李子义
- 作品数：31 被引量：365H指数：13
- 供职机构：东北农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省杰出青年科学基金霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 家兔显微受精影响因素及显微受精胚胎超微结构被引量：13
- 1997年
- 以家兔为实验动物，利用胞质内精子注射技术和透明带下精子注射技术，对卵龄、精子获能、注射针管口径、操作室温和操作方法等影响显微受精的因素以及显微受精胚胎的超微结构进行了研究。结果显示：（１）胞质内单精子注射，ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的存活率为６９．４％，显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的存活率（４７．３％）；而受精率和卵裂率（分别为５２．９％和４１．２％）分别低于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（６５．４％）和卵裂率（４６．２％）。（２）将５～１０个在ＤＭ液中获能１２～１３ｈ的精子注入卵子的透明带下，ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（４９．２％）和卵裂率（４０．７％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的受精率（２８．６％）和卵裂率（２２．５％）。（３）以ｍＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ｍＤＭ３～４ｈ方法和ＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ＤＭ５～６ｈ方法获能的精子带下注射的受精率（分别为６３．６％和５１．０％）和卵裂率（分别为５４．５％和４３．１％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于或略高于其他方法获能的精子带下注射的受精率和卵裂率。（４）内径７μｍ的注射针管用于胞质内单精子注射，卵的存活率（６９．４％）极显著（Ｐ＜０?
- 李子义周琪邹啸环邹啸环谭景和
- 关键词：显微受精精子获能胚胎超微结构家兔
- 小鼠精原干细胞的形态结构及其细胞化学和免疫组化特性被引量：49
- 1999年
- 应用光镜、电镜观察了 ７～８ ｄ 小鼠精原干细胞的形态结构特点；应用细胞化学、免疫组织化学方法研究了体外培养小鼠精原干细胞的细胞化学和免疫组织化学特性。结果显示，精原干细胞呈圆形，直径（９±１） μｍ ，核大，呈圆形或轻微卵圆形，胞质较少；核内常染色质占绝对优势，异染色质极少；胞质内核糖体、线粒体较丰富，其他细胞器不发达；精原干细胞 Ａ Ｋ Ｐ染色呈阳性或强阳性，胞质内脂滴很少或没有；精原干细胞表达特异的 ｃｋｉｔ 受体；体外培养的小鼠精原干细胞常呈不完全的胞质分裂，细胞间由细胞间桥相连而呈链状或团状的细胞群丛，细胞群常由偶数细胞组成。
- 张学明李德雪李子义赖良学文兴豪杜惜明杨盛华岳占碰邹啸环
- 关键词：精原干细胞细胞化学免疫组织化学小鼠
- 牛体外受精胚胎细胞核移植的实验研究
- 1996年
- 将采自肉联厂屠宰车间的牛卵巢中的卵母细胞置于ＴＣＭ－１９９＋１０％ＥＣＳ（０ｄ）＋ＦＳＨ（１万ＩＵ／Ｌ）＋ＬＨ（５ｍｇ／Ｌ）中培养成熟，用含０．３％透明质酸酶的消化液将卵母细胞周围的卵丘细胞去掉，并以７．５ｍｇ／Ｌ的ＣＢ液处理后，用微吸管吸去透明带内的第一极体及极体下面的部分卵母细胞质，然后将经体外受精并发育至８～１６细胞期胚胎的卵裂球注入去核卵母细胞的卵周隙中，再将移核胚置于电融合槽内进行融合（电场强度为１２００Ｖ／ｃｍ，持续时间为８０μｓ，１次脉冲刺激）。将融合的胚胎移入生长有单层贴壁颗粒细胞的发育培养液（ＴＣＭ－１９９＋１０％牛血清）中培养，观察移核胚的融合率及发育率，部分去核卵母细胞经染色后观察去核率。结果表明：（１）移核胚的融合率为８６．９％（５３／６１）；（２）发育至２～８细胞期的胚胎占培养的移核胚胎总数的２１．３％（１０／４７）；（３）卵母细胞的去核率为６８．２％（４５／６６）。
