张维
- 作品数：11 被引量：15H指数：2
- 供职机构：贵阳医学院附属医院更多>>
- 发文基金：贵州省省长基金贵州省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人类cyclophilin A基因cDNA的克隆和序列测定被引量：5
- 2003年
- 目的:克隆人类环孢霉素A受体亚型cyclophilinA(CypA)基因,对该基因进行序列测定。方法:利用EST重叠序列拼排技术,设计特异性CypA引物,以人外周血白细胞总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,纯化PCR产物,装pGEM-T载体,进行DNA序列测定。结果:成功克隆了人类Cyp A基因cDNA序列的开放阅读框,经DNA序列测定证实序列正确。结论:通过克隆人CypA基因,并克隆人pGEM-T载体,为下一步的基因表达和功能研究奠定了实验基础。
- 任志娟王季石肖芸张维陈剑孙等军张旭吴镇宇方琴
- 关键词：CDNA克隆环孢霉素受体
- 肝病与血液病
- 人的肝脏与血液系统的关系是十分密切的。胚胎第8～12周肝脏为主要造血器官,婴儿出生后以骨髓造血为主,至成人时完全由骨髓造血,但肝脏仍是各种造血因子的储备场所,如叶酸、维生素
- 张维
- 文献传递
- 巢式MSP法检测胃癌患者血浆中p16、MGMT基因甲基化状态
- 目的探讨胃癌患者血浆中p16和MGMT基因启动子区甲基化状态。方法采用巢式甲基化特异性PCR法(nested methylation-specific PCR,nMSP)对69例胃癌患者血浆中p16和MGMT基因启动子区...
- 王燕周力陈晓琴张维王岚
- 文献传递
- 巢式MSP法检测胃癌患者血浆p16、MGMT基因甲基化被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨胃癌患者血浆p16和MGMT基因启动子区甲基化状态.方法:采用巢式甲基化特异性PCR法(nested methylation-specific PCR,nMSP)对69例胃癌患者血浆中p16和MGMT基因启动子区甲基化状态进行研究.同时以16例健康体检作为对照.结果:在受检的69例胃癌患者中,p16、MGMT基因启动子区甲基化率分别为30.4%(21/69)、17.4%(12/69).对照组未见p16、MGMT基因启动子区甲基化.胃癌患者血浆中存在p16和MGMT基因启动子区甲基化,其中p16基因启动子区甲基化与对照组相比差异显著,具有统计学意义.结论:检测血浆循环DNA中p16、MGMT基因启动子区的甲基化状态,可为胃癌的早期分子诊断提供了有用信息.
- 王燕周力陈晓琴张维王岚
- 关键词：P16MGMT甲基化胃癌
- G156A六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶原核表达载体的构建和表达
- 2004年
- 目的 :构建原核表达载体pPROEXHTb G15 6AMGMT ,观察突变型G15 6AMGMT在大肠杆菌中的表达情况。方法 :通过基因重组技术将G15 6AMGMT亚克隆至pPROEXHTb原核表达载体 ,在大肠杆菌DH5α中经异丙基硫代 β D半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。 结果 :经PCR及酶切分析证实 ,成功构建了pPROEXHTb G15 6AMGMT原核表达载体 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)显示重组克隆化基因pPROEXHTb G15 6AMGMT在大肠杆菌DH5α中有表达。结论 :G15 6AMGMT在大肠杆菌DH5α中有表达 ,为获取突变型MGMT工程蛋白奠定了基础。
- 肖芸王季石孙等军任志娟张维吴正宇张旭方琴
- 关键词：大肠杆菌基因表达
- 肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶及其同工酶的变化被引量：2
- 2004年
- 目的:探讨肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶(acid alpha naphthyl aetate esterase,α-ANAE)及其同工酶的临床应用价值. 方法:通过比色法测定血清ANAE总活性.ANAE同工酶的检测采用琼脂糖凝胶电泳法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法. 结果:肝病患者包括肝炎、肝硬化及肝癌血清ANAE含量均低于对照组,肝硬化组及肝癌组明显低于肝炎组.通过琼脂糖凝胶电泳法可以在肝病患者血清中检出两种ANAE同工酶异常谱形.聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出更多ANAE同工酶谱带. 结论:血清ANAE含量测定可作为评价肝细胞变性坏死、肝脏合成功能异常的一项血清学指标.肝病患者血清中检出的异常ANAE同工酶谱带性质、组成及在临床应用上的价值还有待于进一步探讨.
