季业伟
- 作品数：6 被引量：44H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科委基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- Hsp90β亚型对于GR信号通路的伴侣作用的研究
- 真核生物细胞中热休克蛋白90(Hsp90s)作为关键的和广泛存在的分子伴侣，对于一系列客户蛋白的折叠、活化和组装具有重要的作用，从而影响信号转导、细胞周期调控和转录调节等过程。糖皮质激素受体(GR)是非常重要的信号分子，...
- 季业伟
- 关键词：糖皮质激素受体热休克蛋白基因沉默
- 小鼠Hsp84真核表达质粒的构建及鉴定
- 2006年
- 目的:构建小鼠Hsp84基因真核表达质粒。方法:采用逆转录、热降落PCR方法,扩增BALb/c小鼠Hsp84基因片段,将其连入pMD18-T载体,筛选阳性克隆、测序验证。然后以重组T载体为模板,PCR扩增目的序列,插入真核表达质粒pcD-NA3.1中,转化大肠杆菌DH5α,通过琼脂糖电泳、双酶切挑选和验证阳性重组克隆。结果:RT-PCR自小鼠脑组织中扩增出目的基因片段,克隆入pMD18-T载体后,测序结果证明为BALb/c小鼠Hsp84基因.插入目的基因的真核表达载体的酶切谱与设计一致。结论:成功构建了小鼠Hsp84编码框全长的真核细胞表达质粒。
- 季业伟赵艳王华徐晓玉周元国
- 关键词：热休克蛋白90真核表达
- HSP90β基因突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系
- 2006年
- 目的:筛选肾病综合征患者热休克蛋白90β(heatshockprotein90,HSP90)基因突变,并分析该突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系.方法:提取300例经糖皮质激素治疗的肾病综合征患者血液DNA,采用聚合酶链反应(polymerasechainreaction)和自动荧光测序方法,对HSP90基因intron9,exon10,intron10,exon11,3非编码区域DNA序列进行突变分析,结合临床资料探讨突变与糖皮质激素治疗敏感性的关系.结果:在肾病综合征患者中发现了2个HSP90β基因点突变,分别为intron10的7489C>T和3非编码区的7612C>T,其发生频率在糖皮质激素敏感和不敏感患者中分别为(2.44%,3.68%)和(2.44%,2.94%),两组患者的突变频率无统计学差异(P>0.5).结论:在肾病综合征患者中发现9例7489C>T和8例7612C>T突变,在敏感和不敏感组的发生频率无显著差异,提示HSP90β表达量与GC治疗敏感性无显著相关.
- 赵艳王华陈星云季业伟周元国
- 关键词：糖皮质激素类突变
- 26种活血化瘀中药对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响被引量：42
- 2006年
- 目的:采用鸡胚绒毛尿囊膜(ChickChorioallantoicMembrane,CAM)法从26种活血化瘀中药中初筛血管生成抑制剂。方法:试验组分别为26种活血化瘀中药,所用片剂、胶囊剂、丸剂、散剂溶解成饱和溶液,汤剂制成含生药2g/ml的水煎醇沉液,注射液、口服液、膏剂用原药物浓度。种鸡蛋孵化7天,建立CAM模型,按20μl胚加药液于明胶海绵载体上,每日1次,连续3天。孵化第10天,计数CAM载体周围5mm的血管分支点。结果:15种活血化瘀中药CAM的血管分支点数量降低(P<0.05)。结论:榄香烯乳剂、莪术油葡萄糖注射液、磷酸川芎嗪注射液、注射用阿魏酸钠、雷公藤多苷片、火把花根片、祖师麻片、复方斑蝥胶囊、大黄广廿灬虫虫丸、大活络丸、复方丹参滴丸、七厘散、活血通脉片、三棱丸及桃红四物汤Ⅱ号具有抑制CAM血管生成的作用。
- 王淑美徐晓玉陈伟海季业伟叶兰
- 关键词：活血化瘀中药抗血管生成鸡胚绒毛尿囊膜药物筛选
- 人热休克蛋白90β基因沉默质粒的构建及转染效率的观察被引量：2
- 2007年
- 目的:构建能表达小发夹RNA,从而特异、有效抑制人Hsp90βmRNA水平的质粒,比较该质粒对不同细胞株的转染效率。方法:合成3条对应于靶基因3个区域的64nt寡聚核苷酸,插入pSUPEREGFP1质粒,用DH5α细菌扩增,用酶切和测序法鉴定。以绿色荧光蛋白表达为标记,比较不同比例脂质体和质粒条件下,HepG2、HUVEC、HeK2933种细胞株的转染效率。结果:构建的pSuper-Hsp90β1、pSuper-Hsp90β2、pSuper-Hsp90β33个重组沉默质粒,插入片段碱基完全正确。在相同条件下,所构建的质粒对HeK293细胞转染效率最高,HepG2细胞最低。结论:利用pSUPER质粒可成功构建人Hsp90β基因沉默质粒,该质粒对细胞株的转染效率可因细胞的不同而有显著差异。
- 季业伟聂滨李平徐晓玉周元国
- 关键词：热休克蛋白90RNAI基因转染
- 人rgs4真核表达质粒的构建和鉴定
- 2007年
- 目的构建人rgs4基因真核表达质粒。方法采用RT-PCR方法,扩增人rgs4基因片段。插入真核表达质粒pc DNA3.1中,转化大肠杆菌DH5α,通过琼脂糖电泳、双酶切挑选和测序验证阳性重组克隆。结果RT-PCR自人胚肾上皮细胞(HEK293)中扩增出目的基因片段,插入目的基因的真核表达载体的酶切谱与设计一致,测序结果证明为人rgs4基因。结论成功构建了人rgs4编码框全长的真核细胞表达质粒。
- 王霞陈星云季业伟
- 关键词：基因克隆真核表达