- 李子义李德雪岳占碰安铁洙毛振宾卢圣忠刘云海韩燕清敖红朱裕鼎
- 关键词：核移植体外受精胚胎繁殖
- 小鼠精子注入兔卵母细胞受精研究被引量：7
- 1999年
- 利用显微操作仪将小鼠精子注入家兔卵母细胞的胞质内和透明带下,对鼠兔异种精卵互作和异种受精胚胎的发育进行了研究,并对注射精子的数量及卵的体外成熟时间等影响鼠兔异种显微受精的因素进行了探讨,结果如下:(1)将小鼠精子分别注入兔卵胞质内和透明带下,均能激活兔卵母细胞,导致精核解聚和原核形成;(2)小鼠精子注入兔卵胞质内和透明带下受精,杂种胚胎体外培养能发育到8-细胞期;(3)鼠兔异种受精4-细胞胚胎染色体标本制备观察结果表明,它们为正常二倍体;(4)鼠兔异种受精4-细胞胚胎的超微结构观察结果表明,它们极近似兔正常4-细胞胚胎的超微结构;(5)将小鼠精子注入兔卵透明带下,注射5—10个精子组卵的受精率(32.4%)和卵裂率(16.2%)均高于注射单个精子组的,但二组间差异不显著(P>0.05);DM+15%NCS液中体外成熟培养11—12h兔卵透明带下注入1—2个小鼠精子后的受精率(42.3%)和卵裂率(30.8%)均高于体外成熟培养24—25h组的,但二组间差异未达到显著水平(P>0.05)。
- 李子义谭景和周琪孙兴参李光鹏刘忠华
- 关键词：哺乳动物受精小鼠精子
- 促性腺激素释放激素对兔雌性生殖系统发育的影响被引量：3
- 2000年
- 将 2 1只处于间情期的雌兔 ,随机分成试验组和对照组 ,试验组每只肌注 1 m L( 1 5μg)促性腺激素释放激素 ,然后分 7个阶段取材观察卵巢和子宫的形态学变化。结果表明 ,注射促性腺激素释放激素可促进兔卵泡发育、成熟及排卵 ,加速黄体形成 。
- 杜惜明文兴豪李子义张学明岳占碰甄英凯万忠海
- 关键词：促性腺激素释放激素卵巢子宫
- 昆明小鼠早期胚胎发育时程被引量：18
- 1999年
- 以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84.2% 的超排小鼠形成阴道栓;(2)大部分小鼠(66% ～100% )排卵从hCG后第1 天2:00(hCG 后11 h)开始,至3:00～4:00(hCG后12～13 h)结束;(3)从hCG 后第1 天7:00(hCG后16 h)至11:00(hCG 后20 h),小鼠卵受精率为5.6% ～82.4% ;(4)从hCG后第1 天7:00(hCG 后16 h)至11:00(hCG 后20 h),原核形成率为4.4% ～67.5% ;(5)从hCG 后第1 天21:00(hCG 后30 h)至第2 天1:00(hCG后34 h),2-细胞形成率为14.9% ～83.1% ;hCG后第2 天19:00(hCG后52 h)至23:00(hCG后56 h),4-细胞形成率为12.9% ～85.7% ;hCG 后第3 天6:00(hCG后63 h)至10:00(hCG 后67 h),8-细胞形率为12.8% ～88.2% ;(6)从hCG 后第3 天10:00(hCG 后67 h)至24:00(hCG后81 h),8～16 细胞(早期桑葚胚)形成率由100% 下降到42.9% ;从hCG 后第3 天24:00(hCG 后81 h)至第4 天4:00(hCG后85 h),17～32 细胞(晚期桑葚胚)形成率由57.1% 增加到90.0% ;(7)从hCG 后第4 天6:00(hCG后87 h)至8:00(hCG后89 h),囊胚形成率从11.4% 上升到60.9% 。
- 李子义谭景和孙兴参刘忠华李光鹏周琪贺桂馨
- 关键词：早期胚胎小鼠胚胎发育
