邓恭华
- 作品数：48 被引量：205H指数：10
- 供职机构：中南大学湘雅医学院病理生理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 氧化应激所致C2C12肌源细胞核仁损伤的分子机制被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨氧化应激诱导细胞核仁损伤的分子机制。方法 向传代培养的C2C12肌源细胞中加入0 .5mmol/L过氧化氢以模拟氧化应激。结果 甲苯胺兰染色发现正常C2C12细胞可见一个位于中央的,浓染致密的核仁颗粒。过氧化氢处理后3h ,可见明显的核仁分离,处理6h最为明显。细胞总蛋白质合成能力分析发现过氧化氢处理后6h细胞总蛋白质合成能力显著下降(与正常对照比P <0 .0 5 ) ,并持续至2 4h。免疫印迹检测核仁素(又称C2 3)发现,过氧化氢处理1h后可见一80kDa条带,而其110kDa主带明显减弱,过氧化氢处理6h和12h最为明显。用脂质体将核仁素反义核酸导入细胞后2 4h ,免疫印迹发现核仁素表达明显被抑制,同时也可观察到细胞总蛋白合成能力下降及明显的核仁分离。结论 氧化应激通过诱导核仁蛋白质核仁素的裂解并使其110kDa全长分子的量减少,而导致C2C12细胞核仁损伤。
- 王慷慨邓恭华刘可易宇欣鄂顺梅张玲莉肖献忠
- 关键词：病理学与病理生理学过氧化氢核仁反义核酸
- 膜表面核仁素对脂多糖所致TNF-α和IL-1β表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:观察人THP-1细胞膜表面核仁素对脂多糖(LPS)所致TNF-α和IL-1β表达的影响。方法:采用免疫荧光、免疫印迹等方法观察核仁素在THP-1细胞膜表面表达。利用抗体封闭策略使膜表面核仁素失活,以LPS刺激THP-1细胞的炎症细胞模型,采用逆转录PCR和酶联免疫吸附实验观察炎症因子TNF-α和IL-1β的表达与分泌。结果:免疫荧光结果显示核仁素呈斑点状位于细胞膜表面;免疫印迹检测显示核仁素和Fas存在于THP-1细胞膜蛋白中。逆转录PCR结果显示LPS(1000μg/L)处理1,2,3,4h后,IL-1β和TNF-α mRNA均表达上调,而核仁素抗体封闭明显抑制二者的表达。酶联免疫吸附检测发现,LPS(1mg/L)刺激4,12,24h后,促进THP-1细胞分泌TNF-α和IL-1β,而核仁素抗体封闭显著抑制LPS所致的炎症因子释放(P<0.05)。结论:THP-1细胞膜表面核仁素参与介导LPS所致早期炎症介质IL-1β和TNF-α的表达与分泌。
- 方立王慷慨蒋磊蒋碧梅韦星宋岚邓恭华肖献忠
- 关键词：核仁素脂多糖炎症因子
- 过氧化氢通过线粒体通路和死亡受体通路诱导心肌细胞凋亡被引量：30
- 2003年
- 为探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡的分子机制 ,采用 0 .5mmol L过氧化氢作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞。末端标记发现过氧化氢明显诱导心肌细胞凋亡 ;Caspase活性定量检测及Western blot发现Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9同时被激活 ;而Western blot及间接免疫荧光发现细胞色素C从线粒体释放入胞浆。以上结果提示 ,氧化应激通过同时激活线粒体通路与死亡受体通路导致心肌细胞凋亡 。
- 肖卫民蒋碧梅石永忠刘梅冬唐道林王慷慨张华莉邓恭华肖献忠
- 关键词：心肌缺血心肌再灌注损伤过氧化氢细胞凋亡线粒体信号通路
- 核仁素对大鼠缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡的影响及其机制研究
- 目的:探讨核仁素对大鼠心肌缺血再灌注损伤所致细胞凋亡中的作用及其机制。方法:采用在体大鼠结扎冠状动脉前降支30 min后,松扎再灌注120 min,构建心肌缺血再灌注损伤模型;采用过氧化氢(0.5 mmol/L)处理原代...
