常冰梅
- 作品数：67 被引量：191H指数：8
- 供职机构：山西医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目山西省青年科技研究基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 从构树叶干粉中提取叶蛋白并对废弃物综合利用的方法
- 本发明涉及一种从构树叶干粉中提取叶蛋白并对废弃物综合利用的方法，是采用碱提酸沉法提取构树叶蛋白，提取过程产生的废液利用浓缩醇沉法提取粗多糖，产生的构树叶废渣酶解后制备水不溶性膳食纤维，使资源得到合理利用。本发明方法工艺简...
- 解军傅松涛孙鸽云于保锋常冰梅周然
- 文献传递
- 海洋生物资源废弃物综合利用-废弃物中核酸产品的提取制备
- 解军韩兵社杨琦张悦红牛勃张俊芳王晓霞刘晓玲王惠珍陈显久郭拥军胥显民刘志贞常冰梅杨涛覃秀桃
- 该项研究的目标是从海洋生物中提取具有多种生物学作用的核酸物质，进一步制备成具高值化功能的生化产品、医药产品及保健品原料。技术原理为：通过产核酸单细胞生物高效稳定代谢，利用废弃物营养成分生产核酸物质；运用改良的工业稀碱法、...
- 关键词：
- 关键词：海洋生物废弃物
- 七氟醚预处理对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2019年
- 目的研究七氟醚对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECS)损伤的保护作用及可能机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞并鉴定;将人脐静脉内皮细胞生长至70%～80%融合时分为4组:正常葡萄糖浓度组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高葡萄糖组(25mmol/L葡萄糖)、甘露醇组(5.5 mmol/L葡萄糖+19.5 mmol/L甘露醇)、高葡萄糖(25 mmol/L葡萄糖)+七氟醚组。各组细胞培养第1天、第4天、第7天评估细胞功能改变:采用MTT法观察细胞增殖的改变;流式细胞术PI/Annexin双染法检测细胞凋亡水平;Griess检测一氧化氮(NO);RT-PCR测定细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达;Western Blot检测Bcl-2蛋白表达水平。结果各组细胞增殖水平比较差异无统计学意义。与正常糖浓度组比较,高葡萄糖组细胞凋亡增加,Bcl-2表达下调(P <0.05),Bax表达上调(P <0.05),eNOS表达下降(P <0.05);与高葡萄糖组比较,高葡萄糖+七氟醚组水平细胞存活数量增多(P <0.05),SOD活性增强(P <0.05)。结论七氟醚对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞有抑制凋亡和抗氧化的保护作用。
- 王丽丽常冰梅张文颉
- 关键词：七氟醚人脐静脉内皮细胞高糖内皮型一氧化氮合酶一氧化氮
- NK4蛋白在大肠埃希菌中的表达、纯化、复性及活性测定被引量：1
- 2011年
- 目的在大肠埃希菌(E.coli)中高表达NK4蛋白,经鉴定、纯化、复性后测定其生物学活性。方法采用重组DNA技术对已有质粒pGEX-4T-1-NK4和pBV220-HGFα进行改造,构建质粒pBV220-NK4,并使其转化E.coliBL21(DE3),温控诱导表达目的蛋白NK4。蛋白鉴定采用SDS-PAGE和Western blot;蛋白纯化采用包涵体超声破碎、洗涤和Sephacryl-S200凝胶过滤层析。经梯度稀释复性后,采用MTT法和免疫细胞化学方法检测重组蛋白NK4对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)ECV304增殖的作用。结果重组质粒pBV220-NK4酶切图谱和序列测定与预期一致。SDS-PAGE显示有相对分子质量49 000的目的蛋白,表达量为30%。Western blot结果证实目的蛋白带有NK4的氨基端,经包涵体洗涤、层析后NK4的纯度为95%。复性后的NK4可抑制ECV304增殖,并抑制ECV304增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclearantigen,PCNA)的表达。结论我们建立了NK4的原核高表达体系及纯化制备工艺,所制备的NK4蛋白具有生物学活性,为大规模制备有活性的NK4及深入研究其相关功能奠定了基础。
- 常冰梅刘晓军李美宁张悦红程牛亮牛勃
- 关键词：NK4原核表达纯化活性测定
- LAK细胞及TIL细胞的制备及临床应用
- 牛勃刘卓拉杨琦张明升解军郑国平杨涛常冰梅张俊芳田志刚毛慧生韩兵社王勇王惠珍刘晓军
- 该项目的研究成果达到了制备LAK和TIL细胞的来源较广泛（自体、异体和胎儿脾脏）；可进行大规模常规培养和应用；转化、激活和扩增工艺稳定；培养出LAK和TIL细胞杀伤活性高；生产成本、不良反应低；临床疗效可靠的要求。是生物...
