王艳娇
- 作品数：9 被引量：44H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Klotho基因转导延缓自发性高血压大鼠高血压进程及改善其心脏损害的作用研究被引量：8
- 2012年
- 目的研究Klotho基因转导对自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensiverat，SHR）高血压进程及心脏损害的影响及可能机制。方法应用含有小鼠全长KlothocDNA的重组腺相关病毒（rAAV．mKL）载体基因转导作为干预方法。实验分4组：实验组（A、B、C3组）均为SHR，对照组（D组）为年龄、性别匹配的SD大鼠，每组5只；其中A、B、c组SHR分别尾静脉注射等体积含单纯磷酸盐缓冲液（空白组）、rAAV．mKL及腺相关病毒载体介导的增强绿色荧光蛋白（rAAV．EGFP），对照组SD大鼠也注射等体积磷酸盐缓冲液，实验观察12周。实验结束时，测血浆血糖，酶联免疫吸附剂测定法测胰岛素、胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）蛋白水平；心脏称重计算心脏体重指数；荧光显微镜检测心脏冰冻切片EGFP荧光；逆转录PCR、免疫组化、Western印迹检测心脏组织Klotho、IGF-1、IGF-1受体（IGF-1receptor，IGF-1R）mRNA及蛋白表达以及磷酸化Akt蛋白表达。HE及Masson染色后观察肥大心肌及胶原纤维。结果发现rAAV．mKL转导SHR后能阻止其血压进一步升高，而其他两组SHR的血压则继续升高。与sHR对照组相比，rAAV．mKL转导组其心脏组织KlothomRNA及蛋白表达上调，其血浆血糖、IGF-1水平升高，心肌磷酸化Akt蛋白降低；同时其心肌肥大、胶原纤维增生较SHR对照组明显减轻。结论Klotho基因转导可以阻止自发性高血压进程，也可以阻止心肌肥大及胶原纤维增生。保护心脏机制可能与胰岛素、IGF-1信号通路受到抑制有关，即通过抑制下游Akt磷酸化而实现。
- 李宝善马厚勋王艳娇吴平
- 关键词：KLOTHO基因高血压心脏保护
- 医养结合机构新型冠状病毒肺炎的防控应对策略被引量：3
- 2020年
- 医养结合机构是老年人长期集中生活的场所。根据新型冠状病毒肺炎的疫情防控要求,针对医养结合机构的服务对象和工作特点,从组织领导、员工管理与培训、老年人防控、心理支持、后勤保障等方面制定了医养结合机构疫情防控应对策略,对实际工作进行指导。
- 谢燕喻秀丽霍丹甘霈王艳娇何海燕邓庆童立纺张蓥鑫杨番张越何孟萍
- 关键词：老年人养老机构
- 老年人正式入住医养结合养老机构前服务沟通方式的改进被引量：8
- 2019年
- 目的探讨老年人入住医养结合养老机构前服务沟通方式的改进策略。方法将115例预约试住医养结合养老机构的老年人随机分为观察组58例和对照组57例。对照组采用传统方法,于老年人试住当天讲解《试住期合同》内容后,为老年人提供2周的试住期服务。观察组以团队服务模式行分阶段服务与沟通为老年人提供试住期照护。结果试住期满后,观察组对试住期满意度、对《试住期合同》主要内容知晓程度、正式入住率显著优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论对有入住医养结合养老机构意愿的老年人,采取团队式分阶段服务沟通的方式,有利于提高老年人试住期满意度和正式入住率。
- 童立纺宋延波王艳娇喻秀丽
- 关键词：老年人养老机构沟通策略团队服务
