- 壳聚糖纳米粒介导的hTERTp-TK//GCV靶向抗肝癌研究
- 壳聚糖/(Chitosan,Ch/)作为自然界中唯一的天然阳离子多糖,对DNA有很好的结合和保护作用,对生物体无毒、相容性好、可修饰性,本身具有一定的抑制微生物和抗癌作用,而且具有资源丰富、又可再生、生物降解等特点。作为...
- 贾静
- 关键词：靶向基因治疗HTERT启动子自杀基因
- 文献传递
- 人端粒酶逆转录酶-双自杀基因对肝癌的靶向杀伤作用被引量：1
- 2009年
- 目前联合基因治疗最常用的是有单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV—TK）和大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶（CD）。同时，肿瘤的基因治疗要求导入的自杀基因表达严格限制于靶细胞（肿瘤细胞），而对正常细胞的生长无影响，因此寻找肿瘤细胞的靶点成为亟待解决的现实问题。端粒酶是维持端粒长度的一种逆转录酶，对细胞增殖、衰老及永生化和癌变超重要作用。
- 刘京龙邓志华杨长青刘燕贾静郭素雅杨强撖绍锦李倩倩郎伟宁
- 关键词：人端粒酶逆转录酶双自杀基因靶向杀伤作用单纯疱疹病毒胸苷激酶联合基因治疗肝癌
- Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌腹水抑制效应的实验研究
- 2010年
- 目的:探讨由人端粒酶逆转录酶启动子驱动单纯疱疹病毒胸腺激酶基因的重组腺病毒,联合更昔洛韦(GCV)对肝细胞癌腹水生成的影响。方法:将H22细胞注入小鼠腹腔建立肝癌腹水瘤模型,并通过观察各组小鼠体质量、腹围、腹水量、生存时间、脏器及细胞凋亡率等指标的差异,揭示Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌腹水的治疗作用。结果:经过Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV治疗的小鼠,显示出明显的腹水抑制作用,其腹水量显著低于各对照组(P<0.01),生存时间延长(P<0.01),细胞凋亡率提高(P<0.01),并且无明显毒副反应。而单独使用Ad-hTERTp-HSV-TK和GCV对腹水生成无明显作用。结论:Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统对肝癌细胞有较强的靶向杀伤作用,治疗肝癌腹水效果显著,对其临床应用具有理论意义。
- 杨强邓志华刘燕贾静郭素雅刘京龙
- 关键词：胸苷激酶腺病毒科基因疗法腹水
- 大肠腺瘤伴鸡皮样黏膜改变与腺瘤癌变的关系
- 2022年
- 研究伴鸡皮样黏膜(CSM)改变特点,分析与大肠腺瘤与腺瘤癌变之间的关联性情况,为临床疾病研究工作开展提供参考。方法:使用免疫组化法检测代表细胞增殖的标志物PCNA和细胞凋亡相关因子BCL-2在四种组织中的表达情况。分别检测术前及术后伴CSM的大肠腺瘤组及不伴CSM的大肠腺瘤组肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、癌抗原72-4(CA72-4)、糖链抗原19-9(CA19-9)及癌抗原242(CA242)的值。结果:免疫组化结果显示PCNA和BCL-2在正常大肠黏膜、不伴CSM与伴CSM的大肠腺瘤、大肠腺癌中表达递增。伴CSM的大肠腺瘤与大肠腺癌组织间阳性率情况进行对比分析,数据差异性并不明显、无统计学意义,P>0.05。伴CSM的大肠腺瘤与不伴CSM的大肠腺瘤比较后发现,数据对比的差异显著、有统计学意义P<0.05,正常大肠黏膜与伴CSM的大肠腺瘤、大肠腺癌组织间数据进行比较后发现,数据差异显著、有统计学意义P<0.05。CEA值在不伴CSM的大肠腺瘤组中术前与术后进行比较后发现,数据差异显著,P<0.05。另外,进行了CA72-4、CA19-9、CA242值进行比较,术前、术后数据接近,差异并无显著性,P>0.05。四种肿瘤标记物在伴CSM的大肠腺瘤组中,术前与术后数据进行比较后发现,差异明显、有统计学意义(P<0.05)。术前肿瘤标记物在不伴CSM的大肠腺瘤组与伴CSM的大肠腺瘤组相比,CEA与CA19-9的差异明显(P<0.05),CA72-4与CA242的差异无显著性(P>0.05)。结论:伴CSM的大肠腺瘤组织有癌变倾向,可归属于癌前病变,临床上一经发现应尽早切除,且需扩大腺瘤的切除范围即进一步行ESD治疗,并加强随访。
