李舜尧
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院生物学系更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区高等学校科学研究项目内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 胎鼠心肌与肝脏细胞的体外生长特性
- 2008年
- 用M199和DMEM两种培养液分别培养取自14-16日龄胎鼠的心肌、肝脏组织细胞.通过观察细胞生长情况、进行细胞计数和绘制细胞生长曲线，对不同组织细胞的生长特性进行了比较.结果表明：在相同的体外培养条件下，胎鼠心肌细胞的整体长势良好，贴壁情况和增殖速度都较佳，有望成为胚胎干细胞饲养层的首选材料.
- 李舜尧
- 关键词：细胞培养细胞增殖
- 抗人DR5多克隆抗体的制备与纯化被引量：2
- 2008年
- 目的:分离纯化融合蛋白GST-eDR5,免疫小鼠制备抗人DR5多克隆抗体。方法:用GST纯化试剂盒和电泳两次纯化的融合蛋白GST-eDR5免疫小鼠,制备抗GST-eDR5抗血清,然后用GST纯化得到抗人DR5抗血清。通过Western blot、ELISA方法鉴定抗血清特异性和效价。结果:通过亲和纯化得到了高纯度的融合蛋白GST-eDR5,其浓度为0.65μg/μl。免疫产生的DR5抗血清特异性高,且效价高达1∶25600,纯化后的抗人DR5抗血清不再识别GST,只识别人DR5。结论:成功制备了高特异性、高效价的抗人DR5多克隆抗体,为深入研究其对肿瘤细胞的生长抑制和凋亡作用提供了实验工具。
- 邢万金包晓红李舜尧杨倩畅飞
- 关键词：GST融合蛋白蛋白纯化多克隆抗体
- 大鼠RVLG cDNA的克隆、原核表达和小鼠抗RVLG蛋白多克隆抗体的制备被引量：10
- 2008年
- 为了识别大鼠卵巢中的生殖细胞,在原核系统中表达和纯化RVLG蛋白并制备了多克隆抗体。采用RT-PCR方法从大鼠睾丸组织中扩增获得RVLG cDNA片段,然后克隆到pMD19-T载体上进行测序,经双酶切回收目的基因片段后,将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。纯化后的GST-RVLG融合蛋白免疫昆明(KM)小鼠,最后给小鼠腹腔注射S180细胞制备抗RVLG腹水多克隆抗体。用Western blotting及免疫组织化学法鉴定RVLG腹水多克隆抗体的特异性,间接ELISA法测定该抗体的效价。序列分析表明,所克隆的RVLG cDNA片段比GenBank中报道的大鼠RVLG cDNA(NM_001077647)多60 bp,原因是由于RVLG的可变剪切方式造成的。本研究成功构建了重组表达质粒pGEX-RVLG,且GST-RVLG融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,表达的目的蛋白占菌体总蛋白的10%以上。制备的抗体可特异性识别RVLG蛋白,其效价达1:20 000。获得的高效价、高特异性的小鼠抗RVLG蛋白腹水多克隆抗体为下阶段研究RVLG的特异性表达奠定了基础。
- 张平邢万金包晓红刘志达王连庆李舜尧乌日嘠
- 关键词：原核表达多克隆抗体
