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重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体的构建及表达被引量：2: 2007年; 目的:构建重组人缺氧诱导因子-1α腺相关病毒载体(rAAV-HIF-1α).并观察其在原代培养海马神经细胞中的表达。方法:构建含人类HIF-1α基因的AAV载体质粒pSNAV-HIF-1α.转染BHK21细胞并选择培养获得的G418抗性细胞,即AAV载体细胞株.以重组单纯疱疹病毒感染此细胞株获得rAAV-HIF-1α,PCR技术鉴定病毒.地高辛标记的CMV探针点杂交方法测定重组病毒滴度.SDS-PAGE电泳测定病毒纯度.Western印迹检测目的蛋白的表达。结果:PCR证实rAAV- HIF-1α内含有人HIF-1α基因序列,病毒滴度为1×10^(12)/ml.纯度大干98%,感染原代培养海马神经细胞后能够表达目的蛋白。结论:成功构建了rAAV-HIF-1α,为进一步应用该基因进行临床基因治疗提供了实验依据。; 柴锡庆刘凌云郑龙王俊霞程桂花杨涛; 关键词：缺氧诱导因子-1Α 原代培养海马腺相关病毒

犬传染性肝炎核酸疫苗的构建及免疫效果评价被引量：1: 2007年; 目的获得犬传染性肝炎保护性抗原Loop重组蛋白及pVAX1-CpG-Loop重组质粒,并评价其诱导特异性免疫应答的水平。方法PCR扩增犬腺病毒Ⅰ型抗原表位Loop基因,构建至原核表达载体pET28a(+)和真核表达载体pVAX1-CpG(+)中;pET28a-Loop重组质粒转化BL21(DE3),表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、亲和层析纯化抗原蛋白,采用肌内注射、电转导方法,prime-boost免疫策略,pVAX1-CpG-Loop重组质粒股四头肌注射免疫小鼠,抗原蛋白加强免疫后进行免疫效果的评价。结果ELISA方法检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生,淋巴细胞增殖实验(MTT和CCK-8)、细胞因子和CD4+、CD8+分子测定表明DNA疫苗可以诱发TH1型免疫;中和实验表明表达蛋白诱导小鼠产生的抗体具有中和病毒的作用。结论构建的犬传染性肝炎pVAX1-CpG-Loop核酸疫苗具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力。; 王俊霞郑龙张霞尤红煜刘军须徐增年刘福英; 关键词：肝炎传染性核酸疫苗免疫学

不同转移潜能大鼠肝癌细胞株及肝癌动物模型的建立: 张焕铃段肖翠巨英超刘健敏郑龙张建刚连伟光; 该课题以Wistar大鼠为实验动物，采用DEN和NMOR联合诱导大鼠建立诱发性肝癌模型，从中获得高、低转移潜能大鼠肝癌细胞各3株，经检测发现6株细胞在迁移率和克隆形成率方面存在差异。利用上述细胞用于移植性肝癌模型制备，建...; 关键词：; 关键词：肝癌肿瘤转移抗肿瘤药物动物实验

实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立被引量：7: 2005年; 目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌。方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应(PCR)扩增三种动物皮肤病原真菌标准株:须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌。结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同。结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌。; 郑龙王俊霞刘福英尤红煜刘军须丛斌; 关键词：皮肤真菌病随机扩增多态DNA技术

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郑龙