶体蛋白基因启动子与HSP70基因融合表达载体构建及其在半乳糖诱导大鼠晶状体组织的表达
- 目的:构建αA晶体蛋白基因启动子(αACP)与HSP70基因融合表达载体pαACP-HSP70,并检测其在半乳糖诱导的大鼠晶状体组织的表达及其对半乳糖诱导大鼠晶状体组织抗氧化系统的作用。
方法:利用PCR技术从pI...
- 姜婧怡
- 关键词:HSP70基因
- 文献传递