李建林
- 作品数：155 被引量：634H指数：14
- 供职机构：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家现代农业产业技术体系建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 与建鲤剩余采食量关联的SNP分子标记及其应用
- 本发明涉及水产动物育种技术领域，具体涉及与建鲤剩余采食量关联的SNP分子标记及其应用。本发明提供了与建鲤剩余采食量关联的SNP分子标记、引物组、试剂盒，所述SNP分子标记、引物组、试剂盒用于低剩余采食量建鲤优良品种的早期...
- 唐永凯许元峰王文倩魏佳冯文荣李建林苏胜彦
- 一种鉴别奥利亚罗非鱼、尼罗罗非鱼及其杂交鱼的方法
- 本发明公布了一种鉴别奥利亚罗非鱼、尼罗罗非鱼及其杂交鱼的方法，包括以下步骤：（1）采集待鉴别的罗非鱼样品，提取基因组DNA；（2）用步骤（1）获得的基因组DNA为模板，进行PCR扩增；（3）对步骤（2）的PCR扩增产物进...
- 李建林俞菊华唐永凯李红霞徐跑
- 一种河蟹离体孵化装置
- 本实用新型涉及一种河蟹离体孵化装置，包括离体孵化缸，所述离体孵化缸内部的顶端设置有第一过滤棉安装槽，离体孵化缸内部的底端设置有第二过滤棉安装槽，第一过滤棉安装槽和第二过滤棉安装槽的中部均设置有过滤板，过滤板的顶端设置有过...
- 唐永凯苏胜彦王美垚李建林李红霞宋长友于凡徐跑
- 文献传递
- 鲤鱼PLA2g3a1催化活性区的原核表达及酶活性分析被引量：4
- 2020年
- [目的]本文旨在获得可溶的鲤鱼(Cyprinus carpio)groupⅢ分泌型磷脂酶A 2(PLA2g3a1)催化活性区(PLA 2 bee venom like region,PBVR)原核重组蛋白,并测定该蛋白的磷脂酶活性。[方法]分别构建标签蛋白小分子泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)、硫氧还原蛋白(thioredoxin A,TrxA)、N利用物质A(N-utilization substance A,NusA)、麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)与PBVR的重组表达质粒,转化入大肠杆菌感受态细胞Transetta(DE3)进行原核表达,比较不同标签蛋白的促溶作用;使用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,与BSA蛋白标准品电泳比对确定纯化后蛋白的浓度;采用偶联氧脂合酶法测定PBVR重组蛋白的磷脂酶活性。[结果]促溶作用最高的标签蛋白是NusA,可溶性重组蛋白占总蛋白的95%,其次是MBP和TrxA,分别占87%和47%。综合考量可溶性重组蛋白的得率,选择MBP融合蛋白。重组原核表达蛋白MBP-PBVR的磷脂酶比活力[(13.68±0.12)U·μmol-1]显著高于TrxA-PBVR[(0.94±0.01)U·μmol^-1]和NusA-PBVR[(0.93±0.04)U·μmol^-1](P<0.05)。MBP-PBVR酶促反应最适pH值为7.5,在鲤鱼适宜生长温度(20~30℃)内酶活性无差异,微量Ca^2+即能显著提高MBP-PBVR的磷脂酶活性,K d为0.0153 mmol·L^-1;MBP-PBVR磷脂酶的米氏方程参数V m为2.2μmol·L^-1·min^-1,K m为31.9μmol·L^-1。[结论]获得了可溶的具有磷脂酶活性的原核重组表达蛋白PBVR,揭示了MBP-PBVR磷脂酶活性特征。
- 王钦李建林唐永凯李红霞张磊沈泽恩俞菊华
- 关键词：鲤鱼原核表达
- 一种测量鱼类行为的装置及方法
- 本发明公开了一种用于测量鱼类行为的装置及方法，包括适应池、测量池、洄游槽、饲喂系统和记录系统，适应池的深度大于或等于60cm；适应池设有过鱼口，过鱼口的下端与适应池底部之间的竖直距离大于或等于40cm。过鱼口设有活动连接...
