张秀娟
- 作品数：26 被引量：34H指数：3
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- 相关领域：生物学医药卫生农业科学语言文字更多>>
- 猪精原干细胞超微结构观察与体外冻存条件的优化研究被引量：1
- 2014年
- 【目的】检测猪精原干细胞(PSSCs)在分化过程中其内部超微结构及细胞器的变化情况,并且找到适宜PSSCs的冷冻保存条件,为长期保存PSSCs和研究PSSCs的分化机制提供科学依据.【方法】采用两步酶消化法和Percoll不连续密度梯度法获取PSSCs,利用透射电子显微镜(TEM)对PSSCs在体外不同培养时间的超微结构变化进行观测,并且利用台盼蓝染色法和碱性磷酸酶(AP)染色法比较不同浓度的甘油和二甲基亚砜(DMSO)保存液对PSSCs冻存效果的影响.【结果和结论】未分化的PSSCs细胞膜完整平滑,细胞器正常,胞质均匀,无伪足出现,细胞核清晰.而开始分化的PSSCs出现伪足,线粒体数量大幅增加.冻存7 d后,解冻结果表明,PSSCs以V(DMSO)∶V(DMEM/F12)∶V(FBS)∶V(100×双抗)=10∶69∶20∶1为宜.
- 师如意张秀娟白银山卫恒习李莉张守全
- 关键词：超微结构冻存
- 猪精原干细胞体外培养条件的优化被引量：6
- 2013年
- 以出生后1～5 d的长白公猪为主要研究对象,采用两步酶消化法获取睾丸细胞悬液,用Percoll不连续密度梯度法对猪精原干细胞(PSSCs)进行纯化,以碱性磷酸酶(AP)染色鉴定;利用MTT法检测2种细胞因子——胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和白血病抑制因子(LIF)对PSSCs发育的影响.结果表明:用Percoll不连续密度梯度法获得的PSSCs占睾丸总细胞数的(8.19±0.83)%,AP染色的阳性率为(87.47±2.90)%,表明该方法可有效获取PSSCs;MTT法检测表明,20 ng.mL-1 GDNF+1 000 U.mL-1 LIF的组合添加对PSSCs体外增殖的效果最好.
- 师如意卫恒习李莉白银山张秀娟吴珍芳张守全
- 关键词：精原干细胞体外培养
- 2型糖尿病相关基因在人和食蟹猴外周血白细胞中的表达模式被引量：2
- 2012年
- 2型糖尿病(T2DM)是一种多因素相关的复杂的代谢性疾病。采用实时PCR技术了解51个T2DM相关基因mRNA在健康和糖尿病人/食蟹猴外周血白细胞中的表达模式。结果表明,与健康组相比,糖尿病猴中有34个基因表达量差异显著(P<0.05),约为66.7%,其中24个基因表达上调(P<0.05);而糖尿病人中有26个基因表达量差异显著(P<0.05),约为50.1%,其中16个基因表达上调(P<0.05),这些基因表达受到糖代谢、脂肪代谢、炎症等方面的影响。糖尿病人与食蟹猴样本中有18个基因都存在差异性表达(P<0.05),表达模式基本一致。因此,食蟹猴可以作为研究糖尿病的较理想的模式动物,外周血白细胞基因的表达模式可以为糖尿病早期诊断和预后评价提供重要指标。
- 季芳张艳春张艳春靳丽莎夏机良李学家李学家张秀娟刘晓明刘晓明
- 关键词：2型糖尿病基因表达模式白细胞食蟹猴
- 雄性食蟹猴高敏C反应蛋白基础值及高脂膳食诱导后与血脂变化的关系研究"被引量：1
- 2015年
- 本研究针对不同年龄段和高脂膳食诱导后雄性食蟹猴的高敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化规律进行了研究。实验利用免疫比浊法对不同年龄段食蟹猴的后肢静脉血测定,并选择中年雄性食蟹猴饲喂高脂饲料,研究高脂膳食条件下hs-CRP值的变化及与总胆固醇的关系。结果显示老龄雄性食蟹猴的hs-CRP平均值高于中年和低龄食蟹猴(6.09 mg·L-1±2.06 mg·L-1VS.2.78 mg·L-1±1.48 mg·L-1&2.31 mg·L-1±1.52 mg·L-1),且差异均有统计学意义(P<0.05);老年雄性食蟹猴的hs-CRP值高于雄性群体均值(6.09±2.06 VS.3.19±2.16),差异也有统计学意义(P<0.05)。高脂膳食诱导后,食蟹猴总胆固醇(TC)含量显著升高(P<0.05),hs-CRP与对照组比较也有明显升高(P<0.05),提示hs-CRP可能与高脂含量有一定相关性,在心血管病动物实验研究中可作为辅助的预警指标。本研究确定了不同年龄段雄性食蟹猴的hs-CRP均值,且不同年龄段间hs-CRP存在差异;雄性食蟹猴经高脂膳食诱导后在总胆固醇含量升高的同时伴随hs-CRP水平的升高。本研究结果可为以灵长类动物为实验动物的心血管病相关研究提供基础数据。
- 孙云霄张艳春靳丽莎陈子亮张秀娟沈琪琦饶军华张礼标
- 关键词：高敏C反应蛋白食蟹猴
- 中国恒河猴MHC Ⅰ型部分等位基因的分析被引量：3
- 2011年
