许淑芬
- 作品数：13 被引量：15H指数：2
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- RNAi技术沉默IGFBP-2基因对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨RNA干扰(RNAi)技术沉默胰岛素生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响。方法:构建IGFBP-2序列特异性siRNAs重组表达质粒pSilencerTM2.1-U6 neo-IGFBP-2,转染MCF-7细胞,采用RT-PCR检测重组质粒对IGFBP-2 mRNA表达的影响,MTT法观察重组质粒对MCF-7细胞体外生长的移植作用,流式细胞仪检测重组质粒对MCF-7细胞凋亡的作用。结果:成功构建了pSilencerTM2.1-U6 neo-IGFBP-2重组质粒,并成功转染MCF-7细胞;重组质粒抑制IGFBP-2的mRNA表达近70%,转染重组质粒72 h后MCF-7细胞的增殖活力降低为(55.8±3.7)%,细胞凋亡率为42.55%。结论:重组质粒pSilencerTM2.1-U6 neo-IGFBP-2明显减低IGFBP-2在MCF-7细胞中的表达,抑制MCF-7细胞增殖,促进MCF-7细胞凋亡。
- 许淑芬刘磊方艳秋刘多倪志强候俊杰谭岩
- 关键词：乳腺癌
- 小鼠胚胎试验结合精子存活试验对新建IVF实验室质控的作用
- 目的:通过小鼠胚胎试验和精子存活试实验验结果分析,评估新建IVF实验室系统.方法:1、选择ICR雌性生育期小鼠,孕马血清促性腺激素、人绒毛膜促性腺激素超排,与雄性小鼠合笼饲养,让其自然交配,获受精卵母细胞.随机将受精卵母...
- 许淑芬刘磊孙牧男谭岩
- 重组鼠白细胞介素18在肝癌小鼠体内的抗肿瘤作用
- 2017年
- 目的:探讨不同剂量和输注方式的重组鼠白细胞介素18(rmIL-18)对肝癌小鼠生存时间和肿瘤生长的影响,阐明rmIL-18在体内抗肿瘤的合理应用方式。方法:60只Babl/C小鼠皮下接种小鼠肝癌H22细胞(1×10~6个),随机分为5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组、0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)腹腔内注射治疗组、CTL肿瘤内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组,每组10只。从接种肿瘤细胞的第10天起,各rmIL-18组小鼠每隔1d进行对应剂量和方式的注射治疗,CTL组小鼠分别腹腔和肿瘤内注射肿瘤特异性CTL(1×10~6/只),生理盐水腹腔注射对照组小鼠腹腔内注射注射等体积(100μL)生理盐水,共计10次。每周测量小鼠肿瘤直径,并记录生存时间。结果:与0.5μg、5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组和生理盐水腹腔注射对照组比较,0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度减慢(P<0.01),小鼠生存时间延长(P<0.01);与0.5μg rmIL-18腹腔内注射治疗组比较,CTL腹腔内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低(P<0.01),小鼠存活率升高(P<0.01);与0.5μg rmIL-18肿瘤内注射治疗组比较,CTL肿瘤内注射治疗组小鼠肿瘤生长速度降低(P<0.01),小鼠存活率升高(P<0.01)。结论:rmIL-18抗肿瘤作用的最好途径为瘤内注射,并存在剂量依赖性。
- 方艳秋米旭光李首庆魏海峰许淑芬谭岩
- 关键词：肝肿瘤细胞毒性T淋巴细胞
- ICSI周期中单原核胚胎发育潜能分析
- 刘磊孙牧男许淑芬方艳秋
- CXCL12/CXCR4在小细胞肺癌患者中的表达及临床意义被引量：7
- 2015年
- 目的研究小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者外周血中CXCL12及其受体CXCR4的表达情况,探讨CXCL12/CXCR4与SCLC发生和发展之间的关系。方法采用ELISA、real-time PCR和Westernblot方法,检测CXCL12与CXCR4在30例局限期(Limited stage disease,LD)SCLC患者、32例扩散期(Expensive stage disease,ED)SCLC患者和10例良性肺部肿瘤患者(对照组,Control)中的转录水平和表达水平,分析CXCL12、CXCR4与SCLC患者临床病理等指标之间的关系。结果 CXCL12、CXCR4在SCLC患者组织中均高表达,其中扩散期患者CXCL12、CXCR4表达平略高于局限期患者组。扩散期患者外周血中CXCL12表达高于其在局限期患者中的水平,二者均高于对照组。血清中CXCL12水平与患者的性别和年龄无关(P>0.05),而与肿瘤的大小及淋巴结转移明显相关(P<0.01)。结论 CXCL12/CXCR4可能直接或间接参与对SCLC发生和发展的调控。
