杜露平
- 作品数：42 被引量：35H指数：4
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪CD205分子CysR-FN Ⅱ蛋白特异性纳米抗体的筛选与鉴定研究
- 2024年
- [目的]猪CD205分子作为猪树突状细胞(DC)特异性的抗原提呈受体,在抗原提呈过程中起关键作用。本研究通过噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行筛选以获得其特异性的纳米抗体,为猪CD205靶向抗原提呈研究奠定基础。[方法]利用前期制备的猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行羊驼免疫,经6次皮下免疫后采集羊驼外周血淋巴细胞,提取总RNA后反转录获得cDNA,经PCR扩增编码纳米抗体的基因片段,构建猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白噬菌体展示纳米抗体基因文库,再运用噬菌体展示技术针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白进行亲和筛选,随机挑选单克隆菌落并使用Phage-ELISA方法鉴定出针对猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白的特异性纳米抗体。[结果]4轮亲和筛选后,通过Phage-ELISA方法鉴定和序列比对分析,共成功获得12个猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白特异性纳米抗体,其相对分子质量约为17×10^(3)。[结论]本研究成功筛选并获得猪CD205分子CysR-FNⅡ蛋白特异性的纳米抗体。
- 孙鑫杨利郭东辉马旭东马旭东杜露平陈瑾侯立婷郑其升陈瑾
- 关键词：噬菌体展示
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的LAMP检测试剂盒
- 本发明涉及一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的LAMP检测试剂盒属于生物技术领域。该试剂盒包含如下4条引物，所述引物的碱基序列分别如SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4所示；利用...
- 李彬何孔旺杜露平温立斌倪艳秀张雪寒郭容利冯志新
- 文献传递
- CVC1302通过小鼠骨髓源树突状细胞对免疫反应的调控被引量：1
- 2023年
- 为获得C57BL/6小鼠骨髓源树突状细胞(DC)的体外制备方法并探讨免疫增强剂CVC1302对DC免疫调控的影响,取8周龄的C57BL/6小鼠骨髓细胞,在体外经过重组鼠源粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(Recombinant mouse granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, rm GM-CSF)诱导分化为DC。诱导当天与诱导第3 d、第7 d时,用倒置显微镜观察细胞形态;诱导第7 d时,收获细胞,鉴定表型。利用流式细胞术评价CVC1302对DC表面分子表达水平的影响,用超高分辨率显微镜评价CVC1302对DC递呈抗原的影响,采用流式细胞术检测T淋巴细胞的活化数量,利用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)方法检测T淋巴细胞活化后干扰素γ(IFN-γ)的分泌水平。结果表明,体外诱导的DC在显微镜下具有非常典型的树突状细胞形态,流式细胞术检测结果表明,经典的1型树突状细胞(Conventional type 1 dendritic cell, cDC1)和经典的2型树突状细胞(Conventional type 2 dendritic cell, cDC2)亚群均可检测到。CVC1302能够显著促进DC表面分子活化并且增强DC对鸡卵清白蛋白(OVA)抗原的递呈;CVC1302能够显著活化T淋巴细胞并且提高T淋巴细胞活化后IFN-γ的分泌水平。本研究利用rm GM-CSF成功在体外刺激诱导DC的产生,并证实了CVC1302在体外同样具有促进DC成熟、DC对OVA抗原的递呈及T淋巴细胞活化的能力。
- 侯立婷于晓明于晓明张元鹏杜露平陈瑾张元鹏侯继波
- 关键词：C57BL/6小鼠树突状细胞抗原递呈T淋巴细胞活化
- 中国大陆欧洲型PRRSVN蛋白的遗传变异分析
- 引言/目的 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征...
- 李彬刘彦玲杜露平何孔旺温立斌
- 一种口蹄疫免疫增强剂、制备及其应用
- 本发明提供一种口蹄疫免疫增强剂，所述口蹄疫免疫增强剂是将黄芪多糖、磷酸三苯酯、透明质酸和胞壁酰二肽依次溶解于溶剂后得到的，所述免疫增强剂中胞壁酰二肽的浓度为80‑220μg/mL，磷酸三苯酯的浓度为20‑60mg/mL，...
