廖红 作品数:15 被引量:27 H指数:3 供职机构: 南京军区南京总医院 更多>> 发文基金: 江苏省科技支撑计划项目 南京军区医学科技创新课题 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
假丝酵母菌属感染评分预测外科ICU患者侵袭性真菌感染 2014年 目的采用假丝酵母菌属评分(CS)以预测普通外科ICU患者侵袭性假丝酵母菌病(IC),弥补血培养方法的不足。方法采集2011年6月-2013年5月普通外科ICU 307例患者资料及微生物检验结果,结合临床诊疗实际,参考国外假丝酵母菌属感染评分标准(CS=2×脓毒症+1×外科手术+1×全肠外营养+1×假丝酵母菌属定植),以CS=3作为预测假丝酵母菌属感染的临界值,并将评分结果与真菌培养结果进行比较分析。结果 307例ICU患者中,CS≥3者145例占47.2%;确诊IC感染患者34例,感染率为11.1%;CS≥3的确诊感染IC患者33例,占总体确诊感染IC患者总数的97.1%。结论假丝酵母菌属评分方法早期预测ICU患者侵袭性假丝酵母菌病具有一定的价值,对临床预防性应用抗真菌药物有一定的指导意义。 廖红 张国勇 李芳秋 李伟 韩丹丹 刘倩关键词:假丝酵母菌属 侵袭性念珠菌感染病人血清抗烯醇化酶抗体水平变化及影响因素 <正>目的我们建立了检测念珠菌烯醇化酶(enolase,Eno)抗体(抗Eno)的ELISA。并且通过回顾性研究,证实检测抗Eno的方法诊断侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的特异性能高达8... 李芳秋 廖红 张国勇 李伟 史利宁 胡毓安 刘倩文献传递 白色念珠菌H3K4甲基转移酶N端肽段抗体的ELISA检测方法建立 2013年 目的建立检测人血清中抗白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段(N—terminal region of histone 3 lysine 4 methyhransferase,Setl-208p)IgG类抗体的ELISA方法,评估其在侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)患者中的早期诊断价值。方法收集IC患者(105例)、定植患者(37例)、细菌感染患者(25例)、其他真菌感染患者(10例)以及健康体检者(200例)血清,用Setl-208p作为包被抗原,血清1:500稀释,以羊抗人IgG-HRP为二抗,测定人血清中相应的抗Setl-208p抗体水平,确定cut-off值并考查方法的敏感度、特异度和准确度。结果以重组Setl-208p抗原建立的ELISA法精密度良好,批内变异系数(coefficient of variation,CV)为5.5%,批间CV为10.4%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为91.8%,根据ROC曲线,选择吸光度(absorbance,A)值0.40作为cut off值,对IC的诊断敏感度为79.2%,特异度为90%,且与细菌感染及其他真菌感染病人(如曲霉)无非特异交叉反应。此外,IC患者中抗Setl-208p抗体阳性率(76.1%,80/105)显著高于念珠菌定植者抗Setl-208p抗体阳性率(32.4%,12/37)(χ^2=22.9,P〈0.01)。结论建立了检测抗白念珠菌抗Setl-208p抗体的ELISA法,在IC早期诊断中具有潜在应用价值。 孔倩倩 马春芳 蔡迁 廖红 韩丹丹 史利宁 李芳秋关键词:念珠菌 ELISA 血清学诊断 抗烯醇化酶抗体与(1-3)-β-D-葡聚糖检测诊断侵袭性念珠菌病的临床比较 被引量:7 2014年 目的比较抗烯醇化酶抗体(抗-Eno)检测与(1-3)-β-D-葡聚糖(BG)检测对侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的诊断价值。方法留取临床为诊断IC而送检BG测定的患者血样,用ELISA法测定抗-Eno抗体,以真菌培养结果为基础,分析比较两种血清学方法诊断IC的效能。结果 210例患者为研究对象。15例患者经念珠菌培养确诊IC,确诊感染率7.1%;BG阳性54例,阳性率为25.7%;抗-Eno阳性33例,检出阳性率为15.7%。抗-Eno和G试验诊断IC感染的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为46.7%、86.7%、21.2%、95.5%和33.3%、74.9%、9.3%、93.6%。两种血清学方法联合检测,敏感性提高至66.7%。结论抗-Eno对IC的诊断性能优于G试验;联合两种血清学方法,能有效提高敏感性。 廖红 李芳秋 张国勇 李伟 韩丹丹 刘倩关键词:侵袭性念珠菌病 烯醇化酶抗体与(1-3)-β-D-葡聚糖检测诊断侵袭性念珠菌病的临床比较 <正>背景:侵袭性念珠菌病(Invasive candidiasis,IC)发病率增加,但诊断困难。检测真菌细胞壁(1-3)-β-D-葡聚糖(BG)的G试验其敏感性、特异性还有待提高。检测抗体的方法目前尚停留在实验阶段,... 李芳秋 廖红 胡毓安 史利宁 刘倩 张国勇 李伟文献传递 侵袭性念珠菌病患者抗烯醇化酶抗体水平变化及影响因素 背景:我们既往已经建立了检测念珠菌烯醇化酶抗体(抗-Eno)的ELISA,并且通过回顾性研究,证实检测抗-Eno的方法诊断侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的特异性能高达80%以上,能够区分... 