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定量聚合酶链反应检测慢性乙型和丁型肝炎患者血清HBV DNA被引量：8: 1997年; 本研究应用新型定量PCRHBV检测法—AcuGenAmplisensorTMHBV法对70例慢性乙型与丁型肝炎病例进行血清HBVDNA水平测定，观察乙肝在丁肝病毒重叠感染时是否对HBVDNA复制存在抑制作用。实验结果：乙肝组（34例）及丁肝组（36例）定量PCR测HBVDNA阳性率为88．2％（30/34）和91．7％（33/36）（P＞0．05）。乙肝组HBeAg阳性与抗HBe阳性病例之HBVDNA复制水平无明显差异；而丁肝组则表现明显性差异（P＜0．01）。结果提示：本组丁肝重叠乙肝感染病例中血清HBVDNA复制被抑制的现象并不明显，其中HBeAg阳性病例HBVDNA大多处于高水平复制状态；而抗HBe阳性病例则以低水平复制为主，提示肝炎病情活动和慢性化趋向与病毒复制有密切关系，定量PCR检测HBVDNA的技术可以为该领域研究提供有效手段。; 黄德庄张建成贺丽香闫惠平靳海英; 关键词：丁型肝炎 HBV 聚合酶链反应

52 例病毒性肝炎患者肝组织中丙型肝炎病毒 RNA 和 HCAg-NS3 的测定被引量：1: 1997年; 应用地高辛标记探针原位杂交法和单克隆抗ＨＣＶ－ＮＳ３－ＨＲＰ建立直接酶标免疫组化法分别测定５２例肝炎患者肝组织ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＡｇ－ＮＳ３。结果抗ＨＣＶ阳性组ＨＣＶＲＮＡ检出率５７．１％（１６／２８），ＨＣＡｇ－ＮＳ３检出率５３．６％（１５／２８）；抗ＨＣＶ阴性组其两项检出率均为１２．５％（３／２４）。肝组织中ＨＣＶＲＮＡ阳性物呈蓝紫色细小颗粒存在于肝细胞核或胞浆内，其在肝小叶中的分布可分为３型，即弥漫型、局灶型、散在型。肝组织中ＨＣＡｇ－ＮＳ３阳性物呈棕黄色细小颗粒分布于肝细胞核或胞浆内，以单个或数个阳性细胞散布于肝小叶中。２３例ＨＣＶＲＮＡ或／和ＨＣＡｇ－ＮＳ３阳性病例以肝炎后肝硬化（ＬＣ）病例占多数（１４／２３），其次为慢性重型肝炎（ＣＳＨ）和中度慢性肝炎（ＣＡＨ）。此两种检测方法具有较高符合率（９０．４％，４７／５２），表明病毒核酸及其表达产物均存在于肝细胞内，与ＨＣＶ感染密切相关。这为ＨＣＶ感染诊断提供了直接依据，有利于研究ＨＣＶ感染中病毒复制、慢性化进程、抗病毒治疗监测及重叠感染时病毒相互关系。; 黄德庄黄德庄郎振为闫惠平贺丽香; 关键词：丙型肝炎病毒 RNA 肝炎病毒性

直接酶标法检测肝组织中丙型肝炎病毒抗原（HCAg－NS_3）的研究被引量：3: 1996年; 以单克隆抗－ＨＣＶ－ＮＳ３直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙型肝炎病毒抗原（ＨＣＡｇ－ＮＳ３）进行测定，该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原（ＨＣＶ－ＮＳ３区－Ｃ３３－Ｃ）免疫小鼠并通过细胞融合术后获得。４９例病毒性肝炎患者肝组织测定结果，抗－ＨＣＶ阳性组的ＨＣＡｓ－ＮＳ３检出率为５１．９％（１４／２７），抗－ＨＣＶ阴性组为１３．６％（３／２２），两组有显著性差异（Ｐ＜０．０１），以慢性重症肝炎和肝硬化患者检出率最高，ＨＣＡｇ－ＮＳ３阳性物在肝细胞的胞核或胞浆中均可见，呈棕黄色细小颗粒状，以核型居多。直接酶标法测定ＨＣＡｇ与原位杂交法测定ＨＣＶＲＮＡ的比较，其符合率为８１．６％（４０／４９）。本项技术具有简便、快捷、特异性、敏感性佳、图象清晰等优点，易于推广应用，为ＨＣＶ感染的临床和发病机理研究提供重要检测手段。; 黄德庄闫惠平郎振为贺丽香齐文杰张建成文厚洲; 关键词：HCV-NS3

逆转录—聚合酶链反应在丁型肝炎病毒感染的应用及意义被引量：1: 1999年; 本项技术选取丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）ＲＮＡ的非抗原编码区的相对保守区为靶序列，设计两对引物，进行巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＤＶＲＮＡ。血清及肝组织采用蛋白酶消化法提取ＲＮＡ。结果发现９８例各型病毒性肝炎血清中，ＨＤＶ—Ｍ阳性组ＨＤＶＲＮＡ检出率为５６６％（３０／５３），ＨＤＶ—Ｍ阴性组为８９％（４／４５）（Ｐ＜００１）；ＨＤＡｇ或／及抗ＨＤＩｇＭ阳性血清测定ＨＤＶＲＮＡ的阳性率为５７１％（２８／４９），抗ＨＤ阳性血清的阳性率为５００％（２／４）；９例ＨＤＶ—Ｍ阳性肝组织测定ＨＤＶＲＮＡ阳性者６例，２例ＨＤＶ—Ｍ阴性肝组织均阴性。本项技术是在分子水平上检测病毒核酸、操作简便、稳定、可靠、特异性高、重复性好，可以作为ＨＤＶ血清学指标的佐证和补充，肝组织ＨＤＶＲＮＡ的测定可应用于回顾性研究，在临床病原诊断、抗病毒疗效判定、病毒复制、重叠感染等研究方面提供重要实验依据。; 黄德庄张建成闫惠平郎振为崔世昌贺丽香齐文杰; 关键词：丁型肝炎病毒逆转录 PCR

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张建成

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