蔡海波
- 作品数：94 被引量：149H指数：6
- 供职机构：华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市现代生物与新药产业发展基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 人CD34^+和CD34^-细胞在NOD/SCID小鼠体内的造血重建被引量：1
- 2008年
- 利用非肥胖糖尿病型重症联合免疫缺陷型(NOD/SCID)小鼠模型,比较了新鲜及培养后的CD34+和CD34-细胞在体内植入及重建造血能力。从新鲜脐血及培养后的单个核细胞(MNC)中分离出CD34+和CD34-细胞,经尾静脉输注入经亚致死剂量照射的NOD/SCID小鼠体内,6周后处死存活的小鼠,取其骨髓、脾脏和外周血细胞,分别进行细胞表型分析、造血集落形成单位和人特异性基因的检测。经检测,输注CD34+细胞和混合细胞的小鼠,其体内CD45+细胞及人源各系血细胞的含量相近,两者均远远高于输注CD34-细胞的小鼠。输注培养后CD34-细胞的小鼠饲养6周后全部死亡,输注培养后CD34+细胞的小鼠存活率约为66.7%,而输注培养后混合细胞的小鼠全部存活,且在两组存活的小鼠体内均能检测到CD45+细胞及人源各系血细胞。结果表明:无论是新鲜还是培养后的CD34+细胞均具有在NOD/SCID小鼠体内植入和重建造血能力,而CD34-细胞不具有该能力,但CD34-细胞与CD34+细胞同时输注有助于提高小鼠的存活率,说明其对CD34+细胞在小鼠体内发挥植入和造血重建能力有一定的辅助作用。
- 金慧丽蔡海波杨施谭文松
- 关键词：CD34^+细胞NOD/SCID小鼠
- CD34^＋细胞体外诱导的肝样细胞在小鼠体内修复受损肝组织的研究
- 2009年
- 目的研究CD34+细胞体外诱导的肝样细胞在小鼠体内修复受损肝组织的作用。方法采用密度梯度离心法分离脐血中的单个核细胞并获得富集CD34+细胞,调整细胞密度为1×105个/mL,使用含干细胞生长因子(stemcel lfactor,SCF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、EGF、抑瘤素M(oncostatinM,OSM)和bFGF的无血清培养基(5种细胞因子浓度分别为50、20、20、10、10ng/mL)体外诱导10d。取6周龄雌性ICR小鼠48只,以二乙酰氟氨和CCl4注射制备肝损伤模型。将小鼠随机分为实验组和对照组(n=24),实验组将诱导后细胞(1.6×105个/只,含CD34+细胞1×104个)通过尾静脉注射入肝损伤小鼠体内,对照组注射等量无血清培养基,术后7、14、21、28d两组分别处死6只小鼠,行HE染色、PCR凝胶电泳、免疫组织化学染色及肝功能检测。结果HE染色显示,对照组术后28d时肝组织形态恢复正常,实验组术后14d时即已恢复正常。PCR凝胶电泳和免疫组织化学染色结果显示,实验组术后各个时间点在肝组织中均可检测到表达人血清白蛋白的细胞,而对照组术后28d内均未检测到。肝功能检测结果显示,对照组术后14d时谷丙转氨酶活性恢复正常,实验组小鼠术后7d时即已恢复正常;但两组谷草转氨酶活性在28d内均未恢复。结论CD34+细胞经体外向肝细胞方向诱导分化后,能在肝损伤的小鼠体内促进受损肝组织形态和功能的恢复,并能在小鼠受损肝脏中转化为人源肝细胞。
- 鄢玲莉蔡海波陈袆祺谭文松
- 关键词：CD34^+细胞肝样细胞体外诱导ICR小鼠
- 重组大肠杆菌HT02高密度高表达HT-1融合蛋白发酵过程优化被引量：5
- 2009年
- 发酵工艺放大是将实验室成果产业化的必要一环,随着发酵规模的扩大,工艺流程也会有相应的调整,导致微生物所处的生长环境以及生长代谢状态的改变,从而影响大体积发酵罐的发酵水平。本文以一株产HT-1融合蛋白的重组大肠杆菌HT02为研究对象,在200L发酵罐中研究了分批补料培养时菌体生长与HT-1融合蛋白表达的特性,通过采用提前诱导、增加接种量的手段,解决了因增加二级种子培养工艺而导致的200L发酵罐中HT-1融合蛋白表达水平下降的问题,最终使菌体密度、HT-1融合蛋白表达水平、融合蛋白细胞得率以及融合蛋白体积得率分别达到55.1g·L-1、27.4%、0.056g·(gcell)-1和3.103g·L-1,较工艺改进前发酵水平分别提高了9.8%、23.4%、14.3%和25.2%,实现了在200L发酵罐中高密度高表达发酵,为HT-1工业化生产提供了指导。
- 胡爽蔡海波蒋加庆谭文松
- 关键词：重组大肠杆菌高密度发酵
- 影响脐血造血细胞体外培养与检测的因素被引量：4
- 1999年
- 考察了分离方法、血浆（血清）、渗透压、细胞因子的保存等因素对脐血造血细胞体外培养和检测的影响。结果表明，用明胶沉降加密度梯度离心分离两步法分离比传统方法能分离到更多的单个核细胞；混合脐血血浆比胎牛血清更能支持造血细胞的生长；高渗透压对集落形成有一定影响，而低渗透压对集落形成更为有害；在３７°Ｃ下保存细胞因子，其生物活性下降最快，－３０°Ｃ冷冻保藏较好地保持其活性，解冻次数对生物活性影响不显著。
- 张孝兵蔡海波谭文松俞俊棠
- 关键词：造血干细胞脐血体外培养CFU
- 由脐带血造血干细胞体外诱导肝细胞生成的方法
- 本发明涉及一种体外诱导生成肝细胞的方法，公开了一种由脐带血造血干细胞体外诱导生成肝细胞的方法。包括如下步骤：将脐带血单个核或CD34<Sup>+</Sup>细胞接种至含有胎牛血清以及人干细胞因子(SCF)、人白细胞介素3...
