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耐药型大肠杆菌引发的仔猪大肠杆菌病的PCR快速鉴定被引量：1: 2014年; 利用菌落PCR方法对临床致病菌进行快速鉴定,以天津地区某猪场病死猪胃、肠内容物作为病料进行细菌分离培养,并对所分离的细菌进行药敏试验鉴定。设计16S r RNA通用引物并利用菌落PCR方法扩增所分离细菌的16S r RNA序列,对该序列进行测定和BLAST分析。结果发现,该细菌为一株多重耐药性大肠杆菌。试验建立了仔猪大肠杆菌病的临床快速检测方法。; 王选赵瑞利马吉飞胡烨路垚朱蕴暖; 关键词：仔猪耐药性大肠杆菌 PCR

新牛蛙活性肽Catesbeianin-1a的抗菌抗肿瘤作用被引量：5: 2013年; 通过筛选牛蛙皮肤cDNA文库得到具有较强抗菌抗肿瘤活性肽Catesbeianin-1a,合成其成熟肽氨基酸序列,MIC法测定抑菌活性结果表明,Catesbeianin-1a对临床常见的致病菌具有较强的抑菌活性,其中对猪链球菌2型的MIC为2.5mg/L,且对兔红细胞几乎无溶血性。MTT法测定多肽抗肿瘤细胞活性,结果 Catesbeianin-1a对胃癌细胞和肝癌细胞的抑杀活性很强,对肝癌细胞SGC7901的IC50为0.845mg/L。制作透射电镜超薄切片,利用透射电镜观察活性肽对细菌和肿瘤细胞超微结构的影响,旨在初步探讨牛蛙皮肤活性肽Catesbeianin-1a抗菌、抗肿瘤的作用机制,并以Catesbeianin-1a为基础进行分子改造来提高其抗肿瘤的靶向性并降低其毒性。; 赵瑞利韩俊友韩文瑜刘珊珊马吉飞雷连成冯新张安国王选; 关键词：抗菌抗肿瘤透射电镜

新型牛蛙抗菌肽Temporin-La对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的治疗效果被引量：2: 2013年; 目的探讨新型牛蛙抗菌肽Temporin-La对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的治疗效果。方法采用二倍稀释法检测抗菌肽Temporine-La对临床主要致病菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);透射电镜观察Temporine-La对金黄色葡萄球菌的作用效果;复制金黄色葡萄球菌表皮感染小鼠模型,分别用4 U/ml青霉素和10μg/ml Temporin-La进行治疗,另设生理盐水对照组和空白对照组,感染后第4天,对各组小鼠进行白细胞计数、细菌计数、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平检测及病理组织切片观察。结果Temporin-La对革兰阳性菌的抑菌活性高于革兰阴性菌,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强;透射电镜观察显示,经100μg/ml Temporin-La处理的金黄色葡萄球菌出现了质壁分离的现象,细胞壁缺失或发生裂解,金黄色葡萄球菌发生裂解而死亡;感染后第4天,青霉素组和Temporin-La组白细胞数及创面下肌肉组织细菌数均明显低于生理盐水对照组(P<0.05或P<0.01),Temporin-La组小鼠血清VEGF的表达水平明显高于青霉素组和空白对照组(P<0.05),青霉素组和Temporin-La组小鼠的创口修复情况明显优于生理盐水对照组。结论 Temporin-La具有抗小鼠金黄色葡萄球菌感染的效果,为其临床应用提供了实验依据,也为抗感染治疗提供了新的思路。; 赵瑞利韩文瑜韩俊友金天明冯新雷连成孙长江王选; 关键词：牛蛙抗菌肽金黄色葡萄球菌

新牛蛙凝集素Catesbeianalectin的免疫原性分析及其特异性糖基配体的筛选: 2016年; 目的分析新发现的牛蛙凝集素Catesbeianalectin的免疫原性,并筛选其体外特异性结合的糖基配体。方法多肽合成牛蛙凝集素Catesbeianalectin,利用圆二色谱(circular dichroism,CD)检测其二级结构。分别用牛蛙凝集素、麦胚凝集素(wheat germ lectin,WGA)、卵清蛋白(ovalbumin,OVA)免疫BALB/c小鼠,检测血常规与血清效价,分析牛蛙凝集素的免疫原性。表面等离子共振成像(surface plasmon resonance imaging,SPRi)技术筛选30多种与牛蛙凝集素特异性结合的糖基配体。结果牛蛙凝集素Catesbeianalectin为聚脯氨酸2型(PPⅡ)螺旋结构。OVA包被浓度为0.25μg/ml时,小鼠平均血清效价为1∶200;WGA包被浓度为0.008μg/ml时,小鼠平均血清效价为1∶1 600,牛蛙凝集素Catesbeianalectin包被浓度为80μg/ml时,小鼠血清平均效价为1∶25。当30种单糖以浓度5 mmol/L固定于芯片,牛蛙凝集素Catesbeianalectin以浓度0.4 mg/ml通过固定于芯片的糖表面时,主要与半乳糖基和含有半乳糖基的多糖作用。结论牛蛙凝集素Catesbeianalectin免疫原性较低,为S-型凝集素,体外可与带有半乳糖基的多糖结合,为进一步研究牛蛙凝集素Catesbeianalectin的药物靶向载体作用奠定了基础。; 赵瑞利朱琳金天明王选魏冰马吉飞申杰胡烨刘梦月; 关键词：免疫原性

牛蛙凝集素的生物学活性研究及其糖基配体的筛选: 生物活性肽是指一类对生物体的生命活动有益处或是具有生理作用的肽化合物,具有抗菌、抗癌、抗病毒等功能。目前,生物活性肽以其巨大的优势越来越广泛受到人们的关注。生物活性肽中一类具有凝集红细胞功能的多肽称为凝集素。凝集素是一类...; 王选; 关键词：生物活性

两种牛蛙活性肽结构及体外抗肿瘤细胞增殖作用的研究被引量：1: 2015年; 试验旨在研究新发现的两种牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCFH446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K5623种肿瘤细胞体外增殖的影响，为新的多肽抗肿瘤药筛选提供依据。本试验利用圆二色谱（cD）法检测两种新牛蛙活性肽的二级结构，通过MTS细胞毒试验测定不同浓度的两种新牛蛙活性肽对人肺癌细胞NCI-H446、人乳腺癌细胞MCF-7及小鼠白血病细胞K5623种瘤细胞体外增殖的影响。圆二色谱法结果显示，Temporin-Lb的二级空间结构为聚脯氨酸Ⅱ型螺旋（PPⅡ）结构，Catesbeianin-1a的二级空间结构为无规则卷曲。MTS细胞毒试验结果显示，给予Catesbeianin-1a的3种瘤细胞培养24h后，瘤细胞形态无明显变化，正常增殖，而给予Tem—porin-Lb的3种瘤细胞培养24h后，瘤细胞发生皱缩、细胞变圆、脱落甚至死亡，增殖受到抑制，其中对Temporin-Lb在4-40μmol／L浓度范围内对小鼠白血病细胞K562的抑制效果最为明显。结果表明，新牛蛙活性肽Tempor—in-Lb具有一定的抑瘤作用，Catesbeianin-1a对瘤细胞的体外增殖没有明显影响。; 王选马吉飞赵瑞利胡烨申杰林东东; 关键词：体外抑瘤

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王选

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