- 中国汉族人群CYP2C9常见多态性位点的检测及其与国外其他人群的比较研究被引量：8
- 2011年
- 目的检测中国汉族人群细胞色素P450 2C9(CYP2C9)常见多态性位点的等位基因,为药物基因组学研究提供理论依据。方法用聚合酶链反应产物直接测序和基因克隆测序法对2127例中国汉族人群CYP2C9基因常见多态性位点CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3等位基因进行检测,明确其在中国汉族人群中的等位基因及基因型频率分布,并与国外不同人群基因多态性进行比较研究。结果中国汉族人群CYP2C9基因常见等位基因CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3的等位基因频率分别为96.94%、0.14%、2.92%,常见基因型CYP2C9*1/*1、CYP2C9*1/*2、CYP2C9*1/*3、CYP2C9*3/*3的基因型频率分别为94.12%、0.28%、5.36%、0.24%。结论中国汉族人群CYP2C9基因中以CYP2C9*1等位基因为最常见,CYP2C9*2和CYP2C9*3是中国汉族人群罕见等位基因;中国人群CYP2C9基因的等位基因频率与日本人群相近,与法国、西班牙和意大利等欧洲人群差异有统计学意义,该研究结果将为我国的临床药物基因组学研究提供有价值的理论依据。
- 徐仁爱戴大鹏胡利明杨莉萍胡国新蔡剑平
- 关键词：CYP2C9基因多态性基因分型
- 高效液相色谱法同时检测小鼠血浆中皮质酮和去氢皮质酮的浓度
- 2012年
- 目的:建立HPLC法测定血浆中的皮质酮和去氢皮质酮浓度。方法:小鼠血浆样品在酸性条件中用乙酸乙酯萃取;采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱分离,流动相为乙腈-水-0.1%三氟乙酸,流速为1 mL·min-1,柱温25℃,检测波长为246 nm。结果:皮质酮浓度在0.05～8 mg·L-1;范围内线性关系良好(r=0.9995),定量下限为0.05 mg·L-1。去氢皮质酮浓度在0.05～8 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9994),定量下限为0.05 mg·L-1。结论:本方法准确可靠,适用于皮质酮及其代谢产物去氢皮质酮的血药浓度检测。
- 李婉姝钱建畅胡利明徐涛胡国新
- 关键词：高效液相色谱法皮质酮代谢产物血药浓度检测
- 细胞色素P450 2C9药物代谢酶体外酶学活性检测新方法的建立被引量：7
- 2013年
- 目的建立一种基于COS-7细胞的细胞色素P450 2C9(CYP2C9)体外酶学活性检测的新方法。方法以野生型CYP2C9*1基因的全长cDNA为模板,通过定点诱变方法获得突变型CYP2C9*2、*3及*13的cDNA全长,分别与分泌型荧光素酶Gluc内参基因一起导入pIRES载体的A、B多克隆位点,构建成双表达载体pIRES-Gluc-CYP2C9。利用Lipofectamine 2000瞬时转染COS-7细胞,48h后弃培养基,加入含100μmol/L Luciferin-H荧光底物的新鲜培养基,继续培养8h后利用Promega CYP2C9活性试剂盒及NEB Gluc检测试剂盒分别检测CYP2C9各型及内参Gluc的活性,用Western blot检测两种蛋白的表达量。结果本研究成功构建了pIRES-Gluc-CYP2C9*1及其突变体*2、*3、*13的表达载体,通过检测CYP2C9特异性荧光素底物Luciferin-H的分解产物的荧光信号与分泌型荧光素酶Gluc的内参荧光信号的比值作为CYP2C9的体外酶学活性值,研究结果显示突变体CYP2C9*2、*3、*13的体外酶学活性分别为野生型CYP2C9*1的43.12%、8.15%和1.49%。结论本研究成功建立了一种基于COS-7细胞的CYP2C9体外酶学活性检测的新方法,该方法操作简便、实验周期短,适于新突变体CYP2C9的快速活性检测及其代谢新药物或抑制剂的相关性研究。
- 王双虎戴大鹏胡利明耿培武蔡剑平胡国新
- 关键词：CYP2C9BLOT
