方玉达
- 作品数：6 被引量：39H指数：4
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项国家教委资助优秀年轻教师基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 用克隆池PCR法筛选小麦-簇毛麦易位系6VS/6AL基因组TAC文库获得抗病基因候选克隆被引量：8
- 2002年
- 用根据抗病基因保守区设计的一对简并性引物 ,从小麦 簇毛麦易位系 6VS 6ALcDNA中PCR扩增获得一个具有抗病基因核苷酸结合位点 (Nucleotidebindingsite,NBS)结构特点的DNA片段克隆N7。从小麦 簇毛麦易位系6VS 6AL基因组TAC(Transformation competentartificialchromosome,TAC)文库的 2 2块 96孔板提取所有 2 112个克隆池(每个池含约 10 0 0个克隆 )的质粒 ,再根据N7的核苷酸序列设计一对特异引物 ,用克隆池PCR(pooledPCR)法经分级筛选从文库中获得一个阳性克隆。以N7为探针 ,通过Southern杂交证实了该TAC克隆为真正含有抗病候选基因的克隆。
- 秦跟基陈佩度刘耀光方玉达刘大钧
- 关键词：小麦-簇毛麦易位系抗病基因基因克隆
- 植物可转化基因组文库的发展和应用被引量：2
- 1999年
- 在基因克隆时，如应用通常的一些基因组文库如ＹＡＣ、ＢＡＣ 和ＰＡＣ 等进行目的基因的筛选，在获得候选克隆后，通常进行亚克隆，然后对每个亚克隆逐一进行基因功能互补试验，不仅工作量大，而且有遗漏的可能。近年来，对一些通常的基因组文库载体进行改建，已发展了既可用于克隆，又能直接进行转化的载体，这将大大方便大片段ＤＮＡ的转移。
- 方玉达刘大钧
- 关键词：根癌农杆菌基因组文库
- 根癌农杆菌介导的烟草、蕃茄和小麦转化及小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系可转化人工染色体(TAC)文库的构建
- 含水稻几丁质酶基因G11的质粒pAHG11经酶切鉴定发现其中GaMV35S-G11片段与pAHG11的图谱相反,因此将质粒pAHG11?命名为pAHG11(-).从pAGH11(-)中分离出G11和pUbi-bar-No...
- 方玉达
- 关键词：根癌农杆菌转基因小麦
- 小麦-簇毛麦6VS/6AL易位系可转化人工染色体(TAC)文库的构建被引量：18
- 2000年
- 可转化人工染色体 (Transformation competentArtificialChromosome ,TAC)是具有克隆和转移大片段基因能力的新型载体 ,是植物基因克隆和转化的有效工具。为了克隆小麦抗白粉病基因和其它基因 ,本研究用TAC载体 pYLTAC17构建了带有抗白粉病基因Pm2 1的小麦 簇毛麦 6VS/6AL易位系的基因组DNA文库。该文库包含2 10万个克隆 ,平均插入片段 35kb ,库容相当于普通小麦基因组的 4 9倍。本文库以约 10 0 0个克隆组成 1个混合池的方式保存在 2 2块 96孔平板 ,可用PCR方法进行文库的筛选。
- 方玉达刘耀光吴豪张群宇陈佩度刘大钧
- 关键词：可转化人工染色体基因组文库小麦基因载体
- 菊科马兰属的分支分类研究被引量：6
- 1999年
- 本文对马兰属植物１１种２变种１变型的系统发育和分类进行了分支系统学研究，结果表明马兰属可分成三组即心叶组、甘川组和马兰组，它们的演化趋势为心叶组→甘川组→马兰组．同时，本文对种间亲缘关系进行了讨论，认为多形马兰应上升为种。
- 王静方玉达张小平
- 关键词：菊科
