赵小霞
- 作品数：13 被引量：37H指数：4
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- 强力天麻杜仲胶囊活性成分的提取及其作用机制研究
- 强力天麻杜仲胶囊由天麻、杜仲(盐制)、制草乌、附子(制)等组成,可散风活血,舒筋止痛,用于中风引起的筋脉掣痛,肢体麻木,行走不便,腰腿酸痛,头痛头昏等,是卫生部批准的国家中药保护产品。目前,因其制备工艺简陋,现售药物内杂...
- 赵小霞
- 关键词：强力天麻杜仲胶囊活性成分镇痛T细胞巨噬细胞
- 文献传递
- 大肠杆菌麦芽糖结合蛋白非特异性活化T细胞及其对血液肿瘤细胞作用机制研究
- 在现代分子克隆中，人们普遍认为大肠杆菌麦芽糖结合蛋白（maltose bindingprotein, MBP）无生物学活性或具有较低的生物学活性，故将其作为分子生物学常用的标签蛋白。各种实验性病原菌和病毒的亚单位疫苗即利...
- 赵小霞
- 关键词：MBP免疫增强作用TH1细胞血液肿瘤TLRS
- 文献传递
- 利用小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型观察MUC1-MBP抗乳腺癌作用被引量：4
- 2010年
- 目的建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,探讨MUC1-MBP蛋白疫苗的抗人乳腺癌作用。方法首先通过筛选最佳条件建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤动物模型,HE染色和免疫组化鉴定。利用已经建立的乳腺癌动物模型,通过肿瘤预防实验和治疗实验,观察MUC1-MBP抗人乳腺癌作用。结果通过5 Gy X射线照射,皮下注射MCF-7人乳腺癌细胞3×10~6个/只,FTY720灌胃4～6 d,成功建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤动物模型。在预防乳腺癌生长实验中,PBS对照组、MBP组和MUC1-MBP组小鼠成瘤率分别为100%、83%和67%,肿瘤平均体积分别为(91.9±56.3)mm^3、(22.3±21.5)mm^3和(17.2±18.0)mm^3。与对照组相比,MUC1-MBP组显著减小(P<0.001),MBP组明显减小(P<0.05),提示MUC1-MBP能明显预防乳腺癌生长,MBP对乳腺癌生长也有一定的预防作用。在治疗乳腺癌生长实验中,PBS对照组、MBP组和MUC1-MBP组小鼠肿瘤生长抑制率分别为0、17%和17%,肿瘤平均体积分别为:(101.7±73.6)mm^3、(56.9±56.7)mm^3和(32.6±32.3)mm^3,与对照组相比,MUC1-MBP组明显减小(P<0.05),差异显著,提示MUC1-MBP对乳腺癌具有治疗作用。MBP组无显著差异(P>0.05),无统计学意义,提示MUC1-MBP对乳腺癌具有治疗作用。肿瘤组织HE染色结果发现,MUC1-MBP和MBP免疫组小鼠肿瘤组织周围及癌细胞间淋巴细胞浸润较PBS组明显增多。结论成功建立ICR小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,该模型为肿瘤疫苗活性研究提供良好的研究工具。利用该模型发现MUC1-MBP免疫明显抑制小鼠皮下人乳腺癌的生长,MBP免疫也具有一定的抗乳腺癌生长作用,其能明显增强MUC1的免疫原性。
- 宋献美方芳马吉春赵小霞周静台桂香
- 关键词：人乳腺癌肿瘤疫苗
- 基因工程鼠Muc1-MBP融合蛋白的制备及其免疫活性测定被引量：3
- 2009年