李芳秋 廖红 胡毓安 史利宁 刘倩 张国勇 李伟文献传递 念珠菌优势抗体检测方法的建立及临床诊断价值评估 被引量:9 2013年 目的侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)是免疫功能损伤或低下患者常见的感染和死亡原因,近年来检测IC患者血清中特异性抗体的血清学诊断方法成为研究热点。本文旨在建立检测念珠菌烯醇化酶(Enolase,Eno)、果糖二磷酸醛羧酶(fructose-bisphosphate aldolase,Fba1)特异性抗体的ELISA方法,评估其在IC早期诊断中的应用价值。方法利用基因重组技术获得的Eno、Fba1重组蛋白作为包被抗原,建立测定人血清相应抗体的ELISA,并对方法的敏感性、特异性进行考查。结果建立了检测IC患者血清抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA,cut-off值分别为吸光度(A)值0.370和0.610。ELISA结果显示,IC患者血清中的抗Eno、抗Fba1抗体水平明显高于健康对照和非IC患者对照(P<0.001)。抗Eno和抗Fba1对诊断IC的敏感性和特异性分别为72.3%(73/101)和98%(196/200),87.1%(88/101)和96%(192/200),联合检测可提高敏感性至91.0%。且与细菌感染及其他真菌感染患者(如曲霉病)无交叉反应。IC患者中40.6%(41/101)可以在血培养阳性前检测到抗Eno、49.5%(50/101)可以在血培养阳性前检测到抗Fba1。结论建立了检测抗Eno、抗Fba1抗体的ELISA法,检测念珠菌菌丝相分泌蛋白IgG抗体特异性和灵敏度良好,在念珠菌感染诊断中具有潜在临床应用价值。 马春芳 陆静芬 孔倩倩 韩丹丹 廖红 李芳秋关键词:念珠菌 烯醇化酶 ELISA 抗曲霉硫氧还蛋白还原酶单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:2 2014年 目的制备烟曲霉硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TR)GliT单克隆抗体(单抗)并进行鉴定。方法取重组烟曲霉TR蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,筛选分泌抗TR抗体的杂交瘤细胞,有限稀释法克隆化。用ELISA法测定抗体效价,IsoStrip鉴定抗体类、型,用western blot、免疫荧光分析技术和免疫组化染色鉴定单抗的特异性。结果筛选到1株稳定分泌抗TR单抗(Anti-TR1)的杂交瘤细胞,抗体亚类为IgG1,轻链为κ型。ELISA法测定效价为5×105,能够与烟曲霉分泌蛋白及菌丝中天然TR特异性结合,还可与基因重组TR特异性结合。免疫荧光检测表明,该株单抗与烟曲霉、黄曲霉和黑曲霉菌丝均发生反应,是曲霉属特异性的抗体。病理组织免疫组化染色结果显示,该抗体可与曲霉菌丝产生特异性反应。结论获得了1株持续分泌高效价抗曲霉属特异性抗TR单抗的交杂瘤细胞株,为进一步的研究奠定了基础。 史利宁 胡毓安 陆静芬 廖红 马春芳 李晓军 李芳秋关键词:曲霉 单克隆抗体 健康人外周血烟曲霉硫氧还蛋白还原酶抗原特异性T淋巴细胞检测与结果评价 被引量:2 2014年 目的为评估烟曲霉硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TR)抗原是否具有免疫保护作用,文中建立并优化检测健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中TR抗原特异性T淋巴细胞(TR/AST)分泌干扰素γ(interferonγ,IFN-γ)与白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT)检测技术,以探讨TR抗原特异性T淋巴细胞在侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)中的作用。方法采用方阵滴定法优化ELISPOT反应条件。以烟曲霉TR为特异性刺激物,阳性细胞刺激剂为对照,用ELISPOT技术检测20名健康人外周血PBMC分泌IFN-γ、IL-4的阳性斑点形成细胞(spot forming cell,SFC)频数。结果方阵滴定法结果显示,10μg TR抗原、健康人PBMC终浓度为3×105/孔时ELISPOT检测结果最佳。20名健康人特异性分泌IFN-γ和IL-4的SFC频数分别为15(3.5,59.5)个和0(0,0)个,IFN-γ的SFC频数显著高于IL-4,差异有统计学意义(P<0.001)。TR可刺激所有20名健康人产生IFN-γ应答,其中9例产生强IFN-γ应答(SFC>20个/3×105PBMC),占45%;而19名健康人在TR刺激后不产生IL-4应答,仅1例产生弱IL-4应答(SFC=1)。结论烟曲霉TR抗原诱导的T细胞免疫以Th1型免疫应答占绝对优势,因此,该抗原具有成为保护性抗原的潜能。 史利宁 胡毓安 廖红 韩雪 韩丹丹 李晓军 李芳秋关键词:烟曲霉 硫氧还蛋白还原酶 T淋巴细胞 酶联免疫斑点检测 烯醇化酶抗体与(1-3)-β-D-葡聚糖检测诊断侵袭性念珠菌病的临床比较 背景:侵袭性念珠菌病(Invasive candidiasis,IC)发病率增加,但诊断困难.检测真菌细胞壁(1-3)-β-D葡聚糖(BG)的G试验其敏感性、特异性还有待提高.检测抗体的方法目前尚停留在实验阶段,主要检测... 李芳秋 廖红 胡毓安 史利宁 刘倩 张国勇 李伟