戴克胜
- 作品数:133 被引量:118H指数:6
- 供职机构:苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗血小板膜糖蛋白Ⅰbα/Ⅲa双特异单链抗体的构建及其功能研究被引量:6
- 2002年
- 目的 构建、表达抗血小板膜糖蛋白 (GP)Ⅰbα GPⅢa双特异单链抗体 ,为其进一步研究、应用奠定基础。方法 应用PCR技术 ,扩增出接头片段和SZ 2 1单链抗体基因 ,克隆入pUCm T载体 ,测序分析。应用基因重组技术将接头片段、SZ 2 1单链抗体基因和SZ 2单链抗体基因重组拼接 ,构建SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体表达载体pET2 2 2 1 L 2scFv,并测序验证。导入大肠杆菌BL2 1 (DE3)Plys,诱导表达。流式细胞术、ELISA、Western印迹检测SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体与血小板结合能力 ,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究。结果 表达载体pET2 2 2 1 L 2scFv构建拼接正确 ;表达产物以包涵体形式为主 ,表达量占菌体总蛋白的 1 4 % ;表达产物具有与血小板以及血小板GPⅠbα和Ⅲa结合的活性 ,可抑制瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导的血小板聚集 ,此作用呈剂量依赖性。结论 成功表达了SZ 2 SZ 2 1双特异单链抗体 ,该抗体具有与相应 2个靶抗原结合的活性 ,并可抑制瑞斯托霉素。
- 戴克胜安广宇阮长耿
- 关键词:单克隆抗体血栓形成
- 一种血小板GPIbα蛋白相关的抗原表位肽及其应用
- 本发明公开了一种血小板GPIbα蛋白相关的抗原表位肽及其应用,同时提供了8株与相应的抗原表位肽特异性结合的抗人血小板GPIbα的杂交瘤细胞株。本发明通过ELISA方法检测所得8株单克隆抗体均具有较高的效价,同时经流式细胞...
- 戴克胜
- 文献传递
- EB病毒BHRF1基因的克隆及其表达产物抑制细胞凋亡的研究被引量:4
- 1998年
- 目的EB病毒BHRF1基因克隆,其表达产物抑制CHO细胞凋亡功能的研究。方法以B95-8细胞株EBVDNA为模板设计一对引物,采用PCR技术扩增BHRF1基因,用目的基因内的两个单酶切点BamHⅠ、BglⅠ进行酶切鉴定。用引物上所引入的两个酶切位点NcoⅠ、SclⅠ酶切目的基因后定向连接到pBV221载体上,转入宿主菌DH5α经质粒抽提,单、双酶切鉴定,从所获克隆中筛选重组质粒克隆。温控诱导目的基因表达,SDS-PAGE及凝胶薄层扫描分析。采用缺血清培养方法建立CHO细胞凋亡模型。结果所得扩增产物长592bp与预期大小一致;筛选出的9个重组质粒克隆经SDS-PAGE和扫描表明重组蛋白表达量占菌体蛋白总量的2.5%。将含重组蛋白的菌体蛋白加入缺血清培养体系,通过与空白菌体蛋白对照表明,重组蛋白具有明显的抑制CHO细胞凋亡的能力。结论BHRF1蛋白具有有效控制血清缺乏所诱导的CHO细胞凋亡功能,这为BHRF1蛋白的广泛应用提供了依据。
- 戴克胜朱振宇马涧泉
- 关键词:EB病毒BHRF1基因细胞凋亡
- 血小板活化、凋亡、微颗粒形成和GPIb α胞外段酶切的机制及其在血液学中的应用
- 在流动状态高剪切力的作用下,例如在动脉血管中,血小板黏附于血管内膜依赖于血管性血友病因子(VWF)及其受体血小板膜糖蛋白复合物Ib-IX-V(GPIb-IX-V)的相互作用.已经研究证实两者的相互作用在血小板黏附、活化和...
- 戴克胜
- 一种血小板膜糖蛋白寡肽或其修饰物/衍生物以及它们的应用
- 本发明提供了一种能够影响血小板功能的寡肽R-G-S(p)-L-P或其修饰物/衍生物,以及该寡肽R-G-S(p)-L-P或其修饰物/衍生物在预防和/或治疗动脉血栓性疾病和/或其它与血小板GPIbalpha与ABP相互作用相...
- 戴克胜
- 文献传递
- 尿毒症患者血小板凋亡的研究
- 目的:通过对尿毒症患者血小板活化及凋亡的检测,探明尿毒症患者是否存在血小板凋亡现象,进一步探讨其机制.方法:收集尿毒症患者的外周静脉血,分离得到富含血小板的血浆(PRP),通过流式细胞仪检测血小板线粒体跨膜电位(△ψm)...
- 马同玲李明卢国元邓坤闫蓉戴克胜
- RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途
- 本发明公开了RIP3抑制剂在制备抗血小板血栓药物中的用途。具体而言,本发明首次通过实验探究了RIP3在止血和血栓形成过程中的作用,发现RIP3不仅在体外实验中参与血小板功能的调节,而且在体内的止血和血栓形成过程中也发挥重...
- 戴克胜
- 文献传递
- PKC抑制剂诱导血小板凋亡
- 张明逸赵丽丽陈梦醒阮长耿戴克胜
- 重力对血小板功能影响的研究
- 目的:研究重力改变对血小板生理功能的影响,并对其分子机制进行研究。方法:抽取健康志愿者静脉血,分离获得血小板。利用超低速离心机和细胞旋转培养装置(RCCS)分别对血小板进行超重(8G)和模拟微重处理。通过血小板的聚集实验...
- 戴克胜王月丹闫荣史权威元艳宏王志成程虹李素萍樊瑜波庄逢源
- 文献传递
- 血小板内蛋白激酶C活化诱导血小板发生凋亡被引量:5
- 2013年
- 蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)在血小板信号转导和粘附、聚集、释放等多种生理功能的发挥中均起到重要的作用。目前报道,PKC通过激活去整合素金属蛋白酶(ADAM)10或ADAM17诱导血小板膜表面糖蛋白受体发生酶切,对血小板活化后产生负调控作用。那么PKC活化是否可诱导血小板凋亡进而负调控血小板功能,目前还不清楚。本研究目的是探讨血小板内PKC活化对血小板凋亡的影响。取健康志愿者外周静脉血并分离血小板。选择PKC特异性激活剂和抑制剂,并设置不同的时间梯度和浓度梯度,与洗涤血小板共同孵育,应用流式细胞术和Western blot等技术,检测PKC激活剂和抑制剂对血小板线粒体膜电位(△ψm)、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)和磷脂酰丝氨酸(PS)的影响。实验结果表明,PKC激活剂呈时间依赖性诱导血小板发生△ψm去极化;PKC激活剂呈浓度依赖性地诱导血小板内caspase-3活化裂解,而PKC抑制剂则不能诱导血小板发生△ψm去极化和PS暴露的变化。结论:血小板内PKC活化后,可以通过影响线粒体功能和激活Caspase-3而诱导血小板凋亡,提示PKC可能参与调控活化血小板的凋亡过程,本研究结果对探明血小板活化的负调控功能及PKC活化相关疾病的发病机理具有意义。
- 赵丽丽陈梦醒张明逸戴克胜
- 关键词:血小板蛋白激酶C