- 目的：制备鼠Muc1-MBP融合蛋白,探讨其免疫活性。方法：将pMAL-Muc1转化大肠杆菌,通过IPTG诱导、SDS-PAGE和Western blot鉴定Muc1的表达,Amylose resin亲和层析纯化Muc1-MBP。将Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清Muc1特异性抗体的水平;MTT法测定小鼠抗Muc1特异的CTL活性;ELISPOT法测定脾脏淋巴细胞IFN-γ的分泌。结果：获得稳定表达Muc1的菌株,制备了分子量67 kD较纯的Muc1-MBP融合蛋白。Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠产生高效价Muc1特异抗体,效价在8 000~16 000之间,Muc1-MBP融合蛋白可诱导CTL杀伤活性,对人乳腺癌MCF-7和小鼠Lewis肺癌LLC1靶细胞的杀伤率分别为（74.5±5.9）%和（60.5±10.4）%,与对照组比P〈0.05,差异显著;Muc1-MBP融合蛋白免疫可诱导脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,特异性活化Th1细胞。结论：成功制备重组鼠Muc1-MBP融合蛋白,其不仅能诱导特异体液免疫应答,而且可诱导细胞免疫应答,尤其能诱导对人类MCF-7细胞较小鼠Lewis肺癌LLC1细胞更加强烈的CTL杀伤活性,提示异种同源蛋白疫苗具有比同源蛋白疫苗更好的抗肿瘤作用。
- 方芳马吉春高航赵小霞周静宋献美柳忠辉台桂香
- 关键词：CTL活性肿瘤疫苗
- 农杆菌介导CBF1基因转化安祖花的研究被引量：10
- 2008年
- [目的]为获得耐低温安祖花奠定基础。[方法]利用农杆菌介导CBF1基因侵染安祖花,并研究不同浓度乙酰丁香酮(AS)和侵染时间对转化后安祖花抗性愈伤组织的存活率和抗性芽分化率的影响。[结果]以重组质粒pBI121-CBF1为模板,利用CBF1cDNA全长的引物序列进行PCR扩增,获得约650bp的片段,表明重组质粒构建成功。在抗性培养基上筛选12周后,部分愈伤组织褐化死亡。用100μmol/LAS作为诱导物质时,抗性愈伤组织存活率和抗性芽的分化率较高。农杆菌侵染时间对转化后愈伤组织存活率和抗性芽分化率有一定影响。[结论]当AS浓度为100μmol/L、侵染时间为10min时,抗性愈伤组织的存活率及分化率最高,分别为48.6%和11.46%。
- 周静张晓丰马吉春赵小霞台桂香
- 关键词：安祖花CBF1基因转录因子农杆菌侵染
- 重组人IL2-MUC1融合蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定
- 2008年
- 目的:构建表达人IL2-MUC1融合蛋白的工程菌,为制备新型MUC1疫苗提供实验依据。方法:通过PCR方法钓取人IL-2基因片段,将其克隆入pBS-SK-MUC1重组载体中,再将人IL2-MUC1串联基因片段插入原核表达载体pGEX-4T-1。将重组的pGEX-IL2-MUC1转化大肠杆菌BL-21,通过IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白。结果:经酶切及基因测序证实获得的IL-2基因片段402bp及IL2-MUC1基因片段852bp基因序列正确;构建的pGEX-IL2-MUC1表达载体在BL21大肠杆菌中成功表达GST-IL2-MUC1蛋白,经SDS-PAGE证实其相对分子质量为64000,与理论预期值相符。Western blotting分析表明该表达产物与抗人MUC1多克隆抗体及抗人IL-2单克隆抗体均具有特异性结合能力。结论:成功构建表达人IL2-MUC1融合蛋白的工程菌,为进一步研究以人MUC1为靶点的新型抗肿瘤疫苗奠定基础。
- 周静马吉春赵小霞方芳宋献美柳忠辉台桂香
- 关键词：黏蛋白1白细胞介素2原核表达
- 大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)诱导小鼠Th1细胞的活化作用被引量：9
- 2009年
- 目的:探讨MBP对小鼠T细胞的调节作用。方法:采用淋巴细胞分层液分离小鼠脾脏淋巴细胞,在体外用MBP刺激淋巴细胞,通过MTT法测定淋巴细胞增殖反应;ELISA检测脾细胞培养上清中细胞因子的分泌水平;MBP免疫小鼠后,ELSPOT检测MBP刺激脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞频数;免疫组化检测MBP与T细胞的结合作用。结果:MBP以剂量依赖关系促进小鼠淋巴细胞的增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,轻微抑制IL-4的分泌;ELSPOT检测细胞分泌IFN-γ结果显示,MBP可诱导特异性Th1活化,也可刺激非特异性Th1活化;免疫组化结果显示,抗MBP抗体可与经MBP刺激的淋巴细胞发生反应,阳性细胞占总淋巴细胞的37.7%,当MBP采用1∶2 000抗MBP抗体中和后,再与淋巴细胞反应,结果未见阳性细胞。结论:MBP可作用于淋巴细胞诱导非特异性Th1活化,也可通过免疫诱导大量特异性Th1活化;MBP可作为新的免疫增强剂开发利用。