- 肖芸王燕戴志敏张维廖若男
- 关键词：肝病患者检出琼脂糖凝胶电泳法酯酶
- 慢性粒细胞白血病MGMT基因的克隆及逆转录病毒表达载体的构建
- 2002年
- 目的 :从慢性粒细胞白血病病人外周血中克隆人MGMT基因 ,并进行逆转录病毒表达载体的构建。方法 :用RT PCR方法从慢性粒细胞白血病病人外周血白细胞中克隆得到长为 6 84bpMGMTcDNA。将该片段与 pGEM T载体连接 ,转化大肠杆菌DH5后得到重组质粒 pGEM T MGMT ,进行限制性内切酶酶切分析、PCR及测序鉴定。再将MGMTcDNA亚克隆到G1Na逆转录病毒载体EcoRⅠ和xhoⅠ位点之间 ,并进行酶切、PCR鉴定。结果 :成功克隆了人MGMT基因 ,经酶切分析、PCR初步筛选及测序鉴定证实序列正确 ,并成功构建到逆转录病毒载体上。结论 :通过克隆人MGMT基因 ,并构建逆转录病毒载体G1Na MGMT ,为探讨将耐药基因导入造血干细胞对烷化剂类化疗药物抗性的研究奠定了基础。
- 肖芸任志娟张维孙等军陈剑吴镇宇张旭方琴王季石
- 关键词：慢性粒细胞白血病MGMT基因克隆
- 新福菌素对人白血病细胞株K562的凋亡诱导作用被引量：1
- 2004年
- 目的 研究新福菌素对人白血病细胞株K562的体外抑瘤效应及其作用机制。方法应用MTT比色法观察新福菌素对细胞的生长抑制作用;显微镜观察细胞的生长变化和结构改变;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡和Bel-2蛋白表达情况。结果 新福菌素对人白血病细胞株K562有较强的体外增殖抑制作用。新福菌素能诱导K562细胞凋亡,同时伴随有Bel-2蛋白表达下调。结论 新福菌素对白血病细胞株K562有较强的抗瘤效应,其可能与Bel-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关。
- 方琴孙等军王季石王培民张维张旭吴正宇刘丰丰
- 关键词：新福菌素白血病K562细胞抑瘤效应
- pPRMETb-TRAIL原核表达载体的构建和表达及纯化
- 2002年
- 目的 :为获取较高纯度的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)工程蛋白。方法 :将TRAIL基因构建于原核表达载体pPRMETb中 ,在大肠杆菌中由异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达 ,对包涵体进行洗涤、尿素裂解、复性后过镍柱层析纯化。结果 :经酶切、测序鉴定证实 pPRMETb TRAIL构建完全正确 ,在大肠杆菌xl1 blue中经IPTG诱导表达量较高 ,包涵体经尿素裂解后行镍柱纯化得到了较高纯度的TRAIL蛋白。结论
- 孙等军方琴陈剑肖芸任志娟张维张旭王季石
- 关键词：大肠杆菌聚合酶链反应肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体原核表达载体
- 肝硬化患者血清和腹水中酸性α-醋酸萘酯酶的含量
- 2004年
- 目的 :探讨肝硬化患者血清、腹水酸性α 醋酸萘酯酶 (ANAE)的含量与肝硬化肝功能Child pugh分级的关系。方法 :比色法测定肝硬化患者血清、腹水ANAE含量。结果 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量较对照组明显降低 ,其中肝硬化肝功能ChildB级以后血清、腹水ANAE含量下降明显。血清、腹水ANAE含量相关性显著。结论 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量 。
- 王燕周力张永宏张维陈玉梅
- 关键词：肝硬化腹水血清