- 唐永凯苏胜彦董平廖愚李建林冯文荣
- 微卫星标记鉴定鲫鱼倍性的方法及其应用
- 本发明公开了微卫星标记鉴定鲫鱼倍性的方法，所述方法包括以下步骤：(1)开发微卫星序列，设计、筛选引物；(2)采集鲫鱼尾部鳍条，提取基因组DNA；(3)以鳍条基因组DNA为模板进行PCR扩增；(4)将步骤(3)获得的PCR...
- 唐永凯王美垚李建林刘凯李红霞于凡俞菊华
- 罗非鱼胰蛋白酶ⅠmRNA克隆与分析被引量：4
- 2006年
- 应用3′/5-′RACE方法对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和奥利亚(Oreochromis aureus)罗非鱼胰蛋白酶ⅠmR-NA进行了克隆和测序,序列分析表明,尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼胰蛋白酶ⅠmRNA序列全长分别为863bp和858bp,序列中均含有738个核苷酸组成的开放阅读框,编码长度为245个氨基酸残基的胰蛋白酶Ⅰ。胰蛋白酶Ⅰ氨基末端均存在信号肽和激活肽序列,序列中均具有与催化活性必须的高度保守的催化三联体氨基酸残基(His、Asp、Ser)和构成二硫键的12个半胱氨酸残基,以及决定底物特异性的保守性氨基酸残基即天冬氨酸残基和S1结合袋。南极鱼(Patanotothenia magellanica)、大西洋鲑(Salmo salar)、日本鲽(Paralichthys olivaceus)、大西洋鳕(Gadusmorhua)、牛和人类胰蛋白酶mRNA序列以及氨基酸序列与奥利亚罗非鱼相比较同源性分别为58.3%—72.5%和63.3%—76.1%,与尼罗罗非鱼相比较同源性分别为59.1%—73.1%和63.6%—75.6%。奥利亚罗非鱼和尼罗罗非鱼胰蛋白酶mRNA序列以及氨基酸序列同源性分别为96.2%和99.2%。
- 黎军胜李建林吴婷婷
- 关键词：罗非鱼胰蛋白酶CDNA克隆
- 黄鳝P-450芳香化酶基因的克隆及序列分析被引量：8
- 2005年
- P-450芳香化酶(P450arom)是催化雄激素生物合成雌激素的关键酶。本文采用RT-PCR和RACE(Rapid amplifi- cation of cDNA ends)法,首次分离和克隆了雌雄同体鱼黄鳝卵巢中P450 arom基因。该基因cDNA全长1802bp(不包 括poly(A)),5'端非翻译区有49bp,3'端202bp(不包含poly(A)),阅读框(Open reading frame,ORF)1551bp,翻译成517 个氨基酸,计算的蛋白质分子量58．2kDa。同源性分析显示,黄鳝卵巢P450arom的氨基酸序列与其他鱼卵巢 P450arom具有63％-80％同源性,与其他鱼脑P450arom为58％-60％同源,与人胚盘和鸡卵巢P450arom则为 50％-52％同源;但在芳香化酶高保守区(包括1-螺旋区,芳香化酶特异保守区和血红素结合区)的同源性高达 76％-92％。系统发育分析表明芳香化酶基因是单起源,黄鳝卵巢芳香化酶基因与鳉鱼卵巢的关系最近,与鱼类卵 巢P450arom属于同一分支的,与鱼类脑及鸡和人的属于不同分支。
- 俞菊华吴婷婷李建林曹丽萍夏德全
- 关键词：黄鳝系统发育关系
- 一种鲷鱼种质鉴定的方法及其应用
- 本发明公开了一种鲷鱼种质鉴定的方法及其应用，先后采用两对特异性引物进行扩增，并结合酶切的方法鉴别真鲷、黑鲷及二者的正反交后代。本发明所述方法能够在分子水平快速、准确的鉴定鲷鱼的种质；且能够清楚鉴别真鲷、黑鲷及二者正反交后...
- 李建林徐跑张志勇俞菊华李红霞唐永凯张志伟于凡
- 文献传递
- 建鲤GAPDH基因含内含子的部分序列的克隆方法及其realtimePCR方法
- 本发明通过克隆建鲤GAPDH含内含子的部分序列，然后设计跨越内含子的引物，优化扩增反应条件，来消除DNA的污染，从而提高扩增效率。这样，可为GAPDH作为内参基因，在利用realtimePCR对建鲤功能基因的研究中提供有...
- 唐永凯李建林俞菊华李红霞董在杰