- 赵小霞马吉春方芳周静宋献美柳忠辉台桂香
- 关键词：麦芽糖结合蛋白TH1细胞细胞免疫应答
- 强力天麻杜仲胶囊对小鼠脾细胞活性的调节
- 2009年
- 目的研究强力天麻杜仲胶囊对小鼠脾细胞活性的影响。方法将400、800和1600mg/kg强力天麻杜仲胶囊灌胃小鼠,1次/d,连续2w。通过淋巴细胞转化试验检测ConA诱导的T淋巴细胞增殖能力;采用ELISA测定脾细胞IL-2、IL-4、IFN-γ及TNF-α分泌水平。结果强力天麻杜仲胶囊低、中、高剂量组T淋巴细胞刺激指数均高于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.05),尤以中剂量组明显(P<0.01);强力天麻杜仲胶囊低、中剂量组脾细胞IL-2、IFN-γ和IL-4分泌水平显著高于对照组(P<0.01),TNF-α的分泌水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论强力天麻杜仲胶囊以剂量依赖关系促进小鼠T细胞增殖,增强Th1和Th2活性,促进小鼠细胞免疫和体液免疫应答,全面提高机体免疫应答能力。
- 周静赵小霞马吉春方芳宋献美柳忠辉台桂香
- 关键词：强力天麻杜仲胶囊T细胞细胞因子
- 强力天麻杜仲胶囊对小鼠巨噬细胞活性的调节作用
- 2008年
- [目的]研究强力天麻杜仲胶囊对小鼠巨噬细胞活性的影响。[方法]将强力天麻杜仲胶囊,连续给小鼠灌胃2周,计数小鼠腹腔巨噬细胞总数。采用ELISA法检测腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β分泌水平;通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验检测小鼠巨噬细胞的吞噬能力。[结果]结果表明,强力天麻杜仲胶囊能够轻度抑制小鼠腹腔巨噬细胞数量,明显降低腹腔巨噬细胞TNF-α和IL-1β的分泌水平和抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。[结论]强力天麻杜仲胶囊可降低小鼠巨噬细胞活性。
- 周静赵小霞马吉春方芳宋献美柳忠辉台桂香
- 关键词：强力天麻杜仲胶囊巨噬细胞
- 黏蛋白1多肽通过small MUC1蛋白抑制肿瘤细胞生长
- 2009年
- 目的:探讨黏蛋白1(mucin1,MUC1)串联重复序列多肽(简称黏蛋白1多肽,MUC1多肽)对肿瘤细胞生长抑制的作用机制。方法:MUC1多肽与多种肿瘤细胞Jurkat、Raji、U937、MCF-7、SMMC7721及活化的T细胞、小鼠巨噬细胞RAW264.7共同培养,观察MUC1多肽对上述细胞生长的影响;建立BABL/c小鼠Jurkat细胞皮下移植瘤动物模型,应用MUC1多肽进行治疗;采用GST免疫沉降实验鉴定与MUC1多肽结合的肿瘤细胞表面蛋白。结果:MUC1多肽对Jurkat、Raji、U937、MCF-7和SMMC7721细胞的生长均有抑制作用,对活化的T细胞和小鼠RAW264.7细胞生长无明显抑制作用。MUC1多肽对BABL/c小鼠皮下Jurkat细胞移植瘤的生长均有明显抑制作用(P<0.05)。GST免疫沉降实验显示,Jurkat和MCF-7细胞裂解上清中与MUC1多肽结合的蛋白可与两种抗MUC1串联重复序列抗体(GP1.4和HMPV)及抗胞内段抗体(Ab5)发生反应,相对分子质量大约115000,提示可能是MUC1新的同种型,命名为smallMUC1(sMUC1)。结论:MUC1多肽可通过与肿瘤细胞表面smallMUC1蛋白的相互作用向细胞传导生长抑制信号。
- 马吉春台桂香赵小霞方芳张庆勇窦蕊陈文博柳忠辉
- 关键词：SMALLMUC1肿瘤细胞