- 陈瑾郑其升侯立婷于晓明张元鹏杜露平王义伟乔绪稳侯继波
- 文献传递
- 猪Hokovirus环介导等温扩增检测方法的建立及应用
- <正>猪Hokovirus(porcine Hokovirus,PHoV)自2008年被发现以来,在世界多个国家都检测到其对猪群的感染[1-4],对养猪业存在潜在的威胁。PHoV属于猪细小病毒,其与牛Hokovirus(...
- 李彬杜露平孙冰倪艳秀温立斌张雪寒何孔旺
- 文献传递
- 一种猪流行性腹泻病毒变异株N基因全序列的扩增方法
- 本发明提供了一种猪流行性腹泻病毒变异株N基因全序列的扩增方法，包括如下具体步骤：1.提取猪流行性腹泻病毒变异株RNA；2.依据猪流行性腹泻病毒变异株的N基因全序列设计引物，并用RT-PCR的方法扩增猪流行性腹泻病毒变异株...
- 李彬孙冰何孔旺郭容利杜露平倪艳秀温立斌俞正玉张雪寒茅爱华吕立新胡屹屹周俊明王小敏祝昊丹于洋
- 文献传递
- 猪博卡病毒VP2基因的克隆与原核表达被引量：8
- 2013年
- 为研究猪博卡病毒VP2蛋白的功能及其在疫病诊断中的作用,对其基因进行了克隆和原核表达。根据猪博卡病毒基因组序列(GenBank登录号GU902967-GU902971)设计了1对引物,采用PCR方法扩增猪博卡病毒的VP2基因,并将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建重组质粒pET32a-VP2,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞BL21(DE3),并进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌可表达分子量为49 000的融合蛋白,蛋白质表达量较高,且以可溶性形式存在于菌体中。表达产物经纯化后,目的蛋白纯度较好。Western blot结果显示,表达的VP2蛋白能与His抗体发生特异性免疫反应。说明该试验成功克隆了猪博卡病毒的VP2基因并进行了原核表达,为研究该蛋白的功能及建立血清学诊断方法奠定了基础。
- 李彬杜露平何孔旺温立斌茅爱华张雪寒倪艳秀郭容利王小敏周俊明吕立新俞正玉胡屹屹于洋
- 关键词：VP2克隆原核表达
- 包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的制备及佐剂活性
- 2024年
- 重组CTA1-DD蛋白具有与完整CT分子相当的全身性和黏膜佐剂功能,但在复杂的生理环境中易被酶或酸降解。本研究以同样具有佐剂活性的O-羧甲基壳聚糖(OCS)和硫酸葡聚糖(DS)为载体,通过离子交联形成纳米颗粒,将CTA1-DD蛋白嵌入其中,使其得到稳定保护。包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的粒径为50~150 nm,Zeta电位约-50 mV,质量浓度1.0 mg/ml的CTA1-DD蛋白投入制备的包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒载药率25.33%,包封率86.56%。体外模拟释放试验结果显示CTA1-DD蛋白可在7 d内缓慢释放。将CTA1-DD蛋白与PRV灭活抗原混合后,接种至小鼠鼻腔,结果表明,包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒能够同时诱导更高的血清IgG抗体和黏膜IgA抗体表达,证明了其作为黏膜佐剂的高效性。
- 秦竹陈瑾陈瑾乔绪稳侯立婷杨利乔绪稳于晓明李兰郑其升
- 关键词：硫酸葡聚糖
- 一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种Toll样受体7激动剂纳米颗粒，它是以硫辛酸与胺杂环化合物为原料先制成硫辛酸纳米颗粒，硫辛酸纳米颗粒再与结构如式Ⅰ所示的TLR7激动剂反应制得TLR7激动剂‑硫辛酸纳米颗粒。本发明TLR7激动剂‑硫辛酸纳...
- 秦竹郑其升史海健陈瑾张元鹏侯立婷于晓明乔续稳杜露平李兰侯继波