- 重组腺相关病毒介导克老素基因表达对2型糖尿病大鼠肾脏纤维化的作用及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)介导的克老素(klotho,KL)基因表达对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠肾脏纤维化的影响及其机制。方法将SD大鼠随机分为4组,随机选3组建立T2DM大鼠模型,分别经尾静脉注射rAAV.mKL(T2DM-mKL组)、rAAV.GFP(T2DM-GFP组)和PBS(T2DM-PBS组),正常对照(SD-PBS组)大鼠经尾静脉注射PBS,12周后,处死动物,收集肾脏组织标本,冰冻切片观察GFP,Masson染色观察肾脏组织病理变化及胶原纤维表达;免疫组化法检测各组大鼠肾脏组织中KL和波形蛋白(vimentin,VIM)的表达;RT-PCR法检测各组大鼠肾脏组织中Rho激酶(Rho associated coiled-coilforming protein kinase,ROCK)基因mRNA转录水平;Western blot法检测各组大鼠肾脏组织中ROCKⅠ蛋白活性。结果 T2DM-GFP组、T2DM-mKL组大鼠肾脏组织中GFP表达较强;T2DM-mKL组大鼠肾小球基底膜结构较清晰完整,肾小球系膜区及肾小管间质区胶原纤维明显较T2DM-PBS组和T2DM-GFP组减少;T2DM-mKL组KL蛋白的表达明显高于其他各组(P<0.01),VIM蛋白的表达明显低于其他各组,与T2DM-PBS组和T2DM-GFP组VIM蛋白的表达相比,差异有统计学意义(P<0.01);T2DM-mKL组ROCKⅠmRNA转录水平及其蛋白活性均明显低于T2DM-PBS组(P均<0.05)。结论 rAAV.mKL转染可明显增加T2DM大鼠肾脏中KL基因的表达,延缓糖尿病肾纤维化进程,其机制可能与KL抑制ROCK信号通路活性相关。
- 邓明洪马厚勋罗玉梅李运奎吴平王艳娇李宝善
- 关键词：腺相关病毒糖尿病肾脏纤维化波形蛋白蛋白激酶
- 老年大鼠组织中Klotho基因表达分布特征被引量：2
- 2012年
- 目的研究Klotho基因在大鼠组织中的表达及其分布。方法饲养SD大鼠分为对照组和老年组,每组6只。处死后取心脏、主动脉、肾脏、脑、肺、肝、胰、脾、骨骼肌、脂肪组织,提取总RNA和总蛋白。应用RT-PCR和ELISA法检测Klotho mRNA及Klotho蛋白在各组织中的表达水平。结果两组大鼠心脏、主动脉、肾脏、脑、肺、肝、胰、脾、骨骼肌、脂肪组织中均有Klotho基因表达,并且在肾脏、胰腺中高表达,脂肪中低表达。老年组Klotho mRNA、Klotho蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.001)。结论大鼠心脏、主动脉、肾脏、脑、肺、肝、胰、脾、骨骼肌、脂肪组织中均有Klotho基因表达。老年大鼠组织中Klotho基因表达减少。
- 李宝善王艳娇马厚勋吴平
- 关键词：KLOTHOMRNA基因表达
- 体外转染Klotho基因对H9c2(2-1)大鼠心肌细胞缺血再灌注的影响被引量：4
- 2012年
- 目的研究转染Klotho基因对H9c2(2-1)大鼠心肌细胞缺血再灌注的影响。方法培养H9c2(2-1)大鼠心肌细胞,建立模拟缺血再灌注模型,Fermentas转染试剂介导小鼠Klotho基因转染H9c2(2-1)大鼠心肌细胞。实验分4组:对照组(Control组)、缺血再灌注组(I-R组)、转染Klotho基因组(Klotho组)、转染Fermentas转染试剂空载体组(Vehicle control组)。各组进行缺血再灌注后RT-PCR及免疫荧光法检测Klotho mRNA及Klotho蛋白表达,MTT法检测细胞活性,测定上清液乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及Klotho含量。结果 Klotho组较I-R组和Vehicle control组Klotho mRNA、Klotho蛋白表达明显增加,LDH、MDA明显降低,细胞活性高(P<0.01)。结论 Fermentas转染试剂介导的Klotho基因转染H9c2(2-1)大鼠心肌细胞可保护H9c2(2-1)大鼠心肌细胞、减轻H9c2(2-1)大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤。
