李健强
- 作品数：73 被引量：496H指数：12
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家攀登计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- IBDV超强毒HZ株VP2基因的克隆和真核表达质粒的构建被引量：4
- 2000年
- 利用反转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR) ,扩增克隆传染性法氏囊病病毒超强毒 (vv IBDV) HZ株 VP2基因 ,并对 VP2基因进行全序列测定、序列分析和聚类分析 ,同时将VP2基因与真核表达载体 pc DNA3相连接。结果克隆到 VP2基因全序列长 1 356bp,分析表明 HZ株与欧洲超强毒株 UK661高度相似 ,同时将 VP2基因正向插入 pc DNA3的 CMV启动子下游 ,得到了 VP2基因的真核表达质粒。为
- 许信刚李健强王笑梅童光志
- 关键词：超强毒株真核表达质粒传染性法氏囊病病毒VP2基因
- 胸膜肺炎放线杆菌生物学特性概述被引量：11
- 2004年
- 张耀相杨会霞李健强
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌生物学特性染色特性
- 旋毛虫ES抗原结构基因TSPG Ⅱ 重组表达质粒构建被引量：2
- 1999年
- 用限制性内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ，从克隆载体ｐＵＴＳⅡ中切出一个０．９８８ｋｂＴＳＰＧⅡ基因，经ＥｃｏＲＩ和ＢｓｔＸＩ酶切鉴定，同时表达载体也用相同的酶进行酶切，经琼脂糖凝胶电泳，分别回收ＴＳＰＧⅡ基因和ｐＳＶ·ＳＰＯＲＴⅠ表达载体，用Ｔ４ＤＮＡ连接酶定向连接，转化大肠杆菌感受态细胞，挑取重组子，经ＥｃｏＲⅠ，ＢｓｔＸⅠ和ＨｉｎｄⅢ酶切鉴定，构建了重组表达质粒ｐＳＶ·ＴＳⅡ．
- 袁慧君阎玉河张改平李健强
- 关键词：旋毛虫结构基因重组表达质粒
- 猪放线杆菌SHLI株的分离鉴定被引量：3
- 1999年
- 从某猪场病死猪肉样变肺脏和严重出血的心脏、肝脏、肾脏及肠系膜淋巴结中分离到一株革兰氏阴性球杆菌。此菌大小０３５ ～０５ ×０５ ～１５μｍ ， 单在、成双或短链状。菌落与琼脂有粘连性， 绵羊血琼脂平板上呈β溶血， 能生长于麦康凯琼脂上。发酵碳水化合物产酸不产气， 不发酵甘露醇、卫茅醇和肌醇， 能水解马粟苷和马尿酸钠， 尿酶、硝酸盐还原试验阳性， 不产生靛基质。鉴定为猪放线杆菌（ Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｉｓ） ， 并将其定名为猪放线杆菌 Ｓ Ｈ Ｌ Ｉ株。其对小鼠和仔猪有强的致病性， 对豚鼠的致病性较弱。
- 林永康李健强梁荣张耀相
- 关键词：猪放线杆菌
- 杂交瘤细胞系筛选方法Dot-ELISA的建立和应用被引量：1
- 1990年
- 自杂交瘤技术问世以来,已在生物学、医学、兽医学等领域内推广应用,并利用杂交瘤技术成功地研究和揭示了许多疑难问题。在杂交瘤的筛选中,常用的有ELISA、间接荧光抗体及放射免疫等法,本文采用Dot-ELISA法进行猪伪狂犬病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的筛选试验,经反复试验证明,它是一种杂交瘤细胞系筛选试验有用的方法。
- 李健强刘勤王晶钰张国祥王英珍
- 关键词：杂交瘤细胞系ELISA
