赵汉青
- 作品数：75 被引量：224H指数：9
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程环境科学与工程更多>>
- 肺炎支原体P1黏附因子主要抗原表位的表达及其临床应用研究被引量：2
- 2011年
- 目的探索肺炎支原体（Mycoplasmapneumoniae，Mp）P1蛋白作为抗原成分在临床血清抗体检测中的应用。方法通过生物信息学分析P1基因主要抗原决定簇，选择其分值较高的部位进行原核表达、纯化，并进行Westernblot鉴定，用纯化后的蛋白免疫小鼠，评价其免疫原性，同时用其作为抗原，采用ELISA方法检测肺炎支原体患儿血清抗体并与全菌体抗原进行比较。结果成功构建了pET-28C．P1-534原核表达载体，经表达、纯化后获得了相对分子质量为26×10^3的融合蛋白；Westernblot检测其能与坳阳性血清发生特异性反应；利用纯化的重组蛋白免疫小鼠，能诱导小鼠产生特异性免疫应答，抗体滴度可达1：2000；用此蛋白作为抗原成分检测患儿血清，其敏感性和特异性分别为85．00％及97．67％。结论重组表达的P1—534蛋白具有良好的免疫原性，作为新的抗原成分其敏感性和特异性优于全菌体抗原，为肺炎支原体抗原成分及其蛋白保护作用的研究奠定了基础。
- 薛冠华孙红妹赵汉青王洛平冯燕玲李少丽
- 关键词：肺炎支原体黏附蛋白抗原表达纯化免疫原性
- 314例急性呼吸道感染患儿中肺炎支原体、衣原体病原学监测
- 目的:了解儿科门诊急性呼吸道感染病儿中肺炎支原体、衣原体病原学的情况。方法:随机选择儿内科门诊,临床拟诊小儿急性呼吸道感染的患儿作支原体、衣原体咽拭子nPCR检测。共计314例,男 183例,女131例。男:女为1．39...
- 廖斌曹玲赵汉青孙红妹
- 文献传递
- 解脲支原体血清8型感染小鼠盆腔炎症性疾病模型的建立被引量：9
- 2011年
- 目的:建立解脲支原体阴道感染小鼠盆腔炎症性疾病的动物模型。方法:采用苯甲酸雌二醇预处理,给予Balb/c小鼠阴道接种解脲支原体血清8型感染液制成盆腔炎症性疾病模型,接种后1周及3周检测支原体后处死,取小鼠阴道、宫颈、子宫、输卵管组织常规病理包埋切片观察及检测支原体,并采用流式细胞术对外周血T淋巴细胞亚群进行了分析。结果:造模后小鼠阴道发红,有的分泌物增多,宫颈肥大,子宫及输卵管水肿。阴拭子培养支原体均为阳性。病理切片显示生殖器官4个部位均有明显中性粒细胞浸润。流式细胞术检测显示外周血CD4+/CD8+比值下降,具有统计学意义。结论:雌激素预处理下,解脲支原体阴道接种小鼠可逆行性感染引起宫颈炎、子宫炎、输卵管炎,机体免疫功能下降。此方法可成为盆腔炎症性疾病的成功造模方法之一。
- 刘弘赵红苑贺英潘琳孙红妹赵汉青
- 关键词：解脲支原体小鼠盆腔炎症性疾病
- 肺炎支原体抗体滴度和RNA检测在儿童肺炎支原体肺炎诊疗中的应用价值被引量：13
- 2020年
- 目的:评价肺炎支原体抗体滴度和RNA病原检测在儿童肺炎支原体(Mp)肺炎诊断和治疗过程中的应用价值。方法:采用观察性研究,收集2019年6至11月首都儿科研究所附属儿童医院呼吸内科因社区获得性肺炎住院的患者433例,采用颗粒凝集法检测肺炎支原体抗体滴度,采用RNA实时荧光恒温扩增技术(SAT)测定Mp-RNA,明确支原体肺炎(Mpp)感染和诊疗情况。两种方法阳性率的比较及3种因素(年龄、病程天数、大环内酯类用药)对方法阳性率的影响分析,采用χ^2检验。结果:433例肺炎患者中Mpp组303例,非Mpp组128例,Mpp组抗体滴度阳性率(≥1∶160)79.5%(241/303),Mp-RNA阳性率77.2%(234/303),两种方法诊断价值一致。