赵文婧
- 作品数:11 被引量:21H指数:3
- 供职机构:延边大学农学院动物医学系更多>>
- 发文基金:吉林省牧业管理局资助项目吉林省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 小鹅瘟病毒VP3基因的原核表达被引量:2
- 2012年
- 根据GenBank已发表的小鹅瘟病毒B株基因序列,设计并合成1对特异性引物,经PCR扩增得到了1 457bp的目的片段,并将该片段克隆至pMD-18Tsimple载体中,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达质粒pGEX-VP3。经0.1mmol/L IPTG诱导,目的蛋白在大肠杆菌中得到表达。Western-blot分析表明,该蛋白具有良好的反应原性。为开发相应的基因工程疫苗奠定了理论基础。
- 赵文婧鲁承黄京爱王暖成朴相哲
- 关键词:小鹅瘟病毒VP3基因
- 鹅细小病毒三种疫苗对Balb/c小鼠的免疫效果
- 2010年
- 为了研究鹅细小病毒灭活苗、亚单位疫苗、核酸疫苗3种疫苗对Balb/c小鼠的免疫效果,试验自制了这3种疫苗,对Balb/c小鼠进行3次免疫,应用间接ELISA方法测定体液免疫水平。结果表明:用小鹅瘟灭活苗、小鹅瘟VP3基因亚单位疫苗免疫Balb/c小鼠,在三免后第21天抗体的P/N值达到峰值,分别为8.21,3.56;小鹅瘟VP3基因核酸疫苗在三免后第28天,抗体的P/N值达到峰值,为2.09。说明这3种疫苗中小鹅瘟灭活苗对Balb/c小鼠的免疫效果最好。
- 杜秋明鲁承王暖成贾文影赵文婧申峰勇
- 关键词:鹅细小病毒疫苗免疫效果
- 鹅细小病毒单抗双夹心ELISA检测方法的建立被引量:4
- 2011年
- 为建立鹅细小病毒(GPV)检测方法,本研究以免抗GPV IgG为捕获抗体,抗GPV单克隆抗体为检测抗体,通过方阵试验确定了兔抗GPV IgG最适包被浓度为16 mg/L,抗GPV单克隆抗体最佳工作浓度为10.8 mg/L,酶标二抗最佳稀释倍数为1:4 000,建立了检测GPV单抗双夹心ELISA方法,对GPV检测灵敏度达0.312 mg/L。用该法对延边某养鹅场疑似发生小鹅瘟病的252只病死鹅进行检测,结果阳性率为75.79%,与病毒中和试验方法的检测结果符合率达91.11%。本研究建立的单抗双夹心ELISA方法为GPV的检测和区域流行病学调查提供了一种简便快速的血清学诊断方法。
- 杜秋明鲁承王暖成贾文影赵文婧申峰勇
- 关键词:鹅细小病毒单抗双夹心ELISA
- 延边地区布鲁菌bp26基因的克隆、序列分析及蛋白结构预测
- 2012年
- 布鲁菌病(brucellosis)是由布鲁菌引起的人兽共患传染病,家畜牛、羊、猪最常发生,且可传染给人和其他家畜,其特征是生殖器官和胎膜发炎,引起流产、不育和各种组织的局部病灶。本病广泛分布于世界各地,目前在我国人畜间仍有发生,给畜牧业和人类的健康带来严重危害[1]。
- 申峰勇鲁承李闯高建伟赵文婧张颖袁娜丛艳昭
- 关键词:蛋白结构人兽共患传染病克隆生殖器官布鲁菌
- 鹅细小病毒单克隆抗体的制备与鉴定被引量:7
- 2011年
- 为制备鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),利用浓缩的GPV免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术,经间接ELISA方法筛选和有限稀释法克隆后获得一株抗GPV单克隆抗体杂交瘤细胞株4B4。经鉴定,其McAb的重链为IgG1亚型,轻链为κ链。ELISA和Western blotting试验结果表明,获得的4B4株McAb可特异性的识别GPV和GPV-VP3蛋白,表明4B4株McAb识别的表位可能位于GPV VP3蛋白的保守区域。为进一步鉴定GPV的表位和GPV诊断试剂的研究奠定了基础。
- 杜秋明鲁承高建伟赵文婧申峰勇孟其麟
- 关键词:鹅细小病毒单克隆抗体VP3蛋白
