李欣贤
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划中德国际合作项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 2010—2011年猪场中猪源新型甲型流感病毒流行情况调查被引量：1
- 2013年
- 为深入了解猪源新型甲型流感病毒的流行情况,本研究对山东省9个地市40个猪场进行了猪源新型甲型流感病毒的感染情况调查。在养猪场采集有流感症状猪的血液样品(263份)和鼻咽拭子(235份),分别用HI试验来检测血清抗体滴度和荧光定量PCR技术检测鼻咽拭子中的流感病毒的含量。结果表明,血清阳性率为23.07%～63.33%,总阳性率为41.6%;荧光定量PCR检测鼻咽拭子阳性率为10.0%～64.28%,总阳性率为30.63%。这为了解山东省猪源新型甲型流感病毒的发生和分布,并采取相应的公共卫生措施提供了依据。
- 张红娜柴同杰李欣王浩孙玲玉李欣贤
- 关键词：血清鼻咽拭子荧光定量PCR
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒糖基化囊膜蛋白5原核表达载体的构建及免疫原性分析被引量：1
- 2014年
- 为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号肽和跨膜功能区的2段基因片段。利用酶切位点,将2段基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组表达质粒pET28a-GP5。将重组质粒导入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得表达。经Western blotting鉴定,重组蛋白可被PRRSV阳性血清识别。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法检测,小鼠能产生针对蛋白的血清抗体。因此,该重组PRRSV GP5蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究GP5蛋白的结构和功能奠定基础。
- 李欣贤张晓丹刘晶晶苗增民张涛涛柴同杰
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒WESTERNBLOTTING
- 产气荚膜梭菌ε毒素蛋白高效表达体系的构建及其免疫保护性的研究被引量：3
- 2012年
- ε毒素是由B和D型产气荚膜梭菌产生的,能够引起牛、羊肠毒血症,给畜牧业造成巨大的经济损失。本试验将ε毒素基因片段(972bp)以正确的阅读框架定向连接到pET-28a(+)质粒上,然后将重组质粒导入受体菌株,成功构建重组菌株BL21(DE3)。SDS-PAGE和Western blotting检测结果表明,重组的菌株BL21(DE3)能以包涵体的形式高效表达ε毒素(占菌体总蛋白的32.83%)。在此基础上,用有效剂量0.2mg包涵体粗提物免疫家兔,抗血清间接ELISA检测结果显示,在第4周抗体效价达到最高值为8.7log2。因此,在本研究中构建的重组菌株BL21(DE3)能高效表达ε毒素,而且该毒素具有较高的免疫保护性。
- 卢田粉柴同杰孙玲玉李欣贤郝海玉吕长辉杨延伟
- 关键词：产气荚膜梭菌免疫保护性
- PRRSV GP5重组蛋白的构建及其抗血清的制备和中和效果的检测
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)，是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的，主要以母猪发热、厌食、流产、早产及木乃伊胎等，仔猪和生长猪以呼吸系统疾病和高死亡率为特征的接触性传染病。该病传染性强，感染后导致机体的免疫抑...
- 李欣贤
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒抗血清制备
- 文献传递
- 我国水禽产业发展的现状、问题及建议措施
- 随着我国水禽饲养规模的膨胀发展，水禽业对生态环境的污染、耕用土地占用和人类的健康已开始造成严重威胁。受人口密度、载禽(畜)量、环境污染等因素的影响，水禽场自身的生物安全、人禽(畜)共患病与水禽产业发展之间的矛盾日益突出。...
- 李欣贤
- 关键词：水禽产业经营绩效饲养技术生态环境
- 新型猪源H1N1流感病毒的分离鉴定及在实验条件下气源性传播的特点被引量：4
- 2013年
- 新型猪源性H1N1流感病毒能引起人和猪的呼吸道传染性疾病,自2009年4月起在全球范围内暴发,引起广泛的关注和研究,本试验拟对其分离株的气源性传播特点进行研究。2011年1月,华东某地区出现流感疫情,本研究从病死猪的鼻腔棉拭子和肺脏中分离到1株新型猪源性H1N1流感病毒A/swine/Shandong/07/2011;用荧光定量PCR方法检测发病猪场舍内、外的空气样品中病毒含量;建立气溶胶传染模型来分析该株病毒在实验条件下气源性传播的特点。结果显示:猪舍内空气样品的阳性率为26.10%,病毒含量在3.14～5.72log10copies.m-3空气之间;舍外下风向10m处空气样品的阳性率为40.70%,病毒含量在2.24～3.77log10copies.m-3空气之间;在传染模型中,A/swine/Shandong/07/2011能够造成气溶胶感染组试验猪的感染,但感染率比直接接触组低。研究表明,A/swine/Shandong/07/2011株具有形成病毒气溶胶的能力,在实验条件下能够引起气源性感染。
- 李欣张红娜李欣贤李晓霞侯佩强夏咸柱苗增民柴同杰
- 关键词：荧光定量PCR
