袁丽颖
- 作品数:6 被引量:44H指数:3
- 供职机构:吉林大学附属第三幼儿园更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学哲学宗教文化科学更多>>
- 一种融合抗体ScFv-Fc通用表达载体的构建被引量:2
- 2011年
- 为了构建一个可供自由替换的ScFv区,表达人小分子融合抗体ScFv-Fc的通用载体,利用RT-PCR技术扩增人抗体IgG1的Fc片段克隆至毕赤酵母表达载体pPICZα,将一段人工合成的互补寡核苷酸链插入重组载体pPICZα/Fc中Fc区的上游,引入2个可供小分子抗体ScFv-Fc的ScFv区自由替换的限制性酶切位点。分别扩增人抗狂犬病毒以及抗乙型肝炎表面抗原的ScFv片段,克隆至已构建的通用载体pPICZα/Fc,在毕赤酵母中诱导表达。进一步在1L条件下对活性抗体进行发酵,并利用proteinA亲和层析柱进行纯化。应用酵母基因组PCR、ELISA、Western blotting、活性检测等试验对此小分子抗体的表达进行生物学及免疫学分析。结果表明具有狂犬病毒抗原结合活性以及乙肝表面抗原结合活性的人源抗体分子均获得成功表达,1L发酵条件下表达量达到20~30mg/L,protein A亲和层析纯化后纯度>95%。研究构建了可用于功能性抗体分子ScFv-Fc筛选和表达的通用载体并对其发酵、纯化条件进行了摸索,为重组抗体分子诊断、治疗试剂的开发以及抗体的人源化奠定了物质基础。
- 王丁丁苏曼曼胡丽莉袁丽颖孙艳汪炬颜炜群
- 关键词:毕赤酵母
- 重组人小分子抗体ScFv-Fc发酵条件的优化及纯化
- 2011年
- 目的:研究重组人小分子抗体ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件,以及ScFv-Fc的纯化方法。方法:分别从甲醇浓度、pH、诱导时间等方面对毕赤酵母重组菌株产生ScFv-Fc的发酵过程进行了优化;通过硫酸铵沉淀结合protein A亲和层析柱,对ScFv-Fc的纯化方法进行了研究。结果:确定ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件为:在pH5.2的条件下,以0.5%甲醇诱导72 h。经过protein A亲和层析柱纯化后,ScFv-Fc纯度可达94%以上。结论:确定了ScFv-Fc在毕赤酵母中分泌表达的最佳条件以及纯化方法,为重组抗体分子诊断、治疗试剂的开发以及抗体的人源化奠定了物质基础。
- 王丁丁苏曼曼胡丽莉袁丽颖颜炜群
- 关键词:毕赤酵母发酵优化纯化
- 经口服超声造影剂联合彩色多普勒超声在胃疾病诊断中的应用价值被引量:23
- 2013年
- 目的探讨经口服超声造影剂联合彩色多普勒超声在胃疾病诊断中的应用价值。方法对132例胃疾病患者口服"胃窗声学造影剂"后进行彩色多普勒超声仪检测,以80例健康人作为对照,检测其胃壁超声声像及胃壁厚度。并将病例组超声检测结果与病理诊断、胃镜诊断结果进行比较分析。结果超声结果显示病例组较正常组胃壁有不同程度的增厚,超声诊断出胃溃疡、胃癌、食道贲门癌、胃腺瘤、胃平滑肌瘤、胃间质瘤和胃淋巴瘤患者共129例,诊断符合率达97.73%,与胃镜诊断结果相比,无显著差异(P>0.05)。结论经口服超声造影剂联合彩色多普勒超声诊断胃部疾病灵活简便,无痛苦无创伤,值得临床推广应用。
- 吴晓丽袁丽颖梅丽
- 关键词:彩色多普勒超声胃疾病
- 缓释型重组人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨修复材料诱导骨形成被引量:11
- 2011年
- 背景:重组人骨形态发生蛋白2在体内半衰期短、易降解代谢,达不到理想的骨再生效果。目的:制备缓释型重组人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨修复材料,并观察其缓释性能、骨诱导活性。方法:将重组人骨形态发生蛋白2与壳聚糖混合制备壳聚糖膜,涂覆于生物骨修复材料表面,ELISA方法检测其体外释药性能。茜素红染色检测缓释型人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨材料、重组人骨形态发生蛋白2生物骨材料、单纯骨填充材料诱导C2C12细胞骨钙蛋白的形成,观察其诱导成骨细胞能力。同时将3种骨修复材料植入清洁级KM小鼠股部肌袋内,2周后检测新生骨Ca2+离子含量,评价其异位骨诱导能力。结果与结论:材料表面的壳聚糖膜分布均匀,负载的重组人骨形态发生蛋白2呈团簇状。重组人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨修复材料体外释药存在突释,前4d释放量达总药量的50%,持续至12d,释药量达到90%,第18天时释放完全。与单纯骨填充材料、重组人骨形态发生蛋白2生物骨材料相比,缓释型人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨修复材料诱导C2C12细胞向成骨晚期分化能力与异位骨形成能力显著增强(P<0.05)。结果提示缓释型人骨形态发生蛋白2/壳聚糖生物骨修复材料缓释性能好,促进骨形成能力强。
- 王丁丁曾戎杨敏儿何鉴贤陈阳何水连陈安安周智优袁丽颖汪炬
- 关键词:人骨形态发生蛋白2壳聚糖缓释骨修复材料骨形成
- 归脾汤加减治疗少女月经先期34例被引量:7
- 2009年
- 目的观察归脾汤加减治疗少女月经先期的临床疗效。方法选择本病34例,以归脾汤为主方加减进行辨证治疗。结果34例中,治愈22例,好转10例,未愈2例,总有效率为94.1%。结论以归脾汤为主方治疗少女月经先期证属心脾两虚、脾不统血型疗效显著。
- 韩鸿雁陶艳玲袁丽颖
- 关键词:心脾两虚脾不统血
- 接受蒙氏教育儿童智力和行为发展追踪调查
- 蒙氏教育法是由意大利著名的教育家玛丽亚·蒙台梭利博士所创。蒙氏教育的任务是激发儿童内在潜力的充分发挥,促进儿童的智力、心理、身体的发展;培养儿童具有主动好学、独立自主、尊重他人、守纪律、互助、自信、负责任等良好的素质;开...
- 袁丽颖
- 关键词:蒙氏教育小学生智力社会能力
- 文献传递