- 猪瘟病毒基因工程疫苗研究进展被引量：7
- 1999年
- 猪瘟是一种在世界范围引起巨大经济损失的烈性传染病。在没有消灭猪瘟的国家，疫苗接种是控制其发生的主要手段。传统的猪瘟疫苗，组织苗、细胞苗发挥了重大作用。然而随着７０年代猪瘟流行病学发生变化，人们开始研制新型的猪瘟病毒基因工程疫苗。本文简要论述了以痘苗病毒、伪狂犬病毒、杆状病毒作为载体的三种猪瘟病毒基因工程疫苗的研究现状，并比较了它们的优缺点。同时介绍了我国利用分子生物学技术，以基因剪和反义ＲＮＡ为手段，开辟防治猪瘟新途径的探索。
- 蒋帅李健强
- 关键词：猪瘟病毒基因工程疫苗
- 鸡波德特氏菌病的研究被引量：6
- 1997年
- １９９５年９月在陕西咸阳首次发现鸡的波德特氏菌病。病鸡以流浆液性鼻液、眼睑肿胀、眼睛流泪及呼吸困难为特征。不同年龄的鸡均可感染，幼龄鸡的发病率和死亡率明显高于成年鸡。分离菌的２４ｈ肉汤培养物（０．２ｍＬ）感染小鼠及豚鼠可于２４ｈ内引起死亡；经鼻感染６０日龄鸡复制出了与自然病例相同的临床表现，病死率６０％，并回收到了接种菌。本文对分离的波德特氏菌的培养特性、形态特征、致病性、抗生素的敏感性、灭活苗的研制及免疫防制进行了深入研究。
- 王晶钰李健强张国祥黄金海舒黛莲
- 关键词：免疫防制
- 伪狂犬病病毒单克隆抗体的研究被引量：2
- 1992年
- 本文采用杂交瘤技术得到能分泌伪狂犬病病毒(PrV,Pseudorabies Virus)特异抗体的杂交瘤细胞。细胞融合率为98％,分泌特异抗体的杂交瘤细胞达65％,得到不同类和亚类的杂交瘤细胞系,克隆出的杂交瘤细胞系染色体数在82～109条之间。微量血清中和试验表明这些细胞系分泌的抗体为非中和性抗体。利用单抗IgG1与荧光素结合,制备出伪狂犬病病毒特异的荧光抗体,建立了伪狂犬病免疫荧光诊断法。同时,利用放射自显影和SDS-PAGE对病毒结构多肽进行了分析,表明伪狂犬病病毒主要有13种多肽成分,能被高免血清识别的有5种。
- 李健强张国祥王晶钰刘勤王英珍冯斌刘华世
- 关键词：伪狂犬病病毒单克隆抗体
- 4株猪瘟流行野毒株病毒结构蛋白E2基因的核苷酸序列分析被引量：8
- 2001年
- 应用RT PCR和nPCR扩增由 4株甘肃省近期 ( 1997— 1998)猪瘟流行野毒株的E2基因 ,将其克隆到pGEM TEasy载体上 ,经转化、筛选、鉴定后 ,测出核苷核序列。 4株流行毒株的E2基因核苷酸序列同源性为 89.2 %— 99.7% ,相应的氨基酸序列同源性为 93 .8%— 99.0 %。这 4株流行毒株 ;与C 株 (疫苗种毒 )E2基因的核苷酸序列同源性为82 .2 %— 84.3 % ,相应的氨基酸序列同源性为 87.9%— 90 .2 % ,表明近期猪瘟流行毒株与C 株的 gp5 5蛋白之间存在一定的差异。
- 李明晖刘湘涛韩雪清侯文通赵启祖马军武刘伯华刘在新李健强李忠润谢庆阁
- 关键词：猪瘟E2基因核苷酸序列分析病毒结构蛋白
- 山羊关节炎-脑炎的研究——琼扩抗原的制备与应用被引量：5
- 1991年
- 以山羊关节滑膜细胞增殖CAEV75-G63,用PEG沉淀浓缩及乙醚处理制成琼扩抗原,其与美国CAE标准阳性血清、参考阳性血清均呈阳性反应;而与马传贫、白血病、蓝舌病和布病阳性血清均无交叉反应。经SDS-PAGE和PAS糖蛋白染色分析,与美国CAE标准抗原的蛋白带相同,其主要分子量为90kd的糖蛋白。抗原制备方法简单,效价稳定,重复性好。经过136份奶山羊血清的检测,两种抗原的符合率为97.8％。
- 张国祥李健强王英珍王晶钰刘勤刘维华王新武张西粉
- 关键词：山羊关节炎脑炎抗原
