范越
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 缺氧对骨髓间充质干细胞肾素血管紧张素系统表达的影响
- 2015年
- 目的肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)参与缺氧心肌损伤过程。文中旨在观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)自身主要反应元件血管紧张素受体1(angiotensin II type 1 receptor,AT1-R)、AT2-R和血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)在缺氧条件下的表达情况。方法分离培养大鼠的MSCs,用倒置相差显微镜观察细胞形态,应用CD29、CD11b/c抗体进行细胞鉴定。实验分为对照组和Hypoxia/SD组:对照组用含10%FBS的L-DMEM培养MSCs,Hypoxia/SD组采用缺氧联合无血清处理24 h诱导缺氧损伤模型。2组分别用锥虫蓝染色、CCK-8检测及流式细胞术,测定细胞活力和凋亡率。应用Real-time Quantitative PCR法检测细胞内AT1-R、AT2-R和ACE的mRNA表达水平;用Western blot检测细胞内AT1-R、AT2-R和ACE蛋白表达的变化。结果 MSCs特异性抗原CD29阳性率>97%,非特异性抗原CD11b/c阳性率<1%,分离培养成功;与对照组相比,Hypoxia/SD组24 h可显著增加MSCs凋亡率[(6.73±0.78)%vs(19.93±4.92)%,P<0.01],降低细胞活力[(78.49±4.94)%vs(37.33±2.91)%,P<0.01]。Hypoxia/SD环境下MSCs自身的RAS主要反应元件AT1-R、AT2-R及ACE的mRNA和蛋白表达量均增加。结论推断缺氧导致MSCs自身RAS激活,从而提高MSCs对缺氧损伤区的心肌修复能力。
- 肖容容高景红范越周露施睿臻李庆平
- 关键词：骨髓间充质干细胞
- 血管紧张素Ⅱ预处理提高骨髓间充质干细胞抗凋亡能力被引量：1
- 2014年
- 目的:研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)预处理是否能提高骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的抗凋亡能力,探讨AngⅡ对MSCs预适应保护作用的可能机制。方法:用AngⅡ预处理大鼠MSCs细胞,采用H2O2或缺氧联合无血清(hypoxia and serum deprivation,Hypoxia/SD)的方法诱导细胞凋亡。用乳酸脱氢酶(lactate dehyarogenase,LDH)检测法、四唑盐比色法(MTT)和Hoechst 33342染色测定细胞活力和凋亡率;用Annexin V-FITC法定量检测细胞凋亡率;对MSCs进行罗丹明-123染色,用流式细胞术检测线粒体跨膜电位。结果:AngⅡ预处理MSCs能够明显减轻H2O2或Hypoxia/SD诱导的细胞损伤,显著提高细胞活力;逆转由Hypoxia/SD引起的线粒体跨膜电位的降低;ERK1/2阻断剂U0126和Akt阻断剂LY294002都能明显减弱AngⅡ对MSCs的预适应保护作用,增加细胞凋亡率。结论:AngⅡ对MSCs具有预适应保护作用,且主要通过Akt、ERK1/2途径发挥其抗凋亡能力。
- 宋奕辰胡亮周露范越黄松花施睿臻李庆平
- 关键词：骨髓间充质干细胞预适应氧化应激凋亡
