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质粒介导16S rRNA甲基化酶肺炎克雷伯菌临床分离株的检测及分子流行病学研究被引量：3: 2009年; 目的调查16SrRNA甲基化酶在肺炎克雷伯菌临床分离株中的流行情况。方法收集我院2006年1月至2007年9月从临床标本中分离的肺炎克雷伯菌337株，所有菌株均为非重复株。菌种鉴定采用全自动微生物分析仪，庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的药敏试验采用琼脂稀释法。超广谱B内酰胺酶（ESBLs）检测采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）规定的纸片确证法。使用PCR检测16SrRNA甲基化酶基因、整合酶基因和ESBL基因。接合试验检测质粒的可转移性；脉冲场电泳分析菌株的同源性。结果337株肺炎克雷伯菌对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率分别为19．0％（64／337）、8．3％（28／337）和16．3％（55／337）。21株16SrRNA甲基化酶基因阳性，阳性率为6．2％（21／337），其中13株rmtB阳性、3株armA阳性、5株rmtB和armA同时阳性。所有16SrRNA甲基化酶基因阳性株对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星同时耐药且都为高度耐药（MICs≥256彬L），21株甲基化酶基因阳性株有19株产ESBLs，ESBL基因主要为CTX-M-14-like、CTX-M-15-like和SHV．12-like。21株均为Ⅰ类整合酶基因阳性。13株通过接合试验把质粒传递给受体菌E．coliJ53。所有接合子Ⅰ类整合酶基因阳性、blaTEM-1基因阳性、产ESBLs及对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星和复方磺胺甲略唑耐药，对其他抗菌药物敏感。接合子ESBL基因型与供菌一致。21株16SrRNA甲基化酶基因阳性株经脉冲场凝胶电泳（PFGE）分成14个基因型，主要为A型和I型。结论armA和rmtB型16SrRNA甲基化酶基因已经在肺炎克雷伯菌中播散，既可通过克隆株播散也可通过接合性质粒在不同菌株间播散。; 余方友陈婵杜卫良李国安张雪青陈增强陈坚王良兴朱涛瞿涤; 关键词：甲基转移酶类

肺炎克雷伯菌临床分离株aae（6′）-Ib-cr基因的检测被引量：4: 2008年; 目的调查肺炎克雷伯菌临床分离株aac（6′）-Ib—cr基因存在情况。方法收集2006年1月至2007年9月从临床分离的337株非重复的肺炎克雷伯菌。挑选64株对庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素任何一种耐药的肺炎克雷伯菌临床分离株进行aac（6′）-Ib-cr基因检测，采用PCR法检测aac（6′）-Ib和Ⅰ类整合酶基因（intll），通过DNA直接测序确定aac（6′）-Ib-cr。抗生素MIC值测定采用琼脂稀释法。ESBLs检测采用双纸片扩散法，通过接合试验检测质粒是否可以发生转移。结果337株肺炎克雷伯菌临床分离株中，对庆大霉素、阿米卡星和妥布霉素的耐药率分别为19．0％（64／337）、8，3％（28／337）和16．3％（55／337）。共有24株细菌经PCR证实aac（6′）-Ib基因阳性，经测序证实全部为aac（6′）-Ib-cr基因，阳性率为37．5％（24／64）。24株aac（6′）-Ib-cr基因阳性株中，有13株对环丙沙星耐药（MIC≥2mg／L）和11株环丙沙星敏感（MIC≤0．25—1．0mg／L）。aac（6′）-Ib-cr基因在环丙沙星耐药菌株和环丙沙星敏感菌株中的检出率分别为54．2％（13／24）和27．5％（11／40），经χ^2检验，差异具有统计学意义（χ^2=11，056，P〈0．01）。24株aac（6′）-Ib-cr基因阳性株中，ESBLs和intll基因的阳性率分别为79．2％（19／24）和91．7％（22／24）。13株aac（6′）-Ib—cr基因阳性菌株的质粒成功转移至受体菌，以受体菌质粒DNA为模板进行aac（6′）-Ib-cr检测，13株受体菌质粒全部为aac（6′）-Ib-cr基因和intl基因阳性，全部为ESBLs阳性株。结论aac（6′）-Ib-cr基因广泛存在于肺炎克雷伯菌临床分离株中，aac（6′）-Ib-cr可能通过Ⅰ类整合子和ESBL基因同时位于可转移的质粒上造成传播。; 余方友杜卫良李国安李美兰张雪青石亮陈增强; 关键词：克雷伯菌 Β内酰胺酶类整合子类

质粒介导16SrRNA甲基化酶在奇异变形杆菌临床分离株的流行情况研究: 2009年; 到目前为止，在革兰阴性杆菌中已发现ArmA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA6种16SrRNA甲基化酶，且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶（ESBL）基因共处一个质粒上，通过质粒在不同的菌株之间播散。; 杜卫良余方友陈坚张雪青姚丹朱涛瞿涤王良兴; 关键词：甲基化酶质粒介导奇异变形杆菌临床分离株革兰阴性杆菌

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杜卫良

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