- 蒋碧梅张彬邓红兵宋娟涂自智邓恭华肖献忠
- 内毒素对小鼠胸腺细胞凋亡的影响被引量：2
- 1996年
- 为阐明内毒素休克时机体免疫功能的改变提供新的思路,用未成年小鼠观察内毒素对胸腺细胞凋亡的影响。结果表明,内毒素可引起小鼠胸腺重量、胸腺细胞总数和活细胞总数明显减少,胸腺死亡细胞百分率和DNA片断百分率均明显增加,且呈正相关,DNA电泳示胸腺细胞出现典型的"ladder"(梯状)带型,电镜检查可见细胞凋亡特有的形态学变化,流式细胞仪分析示胸腺细胞凋亡百分率明显增加。提示内毒素可引起小鼠胸腺细胞凋亡,其后果与内毒素休克时机体免疫力降低可能有关。
- 王殿华钟林皮业庆邓恭华尤家骤罗正曜
- 关键词：内毒素胸腺细胞凋亡
- 热休克蛋白72在氧化应激所致急性乳鼠培养心肌细胞损伤中的作用被引量：5
- 2006年
- 目的:探讨HSP7 2对氧化应激所致心肌细胞急性损伤的保护作用。方法:用热休克预处理诱导新生大鼠心肌细胞中HSP7 2的表达,采用HSP7 2反义寡核苷酸阻断HSP7 2的表达。向原代培养的乳鼠心肌细胞中加入终浓度为0.5 mmol/L H2O2,以模拟氧化应激。测定乳酸脱氢酶释放率和细胞总蛋白质合成能力。结果:氧化应激引起心肌细胞乳酸脱氢酶释放率明显升高,而细胞总蛋白质的合成降低。热休克预处理导致心肌细胞中HSP7 2表达明显增加,并使H2O2所致心肌细胞LDH释放率显著降低,细胞总蛋白质的合成基本恢复正常水平。HSP7 2反义寡核苷酸能在很大程度上阻断HSP7 2的表达及热休克预处理所所致的心肌细胞保护作用。结论:在热休克预处理减轻过氧化氢所致乳鼠心肌细胞急性损伤的作用中,HSP7 2发挥了主要作用。
- 罗学滨刘可易宇欣王浩刘梅冬肖献忠邓恭华
- 关键词：热休克蛋白72反义寡核苷酸氧化应激
- 研究生课程“人类疾病动物模型的研究进展”的设立与实践被引量：3
- 2019年
- 本文通过无记名问卷调查,分析在中南大学湘雅医学院2016、2017级共470名医学博士研究生中开设的"人类疾病动物模型的研究进展"课程的教学满意度和教学效果。共发放无记名问卷470份,回收有效问卷449份,统计后获得如下评价结果:①大部分学生认为该课程很有实用性,很满意课程的教学方式,认为课程内容设置很好且授课信息量适中,对国内外研究现状的把握度很好;②大部分学生认为课程的很大程度完善了自身知识结构,培养了自身研究兴趣,提高了自身科研、创新能力。"人类疾病动物模型的研究进展"课程通过设立教学目标,选择合适的教学内容与授课方式,已达到教学目的,在医学研究生教学中值得推广和应用。
- 谭斯品肖子辉涂自智邓恭华王慷慨刘瑛蒋碧梅张华莉肖献忠
- 关键词：研究生课程人类疾病动物模型教学效果分析
- 热休克蛋白70对过氧化氢所致乳鼠心肌细胞核仁损伤的保护作用被引量：24
- 2002年
- 为探讨氧化应激时体外培养的新生Wistar大鼠心肌细胞核仁损伤以及热休克蛋白 70对损伤核仁的保护作用 ,用 0 .5mmol L过氧化氢处理原代培养的心肌细胞 0、30、6 0min ,采用甲苯胺兰染色核仁及电镜技术观察核仁结构的改变 ;并通过热休克预处理及反义技术诱导或阻断热休克蛋白 70的表达 ,观察其对核仁损伤的保护作用。结果发现 ,光镜下过氧化氢损伤组心肌细胞核仁染色颗粒数增多 ,电镜下核仁结构松散、核仁组份分离。热休克预处理导致心肌细胞中热休克蛋白 70表达明显增加 ,并使过氧化氢所致心肌细胞核仁损伤明显减轻。免疫组织化学显示过氧化氢可引起热休克蛋白 70从胞浆到胞核 ,再到核仁的移位。热休克蛋白 70反义寡核苷酸很大程度上能阻断热休克预处理对心肌细胞核仁损伤的保护作用。结果提示 ,过氧化氢可导致体外培养的新生大鼠心肌细胞核仁结构损伤 ,热休克蛋白 70高表达及其向核仁的移位对上述损伤具有明显保护作用。
- 王慷慨邓恭华肖卫民赵振宇蒋磊刘梅冬肖献忠
- 关键词：核仁心肌细胞过氧化氢热休克蛋白70
- 设计性实验——科研能力培养与素质教育的前奏——七年制01级病理生理学设计性实验的启示被引量：17
- 2005年
- 21世纪的竞争是人才的竞争,通过应试来选拔人才的教育观念已不适应时代的要求。教育界通过自我反思,针对当前的教育现状,特别是应试教育暴露出来的弊端,提出了素质教育。在各个不同的教育阶段和教育层次,素质教育应该有不同的重点和手段。大学阶段,教育目标具有明显的专业倾向,教育内容也具有显著的专业特点。对身心发育跨入成熟期的医学生来讲,素质教育理应结合专业教育步入一个较高的阶段。在实验教学方面,从传统的验证性实验,过渡到设计性实验,是医学实验教学体制的必然转变。这一转变,也必将成为科研能力培养与素质教育的前奏。
- 段春岳张彦新贺鑫谷兰杨小松邓恭华邹江
- 关键词：素质教育验证性实验设计性实验
- Kruppel样因子4过表达对C_2C_(12)肌原细胞中热休克蛋白25表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的观察Kruppel样因子4过表达对热休克蛋白25表达的影响。方法运用稳定转染pcDNA3.1/myc-His(-)和Kruppel样因子4-pcDNA3.1/myc-His(-)两种细胞株,采用逆转录聚合酶链反应观察Kruppel样因子4在生理状态和热休克反应时对热休克蛋白25 mRNA表达的影响;采用Western blot观察Kruppel样因子4在生理状态和热休克反应时对热休克蛋白25蛋白表达的影响。结果在正常状态下,两种细胞热休克蛋白25 mRNA及蛋白表达水平均较低。生理状态下,热休克恢复1 h及3 h Kruppel样因子4过表达细胞株热休克蛋白25 mRNA表达水平明显高于转空载体细胞;至热休克恢复6 h后两组细胞热休克蛋白25 mRNA表达无明显差异。在生理状态及热休克恢复不同时间后,Kruppel样因子4过表达细胞热休克蛋白25蛋白表达水平均较空载体组明显增加。结论在生理状态下和热休克反应中,Kruppel样因子4过表达均能够促进C2C12肌原细胞中热休克蛋白25高表达。
- 王婧刘瑛易宇欣张华莉刘梅冬肖献忠邓恭华
- 关键词：病理学与病理生理学稳定转染过表达
