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毕小斌
作品数:
1
被引量:11
H指数:1
供职机构:
中山大学基础医学院
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沈君
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中山大学附属第二医院
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2008
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大鼠骨髓间充质干细胞的钆-荧光双标记及MRI体外示踪的研究
被引量:11
2008年
目的应用多聚胺载体,对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)进行钆喷替酸葡甲胺(Gd-DTPA)及荧光双标记,探讨MSCsMR磁性标记及体外示踪的可行性。方法以聚乙烯亚胺-罗丹明复合物(JetPEI—FluoR)为载体,制备Gd—DTPA双标记示踪剂,培养分离sD大鼠骨髓MSCs,以此示踪剂体外标记间MSCs。对标记后细胞行生物学性状检测及电镜、荧光镜观察。应用1.5TMR仪,对标记的干细胞进行sET1WI及T2WI及混合(mixed)回波序列的T1测量,标记细胞正常传代后进行MR检查,观察标记的持久性。标记细胞、未标记细胞的T1WI信号强度、T1之间的比较使用t检验,台盼蓝拒染率采用两因素重复资料方差分析,不同浓度示踪下细胞吸光度比较采用单因素方差分析。结果双标记示踪剂标记5×10^5个MSCs,标记成功了4.25×10^5个,荧光镜下标记率为85%,电镜下钆(Gd)颗粒主要位于胞质内高尔基体周围。双标记示踪剂孵育3、6、12、24h内标记细胞的台盼蓝拒染率分别为(96.55±2.90)%、(94.17±2.56)%、(97.16±3.12)%、(94.23±2.67)%,相应的未标记细胞的拒染率分别为(95.86±2.67)%、(92.04±2.21)%、(93.38±3.64)%、(92.12±2.53)%,24h内标记细胞与未标记细胞拒染率差异无统学意义(F=4.523,P〉0.05)。细胞增殖实验中,在2.5、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0μl不同浓度示踪剂时,标记细胞的吸光度分别为(0.1884±0.0151)、(0.1878±0.0190)、(0.1741±0.0160)、(0.1135±0.0215)、(0.1079±0.0145)、(0.0811±0.0079),未标记细胞为(0.1940±0.0116),Gd—DTPA30.0μl以下标记细胞与未标记细胞吸光度差异无统计学意义(q’=0.2225~0.9458,P〉0.05)。标记后细胞凋亡指数为5.08%,对照组未标记细胞为3.86%。未标记细胞T1WI平均信�
沈君
周翠屏
成丽娜
段小慧
毕小斌
刘宇
符岳
梁碧玲
邓宇斌
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干细胞
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