曹湘禹
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
- 供职机构：大连理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程理学化学工程更多>>
- 一种苯酚降解菌及其转化吲哚制备靛蓝的方法
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及利用一种野生型苯酚降解菌转化吲哚制备靛蓝的方法。其特征在于，采用一种能有效催化吲哚合成靛蓝的苯酚降解微生物菌株，它是蒙氏假单胞菌QM(Pseudomonas monteilii QM)，保...
- 曲媛媛马桥许炳雯张旭旺李新亮周豪孔春雷曹湘禹周集体沈娥
- 文献传递
- 苯酚羟化酶基因工程菌表达优化及特性研究被引量：6
- 2012年
- 利用表面响应法优化苯酚羟化酶基因工程菌(PH_IND)的生长条件(种龄、接种量)及表达条件(诱导OD600、IPTG浓度、诱导时间、诱导温度),并对其粗酶特性进行考察.实验结果表明,菌株PH_IND的最佳生长条件及表达条件为:种龄7.19h,接种量1.39%,诱导OD6000.54,IPTG浓度0.19mmol·L-1,诱导时间2.37h,诱导温度35℃,此时,苯酚羟化酶最大酶活力为0.6167U·mg-1.粗酶特性分析表明,苯酚羟化酶的最适pH和温度分别为8.0和40℃.Ba2+、Fe3+、Hg2+、Pb2+对苯酚羟化酶有明显促进作用,而Ca2+、Co2+、Cu2+、Mg2+、Mn2+对苯酚羟化酶有抑制作用.底物广谱性实验表明,苯酚羟化酶具有极强的芳香化合物降解能力.
- 曹湘禹黄益养时胜男马桥李新亮孔春雷沈娥曲媛媛
- 关键词：苯酚苯酚羟化酶
- 加氧酶在手性化合物合成中的应用研究进展被引量：1
- 2011年
- 手性化合物广泛应用于医药、农药、新材料及精细化学品合成等领域。传统的化学合成方法存在一定的局限,如对映选择性较差、耗能高、污染严重等。生物催化作为一种环境友好且高选择性的合成方法成为当代有机合成领域的研究热点。从生物催化合成机制、加氧酶的定向进化与改造、生物催化合成手性化合物的过程优化控制等方面,综述了微生物加氧酶在手性化合物合成领域的最新研究进展。
- 李新亮曲媛媛周豪王腾曹湘禹周集体
- 关键词：手性化合物加氧酶生物催化分子改造
- 活性污泥宏基因组Fosmid文库的构建被引量：3
- 2012年
- 大插入片段宏基因组文库的构建是开发大片段目的基因及分析其结构与功能的基础.文中分别采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、试剂盒及琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA,其中琼脂糖包埋法获得的DNA片段大于23kbp,利用此DNA成功构建了以pCC1FOS为载体的Fosmid文库,该文库含有5280个克隆,平均插入片段长度为35～40 kbp,共包含约200 Mbp的宏基因组DNA.从此文库中随机挑选200个克隆,利用活性筛选方法快速筛选到了1个含有淀粉酶的阳性克隆,表明活性污泥Fosmid文库可用于功能基因的活性筛选,具有开发新基因的潜力.
- 苟敏曲媛媛周集体许炳雯曹湘禹
- 关键词：活性污泥FOSMID文库活性筛选淀粉酶
- 活性污泥宏基因组DNA提取方法优化被引量：4
- 2012年
- 宏基因组DNA的成功获取是宏基因组学技术顺利开展的关键.利用溶菌酶-SDS-蛋白酶K法(LSK法)提取活性污泥宏基因组DNA,结合单因素法与表面响应法对提取过程的4个关键步骤进行条件优化,即预处理、细胞裂解、蛋白去除及DNA沉淀过程.确定影响DNA产量的重要因素:预处理缓冲溶液与DNA沉淀剂类型、CTAB质量分数、溶菌酶浓度、37℃水浴时间及SDS质量分数.确定LSK法提取宏基因组DNA的最佳条件:TENC预处理活性污泥;1.5%CTAB;0.5mg/mL溶菌酶,37℃水浴1.4h;2%SDS,200μg/mL蛋白酶,55℃水浴2.5h;异丙醇沉淀DNA 40min.在最佳条件下,活性污泥宏基因组DNA的最大产量为每g污泥170μg.本研究可为环境样品中高质量宏基因组DNA的提取提供有价值的参考.
- 苟敏曲媛媛周集体曹湘禹许炳雯王腾
- 关键词：活性污泥
- 一种苯酚降解菌及其转化吲哚制备靛蓝的方法
- 本发明属于生物工程技术领域，涉及利用一种野生型苯酚降解菌转化吲哚制备靛蓝的方法。其特征在于，采用一种能有效催化吲哚合成靛蓝的苯酚降解微生物菌株，它是蒙氏假单胞菌QM(Pseudomonas monteilii QM)，保...
- 曲媛媛马桥许炳雯张旭旺李新亮周豪孔春雷曹湘禹周集体沈娥
- 文献传递
- 苯酚羟化酶基因工程菌合成靛蓝及其同系物的特性研究
- 靛蓝作为古老色素，广泛应用于医药、印染、食品等行业。微生物法合成靛蓝因其绿色安全、高效、高选择性等特点逐渐受到人们的关注，但其工业化进程十分缓慢。因此，开发新型高效合成靛蓝的酶资源，优化其合成条件，考察其对靛蓝同系物的合...
- 曹湘禹
- 关键词：苯酚羟化酶基因工程菌吲哚靛蓝氨基酸序列
- 文献传递