- 贾静薛玲珑马晓雷杨玉清邢雪
- 关键词：大肠腺瘤癌变肿瘤标志物
- 雌激素对去卵巢大鼠下颌下腺血管活性肠肽VIP及功能的影响
- 2021年
- 目的:探讨雌激素对下颌下腺中VIP及其受体表达的影响,并观察功能指标α-唾液淀粉酶的变化。方法:雌性SD大鼠设置假手术组(SHAM),去卵巢组(OVX),去卵巢后雌激素干预组(OVX+E),实施假手术和卵巢切除术,构建围绝经期动物模型。手术后两周,SHAM组和OVX组腹腔注射芝麻油,OVX+E组腹腔注射17β-雌二醇,持续4周。应用放射免疫法检测大鼠血清雌二醇含量,免疫组化和免疫印迹法观察下颌下腺VIP和VPAC1的表达,活性检测试剂盒微量法测定下颌下腺α-唾液淀粉酶活性。结果:OVX组血清17β-雌二醇含量较SHAM组显著降低(P<0.05),OVX+E组血清17β-雌二醇含量与SHAM组无明显差异(P>0.05),证实围绝经期动物模型构建成功。免疫组化和免疫印迹结果显示,OVX组VIP和VPAC1表达较SHAM组明显减少(P<0.05),OVX+E组表达恢复至SHAM组水平(P>0.05)。微量法活性检测显示OVX组α-唾液淀粉酶活性较SHAM组显著降低(P<0.05),OVX+E组活性升高至SHAM组水平(P>0.05)。结论:雌激素水平与下颌下腺中VIP、VPAC1的表达呈正相关,可能通过对VIP及VPAC1的调控影响功能指标α-唾液淀粉酶活性。
- 罗小凤秦丽华达云萌白芸孙艳荣王子月贾静
- 关键词：雌激素血管活性肠肽
- 重组腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK／GCV系统对小鼠肝癌腹腔种植腹腔积液生成的影响
- 2010年
- 目的研究重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV，TK／GCV系统对小鼠肝癌腹腔种植腹腔积液生成的影响及其作用机制。方法SX，近交系小鼠腹腔内接种肝癌H22细胞株后，随机分为四组，48h后分别给予相应的治疗。观察各组小鼠腹腔积液及生存时间的变化；流式细胞术测定肿瘤细胞凋亡百分率；透射电镜观察腹腔内肿瘤细胞的形态学变化。结果与Ad-hTERTp—HSV-TK组、GCV组和空白对照组三组相比，Ad—hTERTp—HSV—TK／GCV组可以显著抑制小鼠腹腔积液的生成（P〈0．01），延长生存期（P〈0．01），肿瘤细胞凋亡率为（27．12±2．12）％明显高于其他各组（P〈0．01），并且在治疗期间未发现明显不良反应。结论Ad—hTERTp—HSV—TK／GCV系统可通过诱导肝癌细胞凋亡而抑制小鼠腹腔积液生成，并延长生存期，是一种安全可行的治疗方法。
- 杨强邓志华刘燕贾静郭素雅刘京龙
- 关键词：胸苷激酶腹腔积液
- 重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK载体的构建及抗肝癌实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建hTERT启动子调控的HSV—TK基因重组腺病毒载体系统，观察Ad—hTERTp—HSV-TK／GCV自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用。方法将穿梭质粒pSU-Tp-TK与腺病毒骨架质粒pBHGE3共转导至HEK293细胞，利用细胞内同源重组法构建出hTERT启动子调控的携带TK基因的复制缺陷型腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK载体系统；将不同感染复数（MOI=1、10、100、1000）的重组腺病毒Ad—hTERTp—HSV—TK感染肝癌细胞HepG2及正常肝细胞L-02，加入不同浓度的GCV（0、1、10、100、1000ug／ml），MTT、法检测细胞活性。结果HEK293细胞出现病毒空斑，提取病毒DNA，经PCR鉴定正确后扩增、纯化，滴度为1．5×10^10pfu／ml；MTT法检测到Ad—hTERTp—HSV-TK／GCV能靶向杀死肝癌细胞HepG2，且细胞存活率随着病毒滴度和GCV浓度的增加而降低。结论该实验构建的Ad—hTERTp—HSV—TK载体系统，可靶向抑制肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L-02几乎无影响。
