王治伟
- 作品数：5 被引量：16H指数：1
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：首都医学发展科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌Rv3881c突变子的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 2007年
- 目的:融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原,以便与其他已知的免疫显性抗原联合使用,有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验的敏感性和特异性。方法:将克隆的来源于结核分枝杆菌H37Rv株的Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达;由于重组的Rv3881c突变子抗原片段同C端的6×His标签融合表达,使用Ni-柱进行快速纯化。结果:Western印迹表明,重组的Rv3881c突变子抗原同选取的6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显的反应。结论:重组Rv3881c突变体具有较好的特异性,提示该抗原可能成为检测结核的有效抗原之一。
- 李邦印李大伟王臻吴雪琼王仲元王治伟韩慧新
- 关键词：结核分枝杆菌融合蛋白大肠杆菌
- 人颗粒裂解肽片段在大肠杆菌中的表达
- 2007年
- 目的:建立颗粒裂解肽(NKG5)的原核表达载体系统,并在大肠杆菌中获得表达。方法:采用寡核苷酸合成、PCR扩增得到NKG5编码序列,克隆到pGEM-T载体上,经测序正确后,再切下编码序列连接到重组表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导重组工程菌表达,采用谷胱甘肽偶联的Sepharose4B纯化重组蛋白。结果:重组菌株可以表达GST-NKG5融合蛋白,用免疫印迹反应鉴定纯化的融合蛋白,在相对分子质量34000处有一条带。结论:获得了在大肠杆菌中低表达的颗粒裂解肽融合蛋白,为后续研究奠定了基础。
- 李邦印王臻李大伟张灵霞王治伟
- 关键词：颗粒裂解肽融合蛋白原核表达
- 探讨荧光定量PCR在结核菌检测中的应用被引量：16
- 2008年
- 目的探讨荧光定量PCR技术在检测临床标本中结核分枝杆菌的应用价值。方法通过荧光定量PCR技术鉴定350株临床分离株,进行结核分枝杆菌的菌种鉴定和定量分析,同时进行抗酸染色和培养法。结果荧光定量PCR、染色和培养法阳性检出率分别为38.8%(128/330),21.8%(72/330),29.7%(98/330),提高阳性检出率(涂阴)16.97%(56/330),菌种鉴定特异性实验符合率为100%。结论荧光定量PCR技术是一种快速、敏感、特异性强的结核分枝杆菌辅助诊断方法。
- 李洪敏王治伟张霞苗青刘银萍
- 关键词：结核分枝杆菌荧光定量PCR菌种鉴定
- 治疗性重组质粒对结核分枝杆菌抑菌作用的分析
- 2009年
- 应用动物试验模型主要脏器的结核分枝杆菌生长情况，观察结核分枝杆菌MPT64和ESAT6DNA疫苗预防结核病的效力。试验将BALB／C小鼠随机分五组，其中A组生理盐水、B组载体质粒、C组卡介苗、D组重组质粒MPT64DNA、E组ESAT6DNA。免疫9周后，用H，，RV结核分枝杆菌强毒株攻击小鼠，分别在攻击一个月后和二个月后观察结果。结果C、D、E组比B组生长天数总体向后推迟，生长时间明显集中，生长曲峰比B组明显减弱。D、E组鼠脾淋巴细胞转化率较C组高，B组明显降低。试验结论与B组相比，小鼠免疫力的短期预防是有所增强，其中卡介苗前期效果明显，MPT64和ESAT6持续效果更好。
- 李洪敏吴雪琼王治伟郑忠国张俊仙
- 关键词：结核分枝杆菌重组质粒BALB/C小鼠抑菌作用治疗性MPT64
