田生和
- 作品数：11 被引量：13H指数：3
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段单克隆抗体的制备被引量：1
- 2009年
- 目的制备抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段(sTRAIL)的单克隆抗体。方法用重组sTRAIL免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,捕获ELISA筛选阳性克隆,制备腹水抗体。间接ELISA测定单抗效价,并进行单抗亚类、特异性鉴定及杂交瘤细胞染色体和单抗识别位点分析。将杂交瘤细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后,检测细胞培养上清的效价。结果3株杂交瘤细胞分泌的单抗均为IgG1型,腹水单抗效价均高于10-6,杂交瘤细胞染色体数介于94～98条之间,均识别sTRAIL分子上线性表位。细胞体外连续培养3个月及冻存6个月后的上清效价保持稳定。结论已成功制备了3株可稳定分泌抗sTRAIL单克隆抗体的杂交瘤细胞,为TRAIL的定性定量检测及组织表达分析奠定了基础。
- 潘勇兵田生和李国喜全家妩
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体胞外区单克隆抗体
- 三组单克隆（鼠）ＰＡＰ试剂在三套抗原－抗体反应系统中检测结果比较
- 巫山田生和
- 关键词：抗原抗体
- 细胞ELISA法的建立及应用被引量：3
- 1992年
- 应用刀豆素蛋白A为结合剂将细胞结合于酶标板的细胞ELISA法(C-ELISA),检测几种抗细胞膜抗原单抗和筛选抗细胞膜抗原单抗,均显示具有较好的特异性和重复性。在筛选杂交瘤上清时,该法较间接免疫荧光法敏感、简便。
- 田生和王大坤
- 关键词：单克隆抗体
- 免疫球蛋白单个转换区在类别转换时基因突变的研究
- 2005年
- 目的:观察在免疫球蛋白的类别转换(CSR)过程中单个转换区(S区)的基因重组情况。方法:通过构建包含单个S区(FS-α2)基因序列的人工载体,使目的基因位于四环素敏感的启动子下游,并转染到一株能够在体外诱导CSR反应的B淋巴细胞系,经细胞因子诱导CSR后,用PCR扩增目的基因,再进行序列分析以观察此S区基因的变异及其依赖的因素。结果:在细胞因子的诱导下,单个S区基因在CSR时可以出现基因变异包括点突变、序列缺失及序列插入等变化,并且当抑制上游启动子时,S区基因变异显著下降,表明S区基因重组受控于基因转录。结论:CSR重组机制在单个S区中同样发挥作用。
- 田生和木下和生本庶佑
- 关键词：免疫球蛋白突变
- 重组sTRAIL分子对K562细胞的凋亡作用
- TRAIL(TNF-related apoptosis-inducing ligand)是新近发现的肿瘤坏死因子超家族成员,它与肿瘤坏死因子-α和Fas配体一样能诱导肿瘤细胞发生凋亡。本文选用对TRAIL人白血病细胞株k...
- 田生和全家妩
- 关键词：白血病肿瘤细胞K562细胞生物学活性肿瘤坏死因子
- 文献传递
- 人TRAIL细胞外段基因在大肠杆菌中的表达及其包涵体的复性被引量：3
- 2005年
- 目的 在大肠杆菌中表达人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞外段 (sTRAIL)基因 ,并研究其包涵体的复性。方法 应用RT- PCR法从正常人外周血单核细胞中获得sTRAIL的编码基因 ,将其克隆到原核表达载体pBV2 2 0 ,于大肠杆菌DH5α中通过温控诱导表达 ;将包涵体进行变性和复性处理后 ,采用离子交换层析纯化表达产物 ,并经Dotblot及MTT试验鉴定。结果 通过温度诱导 ,目的基因主要以包涵体形式高效表达 ,包涵体蛋白经梯度透析法复性可获得具有抗肿瘤活性的重组人sTRAIL。结论 已获得大量纯化重组人sTRAIL ,为开发新型抗肿瘤制剂奠定基础。
- 田生和全家妩
- 关键词：TRAIL包涵体复性细胞外大肠杆菌离子交换层析
- 双特异性抗体的研究进展被引量：1
- 1994年
- 近年来双特异性抗体(BsAb)在免疫学诊断和导向免疫治疗方面已得到广泛研究,其制备方法也在不断改进,包括化学交联法、杂交瘤融合法及基因克隆法。本文综述BsAb的制备原理、方法及研究现状,并展望其应用前景。
- 田生和
- 关键词：抗体双特异性
- 日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因在大肠杆菌的表达被引量：5
- 1999年
- 目的 克隆并表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因以制备血吸虫疫苗候选分子。方法 利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术扩增日本血吸虫大陆株的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 基因， 经 Ｂａｍ Ｈ Ｉ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ双酶切后定向克隆于原核表达质粒 Ｐ Ｅ Ｇ Ｘ２ － Ｔ， 并在大肠杆菌进行表达研究。结果 获得目的基因克隆， 在大肠杆菌可诱导表达约４４ｋ Ｄ 的融合蛋白， 该重组抗原能被慢性血吸虫病人血清特异性识别。结论 成功地表达了一种血吸虫疫苗候选抗原， 为进一步研究打下基础。
- 田生和段凯赖建平王大坤郑宏石磊
- 关键词：日本血吸虫脂肪酸结合蛋白疫苗大肠杆菌
- 用自制抗HRP－抗HBc双特异性单克隆抗体检测抗HBc的初步应用
- 1995年
- 用杂交瘤融合法建立了抗ＨＲＰ－抗ＨＢｃ双特异性单克隆抗体（ＢｓＡｂ）杂交－杂交瘤细胞系，它分泌的腹水抗体经ＦＰＬＣ－离子交换层析梯度盐洗脱呈现三个主峰，抗体活性检测表明依次为抗ＨＲＰ、ＢｓＡｂ及抗ＨＢｃ。试用ＢｓＡｂ－ＨＲＰ复合物检测乙肝病例血样，与市售试剂盒初步比较，效果满意。
- 田生和王大坤巫山袁雪陈善华
- 关键词：ELISA单克隆抗体
- 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的研究进展
- 一、概述肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2L),属于肿瘤坏死因子家族成员,1995年Wiley等人从外周血液淋巴细胞和人心脏组织来源的cDNA文库中利用与TNF同源的表达序列标签分析出了...
- 田生和全家妩
- 文献传递
