王云起
- 作品数：10 被引量：58H指数：5
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院化学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生一般工业技术机械工程更多>>
- 基于原子力显微术的抗菌肽杀菌机理和细胞表面受体识别的研究
- 本文第一部分基于原子力显微术，结合电子显微镜、荧光显微镜和荧光光谱仪等手段，系统研究了抗菌肽magainin2和melittin对E.coli细胞的杀伤作用，并在此基础上对目前的抗菌肽杀菌机理进行了验证和补充，即抗菌肽对...
- 王云起
- 关键词：电子显微镜抗菌肽纳米金层层自组装
- 人红细胞老化过程中膜表面唾液酸变化的免疫AFM研究被引量：6
- 2007年
- 分离人外周血的轻龄和老龄红细胞,采用麦胚凝集素和胶体金对红细胞表面的唾液酸残基进行细胞化学标记,然后在AFM下成像并进行数据分析。结果显示,老龄红细胞膜表面胶体金标记的颗粒数量明显低于轻龄红细胞表面,两者之间有显著差异。推测红细胞老化过程中细胞膜表面唾液酸含量的变化可能与老化细胞的处理机制有关。免疫胶体金标记结合原子力显微镜可在纳米尺度对膜受体蛋白进行定位和定量研究,拓展了原子力显微镜在生命科学领域的应用。
- 王云起李国有蔡继业潘运龙
- 关键词：红细胞免疫细胞化学胶体金
- 原子力显微镜在多糖分子结构研究中的应用被引量：11
- 2006年
- 评述原子力显微镜在多糖分子结构和功能研究的进展,AFM不仅可以在空气和液体中对多糖分子单分子和聚集体成像,得到单分子的直径、长度等量化信息和分子聚集体形貌特征。近年来AFM还用于在液体池中操纵单个多糖分子,获取单分子力学谱研究分子的弹性与构型转变的关系,在单分子水平上对多糖进行鉴定,用于细胞表面大分子黏附作用和细胞识别的研究等。AFM新技术的不断出现,必将在高分子科学的研究中起到越来越重要的作用。
- 李国有陈勇王云起廖问陶蔡继业
- 关键词：原子力显微镜多糖
- 人外周血淋巴细胞体外刺激活化的原子力显微镜研究被引量：13
- 2006年
- 本文利用原子力显微镜,对分离的人外周血淋巴细胞和经多克隆刺激剂佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激活化的淋巴细胞形态和膜表面超微结构的形态学变化进行了研究。结果表明:淋巴细胞在受刺激后形貌发生明显变化,尺寸变大,同时细胞表面超微结构也趋复杂,出现免疫突触。这些形态变化是与淋巴细胞的功能相适应的,AFM是研究淋巴细胞形态学变化和细胞结构功能之间关系的有力工具。
- 廖问陶钟丽云查庆兵王云起李国有王小平何贤辉蔡继业
- 关键词：AFM淋巴细胞超微结构
- 生物素与链霉亲合素偶联法制备量子点-透明质酸复合膜
- 2007年
- 首先利用一种阳离子型聚电解质(多聚赖氨酸)修饰玻璃基底,并与阴离子型聚电解质(生物素化透明质酸)在静电引力下自组装,然后以生物素化透明质酸和链霉亲合素化量子点为材料,通过生物素和链霉亲合素之间的特异性结合力,层层自组装法制备了量子点一、二、三层膜。用紫外可见吸收光谱和荧光光谱对其光学性质进行表征;原子力显微镜成像表明三种膜表面均一、平整,每层的量子点都分散均匀,没有严重的聚集情况。
- 李国有王云起张文豪蔡继业
- 关键词：量子点多层膜原子力显微镜
- 溶菌酶活性的AFM研究被引量：2
- 2007年