- 孙牧男刘磊马寅芙许淑芬方艳秋谭岩
- 关键词：肺癌CXCL12CXCR4
- IGFBP-2在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)在卵巢肿瘤组织中的表达及其与卵巢癌临床病理学特征的关系。方法:选择正常卵巢组织(10例)和卵巢肿瘤组织(卵巢良性肿瘤12例,卵巢交界性肿瘤10例,卵巢癌26例,包括中度和高度分化者12例,低度分化者14例),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测卵巢组织IGFBP-2基因表达情况,Western blotting检测卵巢肿瘤组织IGFBP-2蛋白表达情况。结果:RT-PCR和Western blotting结果显示IGFBP-2在卵巢癌的表达明显升高(P<0.05),且随着卵巢癌组织分化程度的降低IGFBP-2的表达增强。结论:卵巢癌患者IGFBP-2表达与临床病理学特征有明显的相关性,可作为卵巢癌患者预后判断的标志。
- 许淑芬刘磊方艳秋刘多倪志强候俊杰谭岩
- 关键词：胰岛素样生长因子结合蛋白2逆转录-聚合酶链反应蛋白印迹
- 长链非编码RNAs在人类疾病及机体发育中的作用及机制
- 2013年
- 非编码RNAs（non-coding RNAs,ncRNAs）,包括以miRNA、siRNA和piRNA等为代表的短小RNA和长链非编码RNAs （long non-coding RNAs,lncRNAs）.近20年来,ncRNAs的发现和功能研究,大大改变了人们对RNA分子的认识.ncRNAs不仅承担了遗传信息中间载体的辅助性角色,而且在发育和基因表达调控中发挥着复杂而精确的功能[1].目前,关于ncRNAs在疾病发生、发展和防治中的作用已有大量文献报导,研究主要集中于短ncRNAs在肿瘤、自身免疫病等疾病中的表达和调控作用[2].虽然关于lncRNAs与疾病之间关联的研究还处于起步阶段,但其调控作用已经开始引起人们广泛的关注.
- 孙牧男许淑芬方艳秋谭岩
- 关键词：RNAS人类疾病长链基因表达调控MIRNA
- 顺铂通过抑制RIP活性增强rhTRAIL杀伤肺癌A549细胞被引量：1
- 2016年
- 目的探讨顺铂(DDP)通过抑制受体相互作用蛋白(RIP)增强肺癌细胞A549对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的分子机制。方法 Western印迹检测顺铂、Nec-1作用A549细胞后RIP的蛋白表达。MTT法检测联合应用DDP+rh TRAIL和Nec-1+rh TRAIL作用后A549细胞的生长抑制率。Western印迹检测DDP+rh TRAIL和Nec-1+rh TRAIL对A549凋亡相关蛋白caspase-8的活化情况。流式细胞仪检测DDP+rh TRAIL和Nec-1+rh TRAIL作用后对A549细胞凋亡的影响。结果 DDP和Nec-1能显著降低A549细胞中RIP的蛋白水平,DDP、Nec-1联合rh TRAIL可以实现caspase-8的活化,促进rh TRAIL对A549细胞的杀伤作用,凋亡率从(5.9±4.93)%提高到(60.5±4.93)%和(64.1±5.17)%(P<0.01)。抑制率分别提高到(65.5±4.93)%和(76.3±9.52)%(P<0.01)。结论抑制RIP蛋白活性能增加A549细胞对rh TRAIL诱导细胞凋亡的敏感性,有利于促进rh TRAIL蛋白在治疗NSCLC方面的应用。
- 许淑芬王英凯刘磊孙牧男谭岩方艳秋
- 关键词：受体相互作用蛋白顺铂非小细胞肺癌
- 短时IVF受精失败及因素分析
- 孙牧男许淑芬方艳秋刘磊
- 胰岛素生长因子结合蛋白-2 siRNA表达载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的构建针对胰岛素生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,研究载体介导的RNAi技术对人U251脑胶质瘤细胞株中IGFBP-2表达的抑制作用。方法根据GenBank提供的IGFBP-2基因(NM-000597)核苷酸序列及siRNA的设计原则,设计合成4对带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点的发夹结构寡核苷酸序列,筛选得到576~594 nt、908~926 nt、938~956 nt 3个19 bp片段靶序列,同时随机组合出一条无关序列,应用限制性内切酶酶切和测序技术鉴定重组克隆。用脂质体介导转染人U251胶质瘤细胞株,采用RT-PCR和Western印迹方法检测细胞IGFBP-2 mRNA和蛋白表达。结果酶切筛选得到4个目的片段的阳性克隆,测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR和Western印迹检测显示构建的siRNA表达载体可显著降低U251细胞中IGFBP-2 mRNA和蛋白表达水平。结论成功构建载体介导的IGFBP-2靶向RNA干扰重组体,并能有效抑制U251细胞中IGFBP-2基因的表达。
- 许淑芬王英凯刘磊孙牧男马寅芙方艳秋谭岩
- 关键词：RNA干扰脑胶质瘤细胞
