洪敬欣
- 作品数：6 被引量：0H指数：0
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- YD383,YD438对人宫颈癌细胞体外增殖及细胞周期的影响
- JAK-STAT6通路的激活与过敏性疾病的发生密切相关,该通路的抑制子将有望成为新药的靶点。我们在前期的实验中,以JAK-STAT6信号传导通路为靶体,建立了STAT6活性依赖性的可稳定表达荧光素酶报告基因的HeLa-I...
- 笪宇蓉姚智邓为民洪敬欣何津岩杨洁
- 文献传递
- 人类U5·116 ku蛋白基因片段的克隆
- 2007年
- 目的:构建人类U5·116 ku基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,一步法合成单链cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人类U5·116 ku基因两段连续的序列,首先分别克隆至pTZ57R/T载体,两段序列连接成全长后再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),构建pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒。结果:RT-PCR法获得U5·116 ku基因两段连续的序列,长度分别为1672bp和1246bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(-)真核表达载体进行连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(-)-U5·116 ku重组质粒构建成功。结论:成功克隆了人类U5·116 ku的编码基因,并构建了其真核表达质粒pcDNA3.1(-)-U5·116 ku。
- 洪敬欣邵洁史雪彬姚智杨洁
- 关键词：HELA细胞质粒逆转录聚合酶链反应
- pEGFP-C2-人类p100蛋白SN和TD片段质粒构建
- 2007年
- 目的:分别构建含有人类p100蛋白SN片段和TD片段基因的真核绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD。方法:利用EcoRI和BamHI限制性内切酶对已构建好的质粒PSG5-p100-SN和PSG5-p100-TD进行双酶切以获得目的片段p100-SN和p100-TD基因片段,回收纯化后连接到质粒pEGFP-C2上。结果:通过对重组质粒进行菌落PCR鉴定以及酶切鉴定均能从PCR产物和酶切产物中观察到p100-SN和p100-TD片段。结论:成功构建了可以在真核细胞内表达绿色荧光蛋白和目的蛋白的融合蛋白的重组质粒pEGFP-C2-p100-SN和pEGFP-C2-p100-TD,可为有关人类p100蛋白功能及作用机制研究奠定基础。
- 步天栩葛林洪敬欣姚智杨洁
- 关键词：绿色荧光蛋白质粒
- p100蛋白与U5 snRNP特异蛋白人Prp8和人Snu114相互结合作用的研究
- 目的：p100蛋白首先作为EBNA2(Epstein-Barr virus nuclear antigen2, EB病毒细胞核抗原2)的转录调控激活因子被发现。HCA(hydrophobic cluster analys...
- 洪敬欣
- 关键词：剪接体支架蛋白剪接因子共激活因子
- 文献传递
- 人Prp8蛋白基因片段的克隆
- 2007年
- 目的:构建人Prp8基因全长真核表达质粒。方法:从HeLa细胞中提取总体RNA,两步法合成cDNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,扩增出人Prp8基因的四段序列,首先克隆至pTZ57R/T载体,再定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒。结果:RT-PCR法获得Prp8基因的4段序列,长度分别为2025、1090、1966、1963bp,分别与pTZ57R/T载体连接后,选择合适的酶切位点再连接成全长序列,然后将全长序列和pcDNA3.1(+)真核表达载体连接、转化、酶切鉴定及序列分析后,证实pcDNA3.1(+)-Prp8重组质粒构建成功。结论:成功克隆了人Prp8的编码基因,并构建了表达载体pcDNA3.1(+)-Prp8。
- 洪敬欣步天栩史雪彬邵洁姚智杨洁
- 关键词：基因表达质粒真核细胞逆转录聚合酶链反应
- Prp8蛋白在前体mRNA剪接中的作用
- 2007年
- 前体mRNA的剪接是基因表达的关键一步,发生在蛋白质的转录之后与合成之前。在前体mR- NA剪接加工过程中需要将转录本中的内含子切除,因为它会干扰基因的转录。前体mRNA的剪接发生在细胞核中,是在一个大的RNA与蛋白质的复合物即剪接体的催化下完成的。Prp8(precursor mRNA process- ing)是参与前体mRNA剪接的最大的蛋白,其序列从酵母到人类是高度保守的。Prp8同时也是细胞核内一个最重要的剪接因子。在剪接过程中,Prp8组成剪接体的催化中心。有人推断Prp8是剪接体的支架蛋白,很可能在催化中心起到锚定RNA的作用,同时也调节着激活剪接体所必需的构象变化。Prp8还与色素性视网膜炎的发生密切相关。
- 洪敬欣姚智杨洁
- 关键词：前体MRNA支架蛋白