- 以溶壁微球菌为底物,用原子力显微镜(Atomic forcemicroscope,AFM)观察到了不同浓度的溶菌酶与溶壁微球菌相反应的作用过程。结果发现,在溶菌酶浓度为0.01mg/mL的情况下,反应菌液逐渐变澄清,溶壁微球菌的裂解程度随着反应时间的延长而逐渐加剧;而在酶浓度增大为1mg/mL时,反应菌液反而不再变清,AFM观察到溶壁微球菌仅发生变形,但未裂解。AFM是观测酶活生理过程的有力工具,同时还为酶活测定开辟了新思路,是传统酶活测定方法的有力补充。
- 廖问陶刘源岗王云起王小平李国有蔡继业
- 关键词：溶菌酶AFM酶活
- 天蚕素A-蜂毒素杂合肽用pBV220载体的表达、纯化和活性测定被引量：12
- 2005年
- 为提高抗菌肽的表达,在抗菌肽的N端融合了1段酸性小肽以中和表达产物对宿主的毒性;并将融合肽基因同向串连成多拷贝,在大肠杆菌中获得了较高的表达。用化学合成法分别合成了编码天蚕素A(1-8)-蜂毒素(1-10)杂合肽和酸性小肽的DNA片段,首先将其拼接成融合肽的完整基因,然后通过前后接头将融合肽基因连接成两侧具有EcoRI和SalI酶切位点的同向串连的多拷贝基因。将5份拷贝的基因克隆至pBV220表达载体,转化E.coliDH5α,温度诱导得到表达量为35%的融合蛋白。表达产物主要以包涵体形式存在,将包涵体溶解,经Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析获得纯化的融合蛋白。融合蛋白再经CNBr切割和阳离子交换层析,得到纯化的抗菌肽,经蛋白质N端测序确认序列正确。琼脂糖扩散法和液相测定法证明了纯化的抗菌肽具有抗菌活性。
- 王云起刘飞鹏李月琴张欣蔡继业
- 关键词：基因活性抗菌肽免疫系统
- 聚乳酸表面处理的AFM观察及对细胞粘附性的影响被引量：4
- 2005年
- 利用N aOH对溶液浇铸法制备的聚L-乳酸膜(PLLA)进行不同时间的表面处理,采用接触角仪和原子力显微镜(AFM)对处理前、后的材料表面进行亲水性和形貌表征,并初步研究了表面处理的材料对细胞粘附性的影响。结果表明,N aOH处理后的PLLA膜的亲水性明显改善,并且其表面平均粗糙度(Ra)由20 nm增加到40 nm^150 nm。成纤维细胞在改性后的材料表面的粘附和生长较改性前有了很大提高。
- 王云起焦延鹏蔡继业周长忍
- 关键词：聚L-乳酸表面处理原子力显微镜细胞
- 原子力显微镜在DNA和蛋白质相互作用方面的研究进展被引量：3
- 2007年
- 评述了原子力显微镜在研究DNA和蛋白质相互作用领域的应用进展。AFM可在空气和液体中对静态的DNA-protein复合体进行成像,也可在液体中实时观察DNA和protein的反应过程。而且,力模式AFM还可获得DNA和protein分子间作用力的信息。AFM已揭示了许多基因调控的机制,也必将在生命科学的研究中起到越来越重要的作用。
- 王云起廖问陶蔡继业
- 关键词：原子力显微镜DNA蛋白质相互作用动力学
- 抗菌肽magaininⅡ对E.coli杀伤作用的AFM观察被引量：8
- 2006年
- 利用原子力显微镜(AFM)观察了不同浓度magaininⅡ对E.coli的作用效果。分别用低于MIC和高于MIC浓度的magaininⅡ作用E.coliD31,结果发现当magaininⅡ浓度低于最低抑制浓度MIC时,细菌外膜的粘弹性增大,膜表面产生数量、大小不等的囊泡结构。当magaininⅡ高于MIC时,细胞很快破损,胞浆内容物外泄,菌体破裂导致死亡。推测magaininⅡ分子可能以“地毯”模式迅速集结于细胞膜上,环绕菌体切断细胞膜。这些结果都说明微生物的细胞膜结构是抗菌肽攻击的首要靶点。
- 王云起蔡继业马淑媛张欣
- 关键词：抗菌肽大肠杆菌MAGAININ原子力显微镜