- 李宝善马厚勋王艳娇吴平
- 关键词：KLOTHO心肌细胞缺血-再灌注
- 骨代谢调控因素与骨质疏松症被引量：3
- 2010年
- 骨代谢平衡是保证骨的正常降解与重建的重要机制,遗传相关基因的调节、骨形成与骨吸收过程的动态平衡、骨基质环境的稳态等均是维持正常骨代谢的重要因素,任一环节的异常改变都会影响骨代谢平衡。骨质疏松症的发生正是骨代谢失衡引发的全身性代谢性骨病,进一步揭示其发病机理需深入了解骨代谢的相关调控因素。本文就近年骨代谢调控因素的相关研究进行综述。
- 王艳娇马厚勋
- 关键词：代谢成骨细胞破骨细胞骨质疏松
- 小鼠全长膜型Klotho蛋白cDNA表达体系的构建与应用被引量：2
- 2012年
- 目的克隆编码小鼠膜型Klotho(mKL)蛋白的cDNA片段,构建、包装Klotho重组腺相关病毒表达体系,并检测rAAV/mKL载体表达功能。方法选择RT-PCR扩增小鼠全长mKL蛋白的基因片段,将该片段亚克隆至腺相关病毒载体pAAV-IRES-hnGFP,采用酶切及DNA测序鉴定;利用AAV-293细胞包装rAAV/mKL,经转染7901细胞,检测其Klotho表达情况。结果本文成功克隆出序列信息和读码框完全正确的3 064 bp的小鼠Klotho基因片段,并构建pAAV/mKL克隆。在AAV-293细胞中包装出rAAV/mKL,病毒原液转染7901细胞后其Klotho mRNA表达上调,而细胞上清液Klotho蛋白也明显增加(P<0.01)。结论成功构建小鼠Klotho重组腺相关病毒载体(pAAV/mKL),获得了rAAV/mKL,并经转染7901细胞验证其基因表达功能正常,这就为进一步研究Klotho基因治疗衰老相关性疾病提供了技术基础。
- 李宝善王艳娇马厚勋吴平
- 关键词：KLOTHO腺相关病毒
- 腺相关病毒介导的klotho基因表达对去势大鼠骨Runx2及MMP-13表达的影响被引量：13
- 2012年
- 目的探讨腺相关病毒介导的klotho(KL)基因表达对去势骨质疏松大鼠的调控作用。方法 SD雌性大鼠随机分为假手术组(S组)和手术组,外科去势术后12周再随机分为模型组(O组)、17β-雌二醇组(E组)、KL基因组(KO组)和空质粒组(GO组),实验12周后处死。取股骨、胫骨测骨密度;冰冻切片及免疫组化法观察肾KL荧光及KL蛋白表达;RT-PCR和免疫组化法检测骨Runx2、MMP-13 mRNA及蛋白表达;HE染色观察骨组织形态学变化。结果 KO组和E组骨密度高于O组和GO组(P<0.05);KO组大鼠肾有小鼠KL基因特异性表达;与O组相比,KO组Runx2 mRNA表达明显上调,MMP-13 mRNA表达显著下调(P<0.05);免疫组化分析KO组Runx2吸光度值为411±96,显著高于O组的353±50(P<0.05);KO组MMP-13吸光度值为397±84,显著低于O组的656±89(P<0.05)。KO组、E组和S组大鼠骨小梁排列紧密,连接成网,形态结构较完整,明显优于O组和GO组。结论 KL基因表达上调可减缓去势大鼠骨质疏松症的发展及骨组织微结构的破坏,提示KL基因可能在骨质疏松症的发展中扮演重要角色。
- 王艳娇马厚勋李宝善吴平
- 关键词：KLOTHORUNX2MMP-13骨代谢