SAT方法检测Mp-RNA敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为77.2%(234/303),96.1%(123/128),97.9%(234/239),64.1%(123/192)。抗体滴度阳性率(≥1∶160)在长病程组显著高于短病程组(χ^2=93.227,P<0.01),滴度1∶160的天数为(5.89±1.72)d。Mp-RNA阳性率在短病程组显著高于长病程组(χ^2=20.103,P<0.01)。SAT方法检测Mp-RNA可用于治疗效果监测,Mp-RNA阳性患者出院转阴率34.2%(26/76),拷贝数下降率82.9%(63/76)。结论:两种检测方法各有优劣,抗体滴度检测需要正确把握时间窗并做动态监测,SAT检测Mp-RNA应在病程早期、未使用抗菌药物时进行。两种检测方法的联合应用可取长补短、加强优势,为Mpp临床确诊、正规治疗提供有价值的实验室依据。
- 葛梦蕾殷芳赵汉青宋秦伟郭文卉马丽娟
- 关键词：儿童
- 儿科肺炎克雷伯菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因流行现状被引量：5
- 2017年
- 目的了解质粒介导的喹诺酮耐药基因（plasmid-mediated quinolone resistance genes，PMQR）在儿科临床分离肺炎克雷伯菌中的流行情况与分布特点。方法收集首都儿科研究所附属儿童医院临床分离的肺炎克雷伯菌，E-test法及琼脂稀释法测定菌株对不同抗生素的最低抑菌浓度（MIC）；PCR法检测质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrA、qnrB、qnrS、aac（6’）-I b-cr和qepA；PCR扩增后测序检测超广谱B．内酰胺酶（ESBLs）相关基因及染色体喹诺酮耐药决定基因gyrA及parC的突变情况：质粒接合实验检测耐药基因是否在菌株间转移。结果131株肺炎克雷伯菌中，喹诺酮类药物耐药率为9．92％：PMQR基因检出率为30．5％（40／131），其中90％为产ESBLs菌株，各种基因检出率qn培基因6．87％，qnrS基因22．9％，aac（6’）-Ib-cr基因4．58％，未检出qnrA及qepA基因；40株PMQR阳性菌株中，2株存在gyrA和parC编码氨基酸序列改变；23株PMQR阳性菌株通过接合试验传递成功。相对于受体菌，接合子对环丙沙星的MIC提高了2～32倍。结论质粒介导喹诺酮类药物耐药基因在儿科肺炎克雷伯菌中有高水平的携带率，阳性菌株多为产ESBLs株，耐药基因可在菌株问水平传播。
- 薛冠华李少丽闫超冯燕玲赵汉青孙红姝白晓晨
- 关键词：肺炎克雷伯菌超广谱Β-内酰胺酶
- 肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：4
- 2004年
- 目的 得到肺炎支原体主要粘附蛋白 (P1蛋白 )的表达蛋白。材料与方法 用PCR产物限制性片段长度多肽性(RFLP)分析等方法鉴定实验用肺炎支原体菌株。针对P1蛋白基因设计上、下游引物 ,进行PCR扩增。对PCR产物进行回收、纯化 ,克隆入PET - 2 8C(+)表达载体 ,并转化入宿主菌BL2 1。对重组质粒进行酶切及PCR鉴定后 ,IPTG诱导目的蛋白在大肠杆菌BL2 1(DE3)中表达 ,并以Ni-Agarose亲和层析柱纯化。结果 1)本实验所用菌株为肺炎支原体 2型。 