- 蔡海波谭文松金颖陈祎祺
- 文献传递
- 由脐血单个核细胞和富集的CD34^＋细胞扩增的造血干／祖细胞的生理功能比较被引量：1
- 2008年
- 目的 探讨由脐血单个核细胞（MNC）和富集的CD34^＋细胞起始扩增所得的造血干／祖细胞在体内植入及造血重建的能力。方法 从人脐血中分离出MNC和CD34^＋细胞，在体外扩增7d。将非肥胖糖尿病型重症联合免疫缺陷型（NOD／SCID）／小鼠分为四组，在接受亚致死剂量铯源照射后，进行细胞移植，实验A组接受由MNC培养得到的CD34^＋细胞和CD34^-细胞；实验B组接受由富集的CD34^＋细胞培养得到的CD34^＋细胞和CD34^-细胞；阳性对照组接受从脐血新鲜分离的CD34^＋细胞和CD34^-细胞；阴性对照组不接受细胞移植，仅输注相同体积的IMDM培养基。6周后处死存活的小鼠，取其骨髓、脾脏和外周血细胞，分别进行细胞表型分析、集落和人特异性基因的检测。结果 经过体外扩增，以富集的CD34^＋细胞起始培养者的细胞总扩增倍数为39．8倍，远高于以MNC为起始细胞者的1．88倍。移植6周后，所有接受细胞移植的小鼠均存活，存活小鼠的骨髓和脾脏细胞中均能检测到人源细胞（CD45^＋细胞）及人源的各系血细胞，实验A组各类细胞的含量稍高于实验B组，且接受细胞移植小鼠的骨髓和脾脏细胞中可检测出人特异的Alu序列。结论与从脐血中新鲜分离的细胞相比，扩增后的造血干／祖细胞的体内植入能力有所下降，以MNC起始扩增的造血干／祖细胞体内植入能力优于以富集的CD34^＋细胞起始扩增者，但二者体内造血重建能力的差异不显著。
- 金慧丽蔡海波杨施谭文松
- 关键词：脐血干细胞移植细胞培养技术
- 负载EGCG纳米颗粒的壳聚糖-海藻酸钠复合支架及其制备方法
- 本申请发明公开了一种负载EGCG纳米颗粒的壳聚糖‑海藻酸钠复合支架及其制备方法，该支架由壳聚糖、海藻酸钠以及包载EGCG的壳聚糖纳米颗粒组成。该支架具有很好的EGCG缓释性，较大的孔隙度有利于细胞的贴附。有效提高EGCG...
- 蔡海波王进谭文松
- 文献传递
- 层流流体剪切力对脐血CD34^+细胞体外扩增的影响
- 2008年
- 目的本实验系在考察层流剪切力对脐血CD34+细胞体外扩增的影响作用。方法从脐血中分离出CD34+细胞,接种入实验室自制的层流剪切力实验装置中,在不同大小的层流流体剪切力(0.5,1,2,4dyn/cm2)加载下进行体外扩增培养。结果较小的层流剪切力(0.5,1dyn/cm2)可促进造血干/祖细胞扩增,有利于早期造血干/祖细胞的维持,并能促进更多的细胞由G0/G1期进入S期;较大的层流剪切力(2,4dyn/cm2)抑制了造血干/祖细胞的扩增,导致其迅速分化;并使S期细胞的比例减小。结论在生物反应器体外扩增培养脐血CD34+细胞时,其层流流体剪切力应控制在1dyn/cm2范围内。
- 景强蔡海波谭文松
- 关键词：脐血CD34+细胞体外扩增
- 胆固醇酶电极的研制
- 蔡海波
- 关键词：胆固醇
- MNC与CD34+细胞起始培养的造血干细胞体内生理功能的比较
- ＜正＞大量文献报道经体外扩增后的造血干/祖细胞在生理功能上会发生一些变化,影响其在体内的长期重建造血能力。在体外扩增的研究中,常用脐血单个核细胞（MNC）和纯化的CD34+细胞作为扩增造血干／祖细胞的起始细胞。单个核细胞...
- 金慧丽杨施蔡海波谭文松
- 文献传递