- 家兔卵母细胞及早期胚胎发育的微细结构研究被引量：3
- 1998年
- 用ＰＭＳＧ和ｈＣＧ对家兔进行超数排卵，用手术方法获取卵母细胞和不同发育时期的胚胎，通过光镜、透射和扫描电镜观察了家兔卵母细胞及胚胎的形态结构并研究了胚胎的体外培养方法。主要结果如下：１．兔１６－细胞胚的表面微绒毛没有极化表现而部分桑椹胚的卵裂球微绒毛已分区，发生极化。２．成熟卵及胚胎中的线粒体不同；成熟卵中为少嵴、染色深的不活跃线粒体，而随胚胎发育线粒体逐渐变为成熟活跃型的。３．皮质颗粒在卵母细胞成熟时数量达到最多。４．在成熟卵母细胞中，高尔基复合体数量较少，随胚胎发育其在核的附近数量增多。５．微绒毛在未成熟卵表面较多，卵母细胞成熟后变得疏而粗。６．进行家兔胚胎体外培养时，１９９培养液的培养效果好于ＤＭ液。
- 周琪谭景和李子义孙兴参刘忠华贺桂馨刘英举邹啸环文兴豪李德雪
- 关键词：卵母细胞胚胎超微结构家兔
- 海狸鼠消化管显微及亚显微结构被引量：2
- 1999年
- 应用光镜、电镜和组织化学技术，对 １０ 只成年海狸鼠消化管的食管、胃底、小肠和大肠壁的显微和亚显微结构进行了研究。结果显示，在 Ｈ Ｅ 染色，海狸鼠食管粘膜上皮细胞角化程度较高，胃底腺壁细胞的数量几乎与主细胞的相等或稍多，小肠肠腺底部含有大量潘氏细胞； Ｓｃｈｉｆｆ 氏染色，胃粘膜的上皮细胞、胃底腺的颈粘液细胞、十二指肠腺的粘液细胞、肠腺的潘氏细胞和杯状细胞均为阳性； Ｍ ａｓｓｏｎｆｏｎｔａｎａ 氨银法染色，在胃底腺和肠腺内均见有银亲合细胞。扫描电镜下，胃粘膜表面见有较多胃小凹，小肠上皮细胞的微绒毛形成许多指状突起。透射电镜观察，胃底部壁细胞中线粒体、滑面内质网、细胞内小管发达，小肠上皮细胞的微绒毛密集排列，细胞间见有连接复合体结构，胃底腺和肠腺内见有散在分布的内分泌细胞。
- 沈萍文兴豪董淑珍李子义陈泰龙
- 关键词：消化管显微结构亚显微结构海狸鼠
- 全文增补中
- 小鼠胚胎成纤维细胞的分离和饲养层细胞的制备被引量：23
- 1999年
- 通过实验确定分离小鼠胚胎成纤维细胞的最适胚龄，探讨小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的效果及其寿命。结果表明，从１０ 、１１ ｄ 小鼠胚胎所获的胚胎成纤维细胞中混有大量神经母细胞和红细胞；用１４ 、１５ ｄ 的胚胎则基本不能获得胚胎成纤维细胞；消化３ ～４ 个１２ ～１３ ｄ 胚胎所获细胞悬液可接种８～９ 个２５ ｃｍ２ 的培养瓶。从一只孕鼠的所有胚胎所获的成纤维细胞可接种约２０ 个２５ ｃｍ２ 的培养瓶。所获细胞悬液的活细胞百分率可达９０％ ，接种成活率达８５ ％ 。胚胎成纤维细胞贴壁时间为５～６ ｈ ，１２ ｈ 后进入增殖期，４８ ｈ 形成细胞单层。ＥＳ细胞克隆在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上形态典型、增殖迅速、不分化。饲养层寿命可维持２ ～３ 周。
- 张学明李德雪赖良学李子义文兴豪杜惜明曾发贵
- 关键词：胚胎成纤维细胞饲养层小鼠
- 家兔胚胎细胞核移植与连续移植
- 1999年
- 将发育不同时期的兔胚和移核胚的卵裂球细胞核与去核的成熟卵母细胞共同组成移核胚，通过中间受体培养和移植实验检验胚胎的发育能力。结果表明，（１）兔囊胚之前各个时期的胚胎细胞核均可使移核胚发育到囊胚；（２）胚胎极化前后的卵裂球参与组成的移核胚发育到囊胚的比例无显著差异。但极化后 ６４细胞胚的卵裂球与去核卵母细胞的融合率低于极化前的 ８细胞胚胎卵裂球；（３）兔 １６细胞胚与去核的卵母细胞组成的移核胚可以发育到期，产仔率为 ３．１６％ ；（４）兔移核胚卵裂球用于连续核移植，其后 ２ 代均可发育成囊胚，其中第 １ 代移核胚与第 ２ 代移核胚发育率相似，但显著高于第 ３ 代移核胚；（５）兔移核胚和各代连续移核胚卵裂球与去核卵的融合率无显著差异。
- 周琪李子义谭景和文兴豪孙兴参刘忠华贺桂馨李德雪
- 关键词：家兔胚胎细胞核移植极化