- 关键词：
- 关键词：免疫细胞细胞因子抗肿瘤
- 人肝细胞生长因子基因工程和蛋白质工程研究
- 牛勃程牛亮解军杨琦杨涛常冰梅张悦红王惠珍胥显民柳湘党素英向前王晓霞张俊芳
- 利用蛋白质工程技术，对HGF基因序列进行转录前加工、修饰，用插入基因技术在HGF基因序列上加上终止密码子和起始密码子，分别构建HGFa 和HGFB 原核表达体系。表达产物利用异源蛋白体外共复性技术制备HGF，经初步鉴定H...
- 关键词：
- 关键词：肝细胞生长因子基因工程分离纯化
- 前列腺素脱氢酶对大肠癌SW480细胞恶性增殖的抑制作用被引量：6
- 2008年
- 目的研究15-羟基前列腺素脱氢酶(15-hydroxyprostaglandin dehydrogenase,PGDH)对SW480大肠癌细胞恶性增殖的抑制作用及机制。方法构建PGDH真核表达质粒(pcDNA3.1-PG-DH),在大肠癌SW480细胞中转染并表达PGDH蛋白,采用MTT法、平板集落和软琼脂克隆形成实验,分析PGDH对SW480恶性增殖的影响。Westernblot检测p53、p21蛋白表达改变情况。结果转染表达PGDH后,细胞增殖受到抑制,实验组平板集落形成率为16%,而对照组为58%,两者间差异显著(P<0.05);肿瘤细胞的停泊-非依赖能力降低,实验组软琼脂克隆体积小且形成个数(7±1.68)明显少于对照组(16.3±3.63),差异显著(P<0.05)。Westernblot分析表明,转染表达PGDH后伴随着p53、p21蛋白表达升高。结论转染表达PGDH蛋白能够部分逆转大肠癌SW480细胞的恶性表型,其过程可能与p53、p21通路密切相关。
- 李美宁冯燕解军常冰梅张悦红殷云勤程牛亮
- 关键词：大肠癌细胞生长P53
- 人肝细胞生长因子在毕赤酵母中的分泌表达及其活性
- 2011年
- 目的在毕赤酵母中分泌表达人肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF),并检测其活性。方法从真核表达质粒pRC/CMV-HGF中扩增HGF的编码基因,将其克隆入表达载体pPIC9K,构建重组表达质粒pPIC9K-HGF,电穿孔法转化毕赤酵母菌株KM71,PCR筛选阳性菌株,经甲醇诱导表达重组人HGF(rhHGF)。表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,检测其对原代培养的大鼠肝细胞增殖的影响。结果重组表达质粒pPIC9K-HGF经酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约80 000,表达量占菌体总蛋白的18%,可与兔抗人HGF多抗特异性结合,并可刺激大鼠肝细胞增殖。结论在毕赤酵母菌中成功分泌表达了rhHGF,表达产物具有促进肝细胞增殖的活性。
- 常冰梅刘晓军李美宁张栋张悦红程牛亮牛勃
- 关键词：肝细胞生长因子毕赤酵母肝细胞细胞增殖
- 重组人肝细胞生长因子β链工程菌的高密度发酵
- 2004年
- 目的 实现重组人肝细胞生长因子 β链 (rhHGFβ)工程菌的高密度高表达发酵。 方法 首先在摇瓶中进行了培养条件的摸索 ,确定了该工程菌的培养条件、诱导起始时间和诱导时间 ,然后用 15L自控发酵罐进行分批补料培养 ,发酵中分阶段限制性流加氮、碳源 ,保持溶氧在 30 %以上。结果 菌体发酵密度达到 39g/L(湿菌重 ) ,达到并超过了重组蛋白在摇瓶中的表达水平 ,重组蛋白的表达占菌体总蛋白的 30 %左右。结论 本研究为rhHGFβ进一步下游纯化及功能研究奠定了基础。
- 韩兵社张俊芳解军常冰梅程牛亮牛勃
- 关键词：肝细胞生长因子重组蛋白质类大肠杆菌分批补料培养
- 一种双重靶向抑制肿瘤细胞和肿瘤血管且性质稳定的多肽
- 本发明涉及蛋白质多肽领域，具体地讲，涉及运用化学合成或者基因工程与蛋白质工程技术，设计制备的一种小分子多肽ERCP，实验研究结果表明，所述多肽不仅具有其它血管生成抑制剂抑制肿瘤的功效，还能诱导肿瘤细胞发生凋亡，而且该小肽...
- 杨利军于世平杨涛徐勇张利桃王宇涛章毅常冰梅卢培芬刘志贞张建林代洁陈俊俊
