郑必强
- 作品数：6 被引量：39H指数：4
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：上海市科委纳米专项基金国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨肉瘤细胞株MG-63中肿瘤干细胞的生物学特性被引量：2
- 2013年
- 背景:骨肉瘤干细胞在骨肉瘤的发生、复发及对化疗药物的耐药性中发挥关键作用,而目前关于骨肉瘤干细胞体外分离培养及生物学特性研究的报道甚少。目的:从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出具有干细胞特征的高致瘤性细胞亚群,检测肿瘤干细胞特异性标志物CD105的表达。方法:无血清悬浮培养法从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出骨肉瘤细胞球,应用流式细胞术检测细胞球中CD73、CD90、CD105的表达,免疫荧光法检测骨肉瘤细胞株及骨肉瘤细胞球中CD105的阳性率,免疫磁珠法分选出CD105+和CD105-的细胞,传代后分别接种于NOD/SCID小鼠评估其致瘤性。结果与结论:CD105在球体细胞中高表达,此类肿瘤细胞具有高侵袭性和高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中仅需移植1000个细胞即可形成肿瘤,这些细胞具有自主生长特性,能够在无血清条件下长期培养,CD105+骨肉瘤细胞显示了干细胞的生物学特性,CD105可能成为骨肉瘤干细胞的表面标志之一。
- 冯大鹏黄权李焱郑必强肖建如
- 关键词：干细胞肿瘤干细胞骨肉瘤细胞株MG-63CD105
- 正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞相关指标的表达被引量：5
- 2014年
- 目的检测人正常肺及肺腺癌组织中细支气管肺泡干细胞（BASC）相关指标，明确BASC是否在人肺组织中存在及其组织定位。方法采用组织免疫荧光方法将经过脱蜡、抗原修复好的组织切片通过5％脱脂奶粉溶液封闭检测，再通过先后加入一抗、二抗以及染核、封片等在荧光显微镜下观察，判定结果时可见合成蛋白复合物（SPC）和八聚体结合转录因子4（OCT4）阳性表达细胞呈绿色，Clara细胞分泌蛋白（CCSP）阳性表达细胞呈红色，而SPC／CCSP或CCSP／OCT4双阳性细胞呈黄色，细胞核呈蓝色。结果在人正常肺组织中可检测到SPC、CCSP及OCT4。免疫荧光检测显示，正常肺组织中均可检测到SPC、CCSP双阳性表达细胞，呈现BASC的表型特征，且均表达OCT4，定位于细支气管一肺泡导管连接处。在人肺腺癌组织中亦可检测到BASC样癌干细胞，在30例肺腺癌组织中26例同时检测出SPC及CCSP，属检测出BASC病例。18例同时检测出OCT4表达。结论人正常肺组织中可检测到BASC，且在肺腺癌组织中可检测到具有BASC表型特征的癌干细胞，提示人肺腺癌可能源自BASC的恶性转化。
- 邵建伟陆一鸣韩宝惠董强刚郑必强张雪艳
- 关键词：肿瘤干细胞肺腺癌
- 肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析被引量：21
- 2008年
- 目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。
- 耿沁董强刚姚明郑必强胡晶莹周瑾赵仰星闫明霞甘愉
- 关键词：细胞培养技术干细胞动物实验
- 人肺腺癌干细胞的表型及其与肺腺癌患者预后的关系被引量：10
- 2009年
- 目的检测肺腺癌组织中肿瘤干细胞的表型，并分析其与肺腺癌患者预后的相关性。方法采用免疫荧光法检测57例肺腺癌组织肿瘤干细胞的3个表型标志，即表面活性蛋白C（SP-C）、细支气管非纤毛柱状细胞标志蛋白（CCSP）和OCT4。采用Cox多因素分析，评估检测结果与临床病理指标及患者生存之间的关系。结果57例肺腺癌组织均表达SP-C，其中52例可观察到CCSP^＋细胞，具有肺细支气管肺泡干细胞（BASC）的表型特征。52例SP-C^＋CCSP^＋绀织中，40例同时表达OCT4，进入OCT4^＋BASC组；12例不表达OCT4，进入OCTd—BASC组。统计分析的结果显示，肺腺癌干细胞的表型与肺腺癌的分化相关，OCT4^＋BASC表型多见于高中分化肿瘤，而OCT4^-BASC表型以低分化肿瘤为主。Cox多因素分析的结果显示，肺腺癌患者的生存与肿瘤的TNM分期及OCT4^＋BASC表型相关。结论肺腺癌干细胞具有BASC的表型特征（SP—C^＋CCSP^＋），此类肿瘤干细胞表达自我更新基因OCTd时，恶性程度高，患者的预后差。
- 张雪艳郑必强韩宝惠黄进肃耿沁徐惠莉周瑾董强刚
- 关键词：肺肿瘤肿瘤干细胞OCT4预后
- 人肺腺癌干细胞的实验及临床初步研究
- 目的:对人肺腺癌干细胞进行BASC特征、分化及转移能力分析，并检测癌干细胞3个表型标志（SP-C，CCSP和OCT4）在人肺腺癌组织中表达和分析其与患者预后的相关性。
方法:对人肺腺癌干细胞经流式细胞纯化或无血...
- 郑必强
- 关键词：肺腺癌细胞纯化肿瘤细胞癌干细胞
- 文献传递
- 人肺腺癌干细胞源自肺脏细支气管肺泡干细胞的初步研究被引量：12
- 2008年
- 背景与目的已有的研究提示肺腺癌源自肺脏细支气管肺泡干细胞(BASC)的恶性转化,但该假说在人体中尚未得到证实。本研究旨在对人肺腺癌干细胞的BASC特征进行分析。方法人肺腺癌干细胞经流式细胞纯化或无血清悬浮培养获得,所得细胞采用免疫荧光检测BASC特征性标志并经尾静脉注射至免疫缺陷小鼠观察肿瘤转移。结果人肺腺癌细胞A549和SPC-A1均表达Ⅱ型肺泡细胞标志SP-C,但少数细胞表达支气管非纤毛柱状细胞标志CCSP和胚胎干细胞基因OCT4,提示此类细胞属于BASC样癌干细胞。采用流式细胞分选技术纯化其中的CD24+CD22+肺腺癌干细胞后,发现此类细胞属于CCSP+SP-C+OCT4+细胞,其表型与BASC相同。此外,肺腺癌细胞在无血清培养条件下经EGF/IGF-1/FGF-10刺激能够形成悬浮生长的球体,这类肺球体细胞的特征也与BASC相同。肺球体细胞在含血清条件下培养2周即发生分化,表现为CCSP和OCT4表达丢失。动物实验揭示肺球体细胞具有高转移能力。结论人肺腺癌干细胞具有BASC特征并表达胚胎干细胞基因OCT4,此类肺癌细胞可能与小鼠肺腺癌一样,源自肺脏BASC的恶性转化。
- 郑必强周瑾耿沁董强刚
- 关键词：肺肿瘤癌干细胞支气管