2 )经PCR扩增得到预期含有BamHI和XhoI的 5 33bp的目的片段。 3)完成目的基因片段的克隆与表达 ,得到 2 0kDa左右表达蛋白。经诱导阳性质粒的蛋白表达 ,得到较大量纯化的目的蛋白。结论 本研究以国际标准株FH为模板 ,成功获得纯化的近 2 0kDa的P1蛋白片段 ,其大小与目的片段理论值相符 ,且此片段在肺炎支原体 1型与 2型中的基因同源性为 98%。为在基因和蛋白水平进一步研究肺炎支原体P1蛋白成分在肺炎支原体粘附和引起机体免疫反应中的作用机制 ,打下了良好的基础。
- 孙红妹包怡华赵汉青吴建新刘哲伟张霆郭章溉曹玉璞
- 关键词：肺炎支原体P1蛋白抗原决定簇大肠杆菌纯化
- RNA与DNA检测方法在肺炎支原体感染诊断中的应用比较被引量：7
- 2021年
- 目的比较RNA与DNA核酸检测方法在肺炎支原体(MP)感染早期诊断及疗效监测中的应用价值。方法收集2018年1月至12月在首都儿科研究所附属儿童医院呼吸内科住院肺炎患儿的呼吸道标本。采用MP核酸及耐药突变位点检测试剂盒进行DNA检测,采用MP核酸检测试剂盒进行RNA检测。结果进行MP-DNA检测的1994例标本中,阳性检出率为42.1%(840/1994例),其中96.0%(806/840例)的MP阳性标本存在大环内酯类耐药基因突变。进行MP-RNA检测的1624例标本中,阳性检出率为33.9%(551/1624例)。758例标本同时进行了MP-DNA与MP-RNA检测,MP-DNA检测的阳性率为43.1%(327/758例),MP-RNA检测的阳性率为36.7%(278/758例),差异有统计学意义(χ^(2)=6.60,P=0.01)。2种检测方法有613例(80.9%,613/758例)标本的检测结果是一致的,Kappa值为0.604。MP-DNA检测阳性的患儿,1周后复查,MP-DNA转阴率为36.1%(22/91例);MP-RNA检测为阳性的患儿复查,MP-RNA转阴率为70.1%(47/67例),差异有统计学意义(χ^(2)=33.20,P<0.01)。结论2018年北京地区MP阳性检出率依然处于较高水平。MP-DNA与MP-RNA检测方法的检测结果具有较好的一致性,但MP-RNA检测方法更适用于MP感染的早期诊断,可以监测MP转归及药物疗效。
- 赵汉青闫超冯燕玲薛冠华李少丽崔晶花孙红妹袁静
- 关键词：肺炎支原体儿童
- 高胆固醇饮食致兔主动脉粥样硬化及复方羟乙基芦丁的保护作用
- 1998年
- 30只日本大耳白兔（雄性，体重2．5～3kg）分为3组：正常对照组10只，高胆固醇饮食组10只，高胆固醇复方羟乙基芦丁组IO只。喂养12周后处死。观察到服用复方羟乙基芦丁后使主动脉脂质斑块减轻，泡沫细胞减少，平滑肌细胞增生减轻。
- 陈端霞宋福津杨堤阮瑰刘飒赵汉青张越易立张叔伦朱文玲
- 关键词：高胆固醇饮食动脉粥样硬化羟乙基芦丁
- 全文增补中
- 肺炎支原体P1-RFLP分型检测引物及方法
- 一种肺炎支原体P1-RFLP基因分型检测引物及方法，根据已知的Mp两个国际标准株P1基因的RepMP4和RepMP2/3序列，分析其中的HaeIII酶切位点所在区域，在序列中间部位包含酶切位点区域设计相邻的内套引物分别向...
- 孙红妹薛冠华李少丽赵汉青冯燕玲
- 一种检测猴痘病毒的试剂及其应用
- 本发明提供了一种检测猴痘病毒的试剂及其应用。本发明提供的检测猴痘病毒的试剂包括：针对猴痘病毒A27L基因的LAMP检测引物组；和/或针对猴痘病毒F3L基因的LAMP检测引物组。本发明提供的用于检测猴痘病毒的试剂能够实现对...
- 袁静冯俊霞薛冠华闫超崔晶花冯燕玲赵汉青甘霖范政杜冰崔晓虎