- 鹅细小病毒延边株VP1基因真核表达质粒构建及其在Vero细胞中的表达被引量:1
- 2012年
- 根据GenBank已发表的鹅细小病毒(GPV)B株基因序列,设计并合成1对含有Xho I和BamH I酶切位点的特异性引物,以提取的GPV基因组DNA为模板,经PCR扩增得到了1 163 bp的目的片段,并将该片段克隆至pMD-18T simple载体中,再将其亚克隆至真核表达载体pVAX1中,构建重组表达质粒pVAX1-VP1。经PCR鉴定、酶切分析和序列测定比较,证实了重组质粒的正确性。通过脂质体法将pVAX1-VP1转染Vero细胞,经间接荧光抗体检测,在Vero细胞表面可见特异性荧光。经RT-PCR扩增得1 163 bp的目的片段。该研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础。
- 赵文婧鲁承杜秋明高建伟申峰勇张颖李闯袁娜房靖添
- 关键词:鹅细小病毒VP1基因真核表达
- 9个微卫星基因座在东北黑熊养殖群体中的遗传多样性研究
- 2013年
- 选取了黑熊的9个微卫星基因座(ABB1、ABB3、ABB4、ABB5、ABB6、ABB7、ABB10、ABB11、ABB12)进行遗传多样性研究。结果:东北黑熊养殖群体的9个微卫星座位共检测到60个等位基因,平均为6.67个;9个微卫星基因座的平均多态信息含量为0.589 7,其中6个微卫星基因座的多态信息含量(PIC)>0.5,9个微卫星基因座的平均观察杂合度、平均期望杂合度分别为0.536 3、0.625 2。由此证明,9个微卫星标记均具有高度多态性,可用于东北黑熊的遗传多样性分析。
- 高建伟崔正云鲁承崔成都贾文影赵文婧申峰勇刘晓虹
- 关键词:微卫星标记黑熊
- 抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及胶体金诊断试纸条的研制
- 鹅细小病毒病是由鹅细小病毒引起的雏鹅和雏番鸭的一种高度接触性和败血性传染病,主要侵害4-20日龄的雏鹅。该病传播速度快,发病率和死亡率高。死亡率可高达100%,严重危害养鹅业的发展。鹅细小病毒是细小病毒科、细小病毒属成员...
- 赵文婧
- 关键词:鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体
- 文献传递
- 鹅细小病毒vp3基因PCR检测方法的建立及应用被引量:1
- 2012年
- 本试验根据GenBank上发表的鹅细小病毒B株基因序列,针对vp3基因设计并合成了一对特异性引物,建立GPV vp3基因的PCR诊断方法。结果表明,该方法扩增的产物与预期大小相符(约654bp),而其他相关病毒均为阴性反应,敏感度为12.4pg。对15份GPV疑似病例检出的阳性率为100%,而琼脂扩散试验(AGP)检出的阳性率为60%。证明建立的PCR方法特异性强、敏感性高,可用于临床病料的快速诊断。
- 张颖高旭鲁承赵文婧
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因PCR
- 鹅细小病毒YBLJ株VP3基因的真核表达被引量:4
- 2012年
- 为了研究鹅细小病毒(GPV)YBLJ株VP3基因的生物学特性,根据已克隆的GPV YBLJ株VP3基因序列(GenBank:JN836326),设计并合成一对特异性引物,经PCR扩增、克隆、转化、酶切与亚克隆,构建真核表达载体pcDNA-VP3,将鉴定正确的质粒转染至Vero细胞,经RT-PCR检测VP3基因转录水平,通过间接免疫荧光试验(IFA)观察VP3基因表达水平。结果显示,克隆的VP3基因全长约1 605bp,构建了真核表达载体pcDNA-VP3,经RT-PCR对转染细胞总RNA扩增得到特异性目的片段,IFA检测显示VP3基因在Vero细胞中获得了稳定表达。本研究为GPV核酸疫苗的研制奠定了基础。
- 张颖鲁承赵文婧陈海迪高旭
- 关键词:鹅细小病毒VP3基因真核表达