杨明辉
- 作品数:171 被引量:477H指数:11
- 供职机构:川北医学院临床医学系风湿免疫研究所更多>>
- 发文基金:四川省卫生厅科研基金国家自然科学基金四川省卫生厅研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学文化科学更多>>
- 抑制端粒保护蛋白TPP1表达诱导ATM依赖的DNA损伤反应被引量:1
- 2008年
- 目的:构建端粒保护蛋白TPP1短发夹RNA表达载体,探讨抑制TPP1表达后对端粒DNA损伤及细胞增殖的影响.方法:体外构建端粒保护蛋白TPP1shRNA逆转录病毒表达载体shTPP1-01,shTPP1-02,与表达外源性TPP1的TPP1-HA质粒共同转染293T细胞,Western Blot检测shTPP1抑制外源性TPP1蛋白表达;RT-PCR检测shTPP1抑制小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)内源性TPP1mRNA的表达.再用shTPP1分别感染ATM+/+MEF和ATM-/-MEF细胞后,分别采用细胞生长曲线和BrdU掺入法检测细胞增殖,免疫荧光/端粒肽核酸荧光原位杂交法(IF/PNA-FISH)检测端粒功能障碍诱导损伤灶(TIF)的形成.结果:shTPP1-01和shTPP1-02均能明显抑制外源性TPP1蛋白和内源性TPP1mRNA的表达,shTPP1-01和shTPP1-02作用于原代培养的MEFs后细胞生长缓慢,BrdU阳性细胞数量分别占8.0%和8.7%,显著低于对照细胞的29.3%(P<0.01,P<0.01);而细胞表现为体积变大,形态扁平等类似细胞衰老的形态学改变;IF/PNA-FISH法检测结果显示,shTPP1作用于ATM+/+MEF细胞后导致端粒DNA损伤标志物-磷酸化的H2AX(γ-H2AX)和53BP1损伤灶(TIF)的形成,定量结果显示约50%的ATM+/+细胞中出现至少5个TIF;而在shTPP1作用后的ATM-/-细胞中,端粒γ-H2AX和53BP1形成的TIF数量显著减少,出现5个TIF的细胞数量不足5%,与对照组细胞相比无显著性差异.结论:抑制TPP1表达后诱发端粒ATM依赖的DNA损伤反应,进而抑制细胞增殖,促进细胞衰老.
- 郭晓兰袁国华周京国唐中刘宁涛杨明辉青玉凤吴凤霞朱道银
- 关键词:端粒短发夹RNADNA
- Ⅱ型胶原酶消化分离法和组织块直接培养法体外培养人软骨细胞的效果
- 2017年
- 目的比较Ⅱ型胶原酶消化分离法和组织块直接培养法体外培养人软骨细胞的效果。方法取人外伤性截肢及原发性骨关节炎患者的膝关节软骨,无菌条件下将软骨剪成1 mm×1 mm×1 mm左右的碎块,分别采用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块直接培养法分离培养人关节软骨细胞,进行原代及传代培养,观察软骨细胞的生长情况。结果采用Ⅱ型胶原酶消化法分离培养可获得较多软骨细胞,细胞形态典型,增殖较快。组织块直接培养法获得的软骨细胞数量较少,增殖慢。结论两种不同方法培养后,均可获得人软骨细胞的生长,Ⅱ型胶原酶消化分离培养法明显优于组织块直接培养法。
- 蒋红杨明辉蔡燕贾艾敏邱亚赵明才
- 关键词:软骨细胞体外培养传代
- 肿瘤患者放射治疗中血小板参数变化被引量:6
- 2001年
- 杨明辉李峥胡劲
- 关键词:肿瘤血小板参数变化
- 维生素D受体BsmI基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性
- 罗雄燕吴凤霞夏艳辉杨明辉袁国华
- 肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测
- 2003年
- 唐中杨明辉
- 关键词:肿瘤放射疗法血小板CD62PCD63流式细胞术
- 厚皮指症八例被引量:3
- 2007年
- 厚皮指症是以近端指间关节周围皮肤肿胀为主要临床表现的一种皮肤病,现将我院收治的8例患者报道如下。
- 谢传美袁国华朱道银杨明辉
- 关键词:厚皮皮肤肿胀关节周围皮肤病近端
- 趋化因子CXCL12 G801A基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究
- 吴凤霞罗雄燕杨明辉袁国华
- 自噬基因在系统性红斑狼疮患者T细胞中表达的检测被引量:4
- 2018年
- 目的通过检测SLE患者T细胞中自噬基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Atg5、Beelin-1、Atg7表达及T细胞中自噬发生率,探讨其与SLE发病的关系。方法选择67例SLE患者(SLE组)和31名健康体检者(健康对照组),应用实时定量PCR检测2组受试者T细胞中自噬基因LC3、Atg5、Beclin-1、Atg7表达水平,同时采用流式细胞术检测2组受试者T细胞中自噬发生情况,进一步分析自噬基因表达水平与自噬发生、SLE患者临床特点相关性。2组计量资料比较,采用t检验,计数资料比较采用矿检验。所有数据采用SPSS17.0软件分析。结果LC3mRNA和Atg7 mRNA在SLE患者T细胞中的表达低于健康对照组(t=2.623,3.162;P=0.010,0.002),而Beclin1 mRNA和Atg5mRNA表达在2组间差异则无统计学意义(P均〉0.05)。LC3-II蛋白表达水平(LC3—II/GAPDH比值)在SLE外周血T细胞中为(0.21±0.08),明低于健康对照组的(0.34±0.11)(t=1.846,P=0.047)。。T细胞自噬发生率在SLE患者为(3.7±1.9)%,低于健康对照组的(6.6±1.4)%,(t=4.132,P=0.000),而且发现自噬发生率与Atg7mRNA表达呈显著性相关(r=0.492,P=0.008)。T细胞中Atg7mRNA表达水平低(△CT值〉9.86)的SLE患者更容易出现肾脏受累(P=0.008)及抗dsDNA抗体阳性(P=0.018),且疾病活动度越高(P=0.035),而关节炎、血液系统及中枢神经系统损害发生率虽有增高趋势,但差异无统计学意义。结论SLE患者T细胞中LC3和Atg7 mRNA表达下凋,从而导致T细胞自噬下调,进而自噬形成障碍,致使不能有效清除衰老、变性的生物分子,提示自噬在SLE发病及病情进展中发挥重要作用。
- 罗雄燕刘青松杨闵杨明辉刘毅袁国华
- 关键词:红斑狼疮自噬T细胞
- 丹参体外抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖
- 刘青松蒋红凡瞿明罗雄燕蔡燕杨明辉唐中
- 骨关节炎基础及临床研究
- 袁国华管剑龙周京国魏锦刘宁涛杨明辉王轶唐中等
- 骨关节炎(OA)为最常见的慢性关节炎,其病理特点为渐进性关节软骨破坏,伴随关节周围骨质增生,导致关节结构力学改变,造成关节功能残疾。流行病学调查结果显示,60岁以上人群OA的患病率高达50%以上,因而被认为是影响老年人健...
- 关键词:
- 关键词:骨关节炎慢性关节炎老年人疾病免疫病理