- 刘燕邓志华杨长青刘京龙贾静郭素雅杨强
- 关键词：HTERT启动子胸苷激酶
- 大柴胡汤加减联合乌司他丁治疗急性胰腺炎的临床观察被引量：1
- 2018年
- 急性胰腺炎是临床常见病，临床主要症状表现为上腹痛、发热、恶心、血胰酶增高等，病情发展较快，可逐渐引起胰腺组织自身消化、水肿、出血甚至坏死，威胁患者的生命安全[1]。笔者临床采用大柴胡汤加减联合乌司他丁治疗本病，取得了显著的效果，降低了疾病死亡率，现报道如下。
- 贾静
- 关键词：急性胰腺炎大柴胡汤乌司他丁
- 重组腺病毒Ad-hTERTp-HSV-TK/GCV系统的构建及其对人肝癌细胞HepG2的杀伤作用及旁观者效应研究被引量：4
- 2009年
- 背景与目的:肝癌的基因治疗已成为肝癌治疗的重要发展方向,本文探讨Ad-hTERTP-HSV-TK/GCV系统对人肝癌细胞株HepG2的杀伤作用;并观察其过程中旁观者效应的作用。方法:用重组腺病毒Ad-hTERTP-HSV-TK系统分别感染肝癌细胞株HepG2和正常肝细胞L-02,加入前体药物更昔洛韦(GCV),四甲基偶氮唑盐比色法检测其对感染后细胞的杀伤作用;将感染后的TK阳性HepG2细胞和未感染的TK阴性HepG2细胞按不同比例浓度(0∶10、1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2、9∶1、10∶0)混合,观察其旁观者效应。结果:肝癌细胞HepG2的存活率随病毒感染复数(MOI)和GCV浓度增加而逐渐降低,L-02细胞无明显变化。旁观者效应表明,在TK阳性HepG2细胞为10%时,细胞抑制率达28.06%,70%时达90.44%。结论:重组腺病Ad-hTERTP-HSV-tk/GCV系统对肝癌细胞HepG2有选择性杀伤作用及明显的旁观者效应。
- 刘燕邓志华杨长青刘京龙贾静郭素雅杨强
- 关键词：重组腺病毒载体HTERT启动子自杀基因
- 壳聚糖纳米粒介导的人类端粒酶反转录酶启动子连接的自杀基因耦联更昔洛韦靶向抗肝癌研究被引量：6
- 2011年
- 目的比较壳聚糖（Ch）与半乳糖化壳聚糖（GC）纳米载体对肝癌细胞的转染效果；观察转染后的人类端粒酶反转录酶启动子连接的自杀基因（pGL3-hTERTp—TK）对肝癌细胞株HepG2生长及凋亡的影响。方法制备ch及Gc；构建pGL3，hTERTp—TK质粒及ch／DNA和GC／DNA复合物；转染HepG2细胞和正常肝细胞L-02；通过单光子液闪计数仪观察转染效率；流式细胞术（FCM）、Caspase-3万法观察自杀基因对肝癌细胞生长和凋亡的影响。结果质粒经酶切及电泳后在琼脂糖凝胶上出现300bp与1100bp两个清晰条带；在HepG2中，由Gc介导的pGL3-hTERTp．Luc^＋荧光素相对活性表达明显高于ch介导的pGL3-hTERTp—Luc^＋，但比去唾液酸糖蛋白（AF）介导的pGL3．hTERTp—Luc^＋低，而在正常肝细胞荧光素相对活性表达极低；治疗质粒Gc介导的pGL3-hTERTp—TK转染的HepG2细胞抑制率和L-02细胞抑制率，在前体药物更昔洛韦（GCV）的浓度为10μg／ml时差异有统计学意义（t=51．40，P=0．000）。HepG2细胞组GC—pGL3-hTERTp—TK凋亡率为65．28％，明显高于其他组（LSD法，均P〈0．05）。L-02细胞组GC—pGL3-hTERTp—TK凋亡率仅为10．R0％，明显低于对照组Ch—pGL3-control（LSD法，P=0，000）；FCM检测显示Ch—pGL3-hTERTp—TK转染HepG2细胞后其平均荧光强度为168．02±3．68，Gc—pGL3-hTERTp—TK转染后其平均荧光强度为204．45±3．45，两组差异有统计学意义（t=-12．504，P〈0．05）。结论Gc较ch能提高pGL3-hTERTp—TK质粒对肝癌细胞的转染率，GC—pGL3-hTERTp—TK可以靶向攻击肝癌细胞，对正常肝细胞几乎无影响。
- 贾静邓志华刘燕
- 关键词：靶向基因治疗基因