- 目的对中国恒河猴主要组织相容性复合体(MHC)I型部分基因进行携带情况调查与分析。方法采用序列特异性引物(PCR-SSP)分型方法对华南灵长类动物研究中心繁殖的30只谱系清晰的中国恒河猴(Macacamulatta)的32个MHC I型分子位点进行检测。结果采用的32对引物中,中国恒河猴可检出携带23个MHC I等位基因,但基因携带频率存在很大的差异,由3.57%至82.14%不等。结合遗传谱系分析,判断A1*21和A2*05之间以及B*04和B*30之间可能就是连锁的。结论中国恒河猴携带能控制病毒复制的MHC I型基因位点的频率较高,其基因携带频率与已发表的印度恒河猴携带频率存在明显差异。本研究为促进中国恒河猴在AIDS研究中的应用,以及为建立携带特定MHC I基因实验猴小种群提供了依据。
- 季芳张艳春李学家张秀娟彭白露金石军刘晓明
- 关键词：中国恒河猴PCR-SSP
- 食蟹猴糖化血红蛋白水平的调查研究被引量：1
- 2014年
- 目的调查食蟹猴群体的HbA1c水平并建立其背景数据库。方法采集后肢静脉血以高效液相色谱法测定176只(雌性88只;雄性88只)食蟹猴的HbA1c值。结果雄性食蟹猴的HbA1c平均值高于雌性食蟹猴(4.80%±0.56%vs.4.61%±0.55%),两者间存在显著性差异(P<0.05)。不同年龄段食蟹猴的HbA1c统计结果发现,青年组雌雄性食蟹猴的HbA1c平均值均高于老年组,两个年龄段间的雌性和雄性之间均存在显著性差异(P<0.05),而中年组雌性与雄性和其他年龄段间的差异不显著。结论不同性别和年龄段间食蟹猴HbA1c水平具有显著差异性,HbA1c水平与性别和年龄具有相关性。
- 孙营张秀娟孙云霄季芳刘晓明
- 关键词：食蟹猴2型糖尿病糖化血红蛋白
- 小鼠精原干细胞分离培养条件的优化被引量：3
- 2012年
- 采用两步酶消化法获得5～7日龄昆明小鼠睾丸组织的单细胞悬液,比较差速贴壁法和Percoll不连续密度梯度法对精原干细胞(Spermatogonial stem cells,SSCs)的纯化效果,并利用MTT法检测不同生长因子及添加浓度对SSCs体外增殖的影响.结果表明5日龄小鼠和7日龄小鼠的睾丸细胞总数存在较大差异(P<0.05),但SSCs数目无显著差异(P>0.05);与Percoll不连续密度梯度法相比,差速贴壁法获得了较高的SSCs数量和纯化率,其纯化率平均85.06%;MTT法检测结果表明LIF因子的添加对SSCs的增殖具有促进作用,20 ng/mL GDNF+20 ng/mLbFGF+103 U/mL LIF的组合添加是昆明小鼠SSCs的体外培养增殖的最佳组合.
- 张秀娟李莉卫恒习白银山师如意张守全
- 关键词：昆明小鼠精原干细胞体外培养MTT法
- 2型糖尿病食蟹猴白细胞NF-κB和IκBα表达相关性分析被引量：1
- 2011年
- 比较了食蟹猴2型糖尿病(T2DM)不同发病阶段与正常对照组的空腹血糖值(FPG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在血液中含量,及荧光定量PCR方法测定的NF-κB和IκBα在外周血白细胞中表达量。结果显示,FPG、CHOL和LDL-C随疾病进行呈上升趋势,而HDL-C先上升后下降,血糖血脂值变化表明,在T2DM临床前期就出现脂代谢异常;除IκBα表达量在模型初期显著降低,NF-κB表达量在临床期显著升高外,其他各阶段无差异,基因表达量变化表明,在疾病初期开始启动IκB/NF-κB信号通路,到临床期启动完全。根据以上结果推测,前期低水平炎症反应引起脂代谢异常,而后者又促进前者的发展,至临床期才出现明显炎症状态。
- 张艳春郝香芬夏机良季芳张秀娟万玉玲刘晓明彭白露
- 关键词：IΚBΑNF-ΚB荧光定量PCR2型糖尿病食蟹猴
- 中老年食蟹猴群中糖尿病相关基因的表达状态
- 目的Ⅱ型糖尿病是一种世界性的中老年代谢性疾病,多个关键基因的调节对其发病进程具有重要作用,因此深入了解相关基因在糖尿病发病进程中的表达时相意义重大。非人灵长类动物模型的血糖变化规律、病理特征与人类糖尿病患者的临床表现极为...
- 张秀娟李学家颜孙兴夏机良刘晓明彭白露
- 关键词：食蟹猴外周血白细胞风险预警
- 文献传递
- 应用线粒体基因序列分析虎的进化关系
- 2014年
- 【目的】研究华南虎Panthera tigris amoyensis、东北虎P.tigris altaica和孟加拉虎P.tigris tigris之间的进化关系.【方法】采用PCR扩增结合质粒测序的方法,获得东北虎、孟加拉虎和华南虎线粒体DNA COⅠ基因750 bp序列、COⅢ基因737 bp的序列和ND4基因561 bp的序列.使用DNAStar和DNAssit软件对这些序列进行碱基组成、序列间的转换/颠换值、遗传距离等分析.选择家猫Felis catus、猎豹Acinonyx jubatus及云豹Neofelis nebulosa的mtDNA作为外群,利用Mega 4.0采用邻接法重建华南虎、东北虎、孟加拉虎的进化关系树.【结果和结论】研究发现东北虎、孟加拉虎和华南虎线粒体DNA COⅠ、COⅢ和ND4基因变异位点较少,且华南虎同孟加拉虎、东北虎的遗传距离要大于孟加拉虎和东北虎的遗传距离;构建了华南虎、东北虎、孟加拉虎的COⅠ、COⅢ和ND4基因的基因树,通过对基因树分析可以得东北虎和孟加拉均是由华南虎进化而来的结论.
- 石俊松田存锋许继国张秀娟李莉张守全
- 关键词：线粒体基因系统进化树
